Name: ניטור גרורות סרטן ונגעים Osteolytic עם פליטת אור CT ו - Micro Imaging (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: למד ניטור גרורות סרטן ונגעים אוסטיאוליטיים בעכברים באמצעות דימות ביולומינסצנציה ומיקרו CT. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחר התקדמות המחלה והשפעתה על עצמות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

הדמיה אורך משמש טרום קליניים לעקוב אחר התקדמות המחלה או למדוד את ההשפעה של טיפול. ב אונקולוגיה, שיטות אופטיות לספק כלים קפדני כדי לפקח על הגידול ולספק quantitation המדויק של צמיחת תאים או ביטוי גנים בכל נקודת זמן במחקר כזה. שינויים אנטומיים ניתן למדוד באמצעות טכניקה ברזולוציה גבוהה כמו microCT, אבל עבור הדמיה האורך במינון נמוך רנטגן יש להשתמש כדי להימנע ממצאים ביולוגיים. תמונות אופטיות microCT יכול להיות שותף רשום על מנת לספק שילוב של נתונים תפקודית אנטומי להבטיח כי המידע המרבי מופק המודל החי. 1. תא הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Caliper מספקת מגוון בלוציפראז להביע שורות תאים סרטניים למחקר טרום קליניים במודלים של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מד&quot;א-MB-231-Luc-D2H2LN הוא התא האנושי החלב הגידול קו המבטא את הגן בלוציפראז אשר יכול לשמש כאינדיקטור אופטי של tumorgenesis in vivo. קו זה תא נוצר מתוך גרורות הצומת ספונטנית הלימפה שמקורו בגידול בלוק החלב D3H1 שומן ידוע באגרסיביות וליצור עוד גרורות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאים ניתנים כתרבות הפתוגן ללא קפוא אשר בקלות גדל מדיה סטנדרטי ללא צורך סמנים הבחירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לוודא פעילות בלוציפראז לפני זריקה לתוך החיה בבקבוק ומחוברות 90% נאסף על ידי trypsinization. פעילות בלוציפראז נמדדת מחלק 50,000 תאים צלחת microtiter וביצוע דילול סדרתי. </li></ol> 2. Intracardiac הזרקה של תאים חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הזריקה, בעלי חיים מורדמים באמצעות 3% isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1-3000000 התאים מוזרקים בנפח 50ul אל החדר השמאלי. ההשעיה תא מכיל 150ug/ml D-Luciferin לאמת טכניקה ההזרקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לאשר בזריקה עכברים לתקן intracardiac הם צילמו במערכת IVIS. עכברים להראות אות BLI בכל הגוף כבר הזריק כראוי. אם האות הוא מקומי לא התאים הוזרקו נכונה בלב. </li></ol> 3. BLI הדמיה לפקח גרורות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבורת הדמיה תומך בעכבר עבור לכידת נתונים ספקטרום הן IVIS ומערכת microCT QuantumFX. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המעבורת מסייע לשמור על החי באותה תנוחה הדמיה משלבת אותות fiducial לסייע אוטומטי שיתוף ההרשמה. החדר מחובר מאדה isofluorance לשמור על הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדמיה אשף בתוכנה חיים תמונה 4.1 יכול לשמש כדי לבחור אוטומטית את זמן החשיפה, f-לעצור binning להבטיח איסוף נתונים כמותיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספר תמונות ניתן לרכוש והשוו במחקרים ארוכי טווח המכסים שניות או חודשים בהתאם לאופי הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 6 הימים שלאחר הזרקה של תאים, BLI הדמיה עם IVIS ספקטרום מראה גרורות לעצם בשבעה מתוך תשעה עכברים. </li></ol> 4. ניטור אורך של נגעים osteolytic באמצעות מיקרו-CT <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הראו כי גרורות בעצמות ברור לעין באמצעות BLI היו צילמו במערכת קוונטית FX-CT מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> FX קוונטית מערכת מיקרו CT מספקת תמונות באיכות גבוהה במינון רנטגן נמוך מספיק כדי לאפשר נכון האורך מיקרו CT במחקרים פרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השפלה עצם בשתי הרגליים ניתן לנטר longitudinally באמצעות מערכת זו בתוך פחות מדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים מורדמים עם 3% ו isoflurane ניתן להעביר ישירות מתוך מערכת Spectrum IVIS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני הדימויים הם 60mm מאוחה כדי ללכוד את התצוגה החיה כולה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> FOV 30 מ&quot;מ הוא אידיאלי עבור הדמיה מפרק הברך ברזולוציה גבוהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סריקה אחת עם רזולוציה גבוהה מספיק כדי למדוד ולכמת גרורות בעצמות לוקחת רק 18 שניות ומספק מינון של 13mGy בלבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם צילמו עד 8 פעמים ב -36 ימים עם מערכת מיקרו CT מבלי להשפיע על הצמיחה בריאות הגידול או של החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ה-CT מיקרו הדמיה הראו כי העצם leisions נראו ביום 10 והתקדם במהירות רבה, המתאים לגידול אות BLI. </li></ol> 5. 3D ושיתוף רישום וניתוח של BLI ו uCT <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע תמונות נתפסו משני הספקטרום IVIS ו Quantum FX מיקרו CT נתוני המערכת יכול להיות שותף רשום לתוך שחזור 3D. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמונות MicroCT מיוצאים כקובצי DICOM וטעון תמונת חיים 4.1 כלי 3D שיטת רב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב התוכנה תמונה Living להפעיל את התוכנית DLIT לשלושה ממדית לשחזר את האות האופטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכלי fiducial בתוכנה משמש שותף לרשום את האות האופטי BLI לתמונה מיקרו CT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Coregistered ערכות נתונים ניתן לנתח באופן כמותי כדי לפקח על מספר פרמטרים במהלך התקדמות המחלה הנה אנחנו מעקב גדילה של הגידול גרורתי יחד עם התפתחות הנגע osteolytic בעצם. </li> &lt;/ Ol&gt;

