Name: , טיהור הכנה, אפיון של מכלולים Lanthanide לשימוש בתור סוכנים בניגוד עבור דימות תהודה מגנטית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 21 s
Description: למדו סינתזה, טיהור ואפיון של מכלולי לנתנידים לתיוג מולקולות ביולוגיות בדימות תהודה מגנטית. השיטה משלבת שליטה ב-pH, דיאליזה ומדידות פעילות הרפיה לאימות סוכני ניגוד.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

בהכרת תודה אנו מודים קרנות ההפעלה של וויין סטייט (MJA), מענק מהקרן האמריקנית לחקר ההזדקנות (SMV), וכן נתיב בפרס קריירה מעבר העצמאות (R00EB007129) מן המכון הלאומי של הדמיה ביו Bioengineering של המכון הלאומי לבריאות (MJA).

1. Metalation באמצעות LnCl 3 מלחי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים את ליגנד במים כדי לייצר פתרון 30-265 מ"מ. ליגנד 2 - (4-isothiocyanatobenzyl)-diethylenetriamine חומצה pentaacetic (p-SCN-BN-DTPA) שימש וידאו זה בריכוז של 73 mM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את ה-pH של התמיסה של ליגנד על בין 5.5 ו 7.0 על ידי הוספת 1 ​​M NH 4 OH. בסרטון הזה, 0.2 מ"ל של הפתרון 1 M NH 4 OH היה ​​בשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 1-2 ושווי של LnCl 3 במים כדי לייצר פתרון עם ריכוז של mM 5000-1000. בסרטון הזה, EuCl 3 ו GdCl 3 שימשו ריכוזי mM 111. עודף של מתכת משמש לעיתים קרובות לכונן metalation השלמת וכתוצאה מכך לפשט טיהור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים את הפתרון של LnCl 3 לפתרון ליגנד תוך ערבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תוספת של LnCl 3, להתאים את ה-pH של תערובת התגובה שהתקבל בין 5.5 לבין 7.0 ידי הוספת 0.2 M NH 4 OH. סך של 0