<ol><li>Jenkins, D. E., Hornig, Y. S., Oei, Y., Dusich, J., Purchio, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescent+Human+Breast+Cancer+Cell+Lines+that+Permit+Rapid+and+Sensitive+in+vivo+Detection+of+Mammary+Tumors+and+Multiple+Metastases+in+Immune+Deficient+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Bioluminescent Human Breast Cancer Cell Lines that Permit Rapid and Sensitive in vivo Detection of Mammary Tumors and Multiple Metastases in Immune Deficient Mice.</a> Breast Cancer Research. 7, R444-R454 (2005).</li>
<li>Cowey, S., Szafran, A. A., Kappes, J., Zinn, K. R., Siegal, G. P., Desmond, R. A., Kim, H., Evans, L., Hardy, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+Cancer+Metastasis+to+Bone%3A+Evaluation+of+Bioluminescent+Imaging+and+MicroSPECT%2FCT+for+Detecting+Bone+Metastasis+in+Immunodeficient+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Breast Cancer Metastasis to Bone: Evaluation of Bioluminescent Imaging and MicroSPECT/CT for Detecting Bone Metastasis in Immunodeficient Mice.</a> Clinical and Experimental Metastasis. 24, 389-401 (2007).</li>
<li>Labrinidis, A., Hay, S., Liapis, V., Ponomarev, V., Findlay, D. M., Evdokiou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zoledronic+Acid+Inhibits+Both+the+Osteolytic+and+Osteoblastic+Components+of+Osteosarcoma+Lesions+in+a+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Zoledronic Acid Inhibits Both the Osteolytic and Osteoblastic Components of Osteosarcoma Lesions in a Mouse Model.</a> Clinical Cancer Research. 15, (2009).</li>
<li>Kaijzel, E. L., Pluijm, G. vander, Lowik, C. W. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-Body+Optical+Imaging+in+Animal+Models+to+Assess+Cancer+Development+and+Progression%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Whole-Body Optical Imaging in Animal Models to Assess Cancer Development and Progression.</a> Clinical Cancer Research. 13, 3490-3497 (2007).</li>
<li>Minn, A. J., Kang, Y., Serganova, I., Gupta, G. P., Giri, D. D., Doubrovin, M., Ponomarev, V., Gerald, W. L., Blasberg, R., Massague, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+Organ-Specific+Metastatic+Potential+of+Individual+Breast+Cancer+Cells+and+Primary+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Distinct Organ-Specific Metastatic Potential of Individual Breast Cancer Cells and Primary Tumors.</a> The Journal of Clinical Investigation. 115, (2005).</li>
<li>Xu, H., Christensen, A., Kuo, C., Nilson, D., Lim, E., Whalen, J., Kim, J. B., Zhang, N., Singh, R., Oldfield, S., Troy, T., Rice, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Co-registration+of+in+vivo+Optical+Tomography+and+Micro-CT+for+Longitudinal+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Word+Molecular+Imaging+Congress%22%5BJournal%5D)">Co-registration of in vivo Optical Tomography and Micro-CT for Longitudinal Studies.</a> Word Molecular Imaging Congress. , (2010).</li>
</ol>

הכותבים הם עובדי Caliper מדעי החיים שעושים את מכשיר בהשתתפות במאמר זה.

הדמיה חיה קטנה עם microCT הוחל נגעים osteolytic ניטור בתנאים פתולוגיים, כגון התפתחות הגידול (Cowey et al 2007;.. Labrinidis et al, 2009). כמו פליטת אור הדמיה של גידולים שכותרתו בלוציפראז אומצה באופן נרחב טרום קליני, שיתוף רישום של פליטת אור תמונות ו microCT סיפק הגדרה טובה יותר של מיקום אנטומי של אותות פליטת אור (Kaijzel et al. 2007). המחקר הקודם עם קו בלוציפראז שכותרתו הגידול תא השד מד&quot;א-MB-231-Luc-D3H2LN הראה גרורות לעצם ופיתוח של נגעים osteolytic הבאים הזרקה תוך הלב (ג&#39;נקינס et al 2005;. Minn et al, 2005). במחקר זה, בחנו מחקר אורך של גרורות הגידול בפעילות osteolytic עם combinatory אופטי נמוך קרינה במינון הדמיה microCT עם מודל MDA-MB-231-Luc-D3H2LN מערכתית גרורות. ביצענו הדמיה רציפים עם IVIS ספקטרום ו Quantum FX microCT מערכות פליטת אור מושגת ו-CT שיתוף אחת עם התוכנה החדשה שפותחה שלנו תמונה 4.1 חיים (הנג et al. 2010). הדמיה פליטת אור עם IVIS מספק פולשני זיהוי של התאים הסרטניים עם רגישות גבוהה, המאפשר גידולים להיות מזוהה בשלב מוקדם. הדמיה עם Quantum FX מאפשרת שחזור מדויק 3D של נגעים עצם מידע אנטומי מפורט. Quantum FX המערכת מציעה קרינה במינון נמוך הדמיה, המאפשרת ניטור האורך של התקדמות המחלה. מתאם של נגעים עצם גרורות הגידול תוארה בדמות שיתוף רשום, ואת היתרון של מעקב multimodality התפתחות הנגע longitudinally הודגם בבירור.

ניטור גרורות סרטן ונגעים osteolytic עם פליטת אור ct ו - micro imaging

Monitoring Tumor Metastases and Osteolytic Lesions with Bioluminescence and Micro CT Imaging

משלוח intracardiac בעקבות מד&quot;א-MB-231-Luc-D3H2LN התאים נו / נו עכברים, גרורות מערכתיות שפותח את החיות מוזרק. הדמיה באמצעות ספקטרום פליטת אור IVIS הועסק כדי לפקח על חלוקת ופיתוח של תאים סרטניים בעקבות הליך הלידה כולל שחזור DLIT למדוד את האות הגידול ומיקומו. התפתחות גרורות לרקמות העצם גורם לפעילות osteolytic ונגעים אל עצם השוק ועצם הירך הוערכו longitudinally באמצעות מיקרו-CT. ההדמיה בוצעה באמצעות FX קוונטית מערכת מיקרו CT עם הדמיה מהירה במינון נמוך רנטגן. קרינה במינון נמוך מאפשר הפעלות הדמיה מרובים להתבצע במינון רנטגן מצטבר הרבה מתחת LD50. מכשיר הדמיה עכבר מעבורת שימש תמונה ברצף עם שני העכברים ספקטרום IVIS ו Quantum FX להשגת מיצוב חיה מדויק פליטת אור והן תמונות CT. אופטית ו-CT ערכות נתונים היו שיתוף רשום ב 3-dimentions באמצעות Living 4.1 תוכנה תמונה. גישה זו רב במצב מאפשר מעקב צמוד של גדילה והתפתחות הגידול בו זמנית עם פעילות osteolytic.

מודל עכבר ניסיוני של גרורות בעצמות הוקמה בעקבות משלוח intracardiac של בלוציפראז להביע תאים סרטניים החלב. התפתחות הגידול נבע הנגע osteolytic נוטרו longitudinally עם פליטת אור מיקרו CT הדמיה.

ניטור גרורות סרטן ונגעים Osteolytic עם פליטת אור CT ו - Micro Imaging

בעקבות הזרקה תוך-לבבית של תאי MDA-MB-231-luc-D3H2LN לעכברי Nu/Nu, התפתחו גרורות סיסטמיות בבעלי החיים המוזרקים. ביומינסנס...

<a class="grey_button" href="/video/3353">
עברית
</a>

monitoring-tumor-metastases-osteolytic-lesions-with-bioluminescence

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הדמיה של פליטת אור ועין מתנהלת פעילות היפוקסיה, גורם 1α מוחל לפקח היפוקסיה תוך גולגולתי התפתחות גידולים של סרטן השד מודל גרורות במוח העכבר.

בתחום ההדמיה vivo של פליטת אור Dynamics היפוקסיה גידול של גרורות סרטן השד המוח במודל של עכברים

בפתוגנזה של גרורות בעצמות, אנגיוגנזה היא תהליך חיוני ולכן מהווה יעד עבור הדמיה וטיפול. כאן, אנו מציגים מודל עכברים של אתר ספציפי גרורות סרטן השד עצם לתאר אסטרטגיות אנגיוגנזה הלא פולשני...

רב מודלי הדמיה של אנגיוגנזה מודל עכברים עירום של גרורות סרטן השד עצם באמצעות דימות תהודה מגנטית, טומוגרפיה ממוחשבת נפחית ו אולטראסאונד

מודלים של בעלי חיים לעתים קרובות מנוצלים כדי ללמוד גרורות סרטן העצם. בפרוטוקול זה יתאר שתי שיטות נפוצות של חיסון ללימודי גידול גרור בעצמות ומתארים בקצרה כמה מהניתוחים מנוצלים כדי לעקוב ולכמת דגמים אלה.

מודלים של גרורות עצם

מקור:מרינה אראנטס רדיקי1, ויקטור קרלוס מלו1,ויקטורה פאס מצ'אדו1, מרסיה כריסטינה אוליביירה דה רושה1, ז'קלין ואז דה אוליביירה1, לואנה כריסטינה קמרגו1,2, לואיס אלכסנדר מולמן1, ריקרדו בנטס אזבדו1, סוניה נאיר באו1, ז'ואאו פאולו פיגרו לונגו11המכון למדעי הביולוגיה, אוניברסיטת ברזיליה, 2המחלקה לתהליכים פסיכולוגיים בסיסיים, המכון לפסיכולוגיה, אוניברסיטת ברזיליהסרטון זה מדגים את ההליך למעקב אחר התקדמות הגידול in vivo על ידי הזרקת תאי אדנוקרצינומה שדיים המבטאים לוציפראז לעכבר נקבה וניטור אותות ביולומינסנט...

הדמיה ביולומינסנט של התקדמות גידול השד במודל עכבר נקבה

הדמית פליטת אור היא כלי ידוע לאיתור גידולים וגרורים, אבל כימות של התמונות האלה לעתים קרובות דורש חישובים מורכבים ומכשירים בפרט. אנו מתארים את שיטת luminoscore הקלה לשימוש, מבוסס על תנאי רכישה מדויקים, אין צורך בחישובים, ומאפשר ניטל גידול ותגובה לטיפול כדי להיות במעקב במודלים של עכברים.

פליטת אור מבוסס שיטת כימות גידול עבור התקדמות גידול ניטור שפעות טיפול מודלים לימפומה העכבר

כאן נשתמש זוהרים, רנטגן, והדמיה פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/שחושב טומוגרפיה ללמוד איך מעכבים פעילות mTOR משפיעה על engrafted-מח עצם מיאלומה גידולים במודל xenograft. דבר זה מאפשר ניתוחים פיזיולוגית הרלוונטיים, לא פולשנית, והן עם מודאלים מרובים של מיאלומה נגד ההשפעה של טיפולים מיקוד engrafted מח עצם מיאלומה גידולים ויוו.

הדמיה עם מודאלים מרובים זוהרים, פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/חישובית טומוגרפיה של מיאלומה נפוצה מח עצם Xenografts בעכברים ליקר ביצים

עבודה זו מוגדרות מראש פרוטוקול מתקדם כדי להעריך במדויק את טעינת הגידול על ידי זיהוי של חלבון פלורסנט ירוק אותות biלומינסנציה, כמו גם שילוב של טכניקת גילוי מולקולרי כמותי.

לומדת משולשת סרטן השד שלילי באמצעות אורתובנושא שד סרטן השד מודל

הגישה המתוארת משלבת הזנב הנסיוני גרורות מוסר עם הדמיה vivo live בעלי חיים כדי לאפשר ניטור בזמן אמת של גרורות סרטן השד היווצרות וצמיחה בנוסף לקוונפיקציה של מספר גרורות וגודל בריאות.

שימוש משולב של הזנב וריד גרורה Assays ובזמן אמת ב Vivo הדמיה כדי לכמת מושבת סרטן השד ונטל בריאות

מודלים של גרורות בעצמות אינם מפתחים גרורות באופן אחיד או בשכיחות של 100%. הזרקה ישירה של תאי גידול תוך אוסאוסיים עלולה לגרום לתסחיף של הריאה. אנו מציגים את הטכניקה שלנו מידול גידולי עצם ראשוניים וגרורות עצם באמצעות השתלת גידול מוצק לתוך העצם, המוביל לקליטה וצמיחה הניתנים לשחזור.

מידול גידולי עצם ראשוניים וגרורות עצם עם השתלת גידול מוצק השתלת עצם לעצם

כאן אנו מתארים שיטת ניטור לא פולשנית הכוללת לוציפראז וביטוי חלבון פלואורסצנטי ירוק בקווים שונים של תאי סרטן השד. פרוטוקול זה מספק טכניקה לניטור היווצרות גידולים והתיישבות גרורתית בזמן אמת בעכברים.

ניטור צמיחת סרטן השד והיווצרות מושבה גרורתית בעכברים באמצעות Bioluminescence

כתב היד מתאר מתודולוגיה להקמה וכן ניטור גדילה אורכי של גרורות ריאה ספונטניות מגידולי שד בהזרקה אורתוטופית, הניתנת להתערבות בכל שלבי המפל הגרורתי.

ב Vivo הדמיה למדידת גרורות ריאה ספונטניות של תאי גידול שד בהזרקה אורתוטופית

למד ניטור גרורות סרטן ונגעים אוסטיאוליטיים בעכברים באמצעות דימות ביולומינסצנציה ומיקרו CT. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחר התקדמות המחלה והשפעתה על עצמות.

ניטור גרורות סרטן ונגעים Osteolytic עם פליטת אור CT ו - Micro Imaging

גלה סרטונים נוספים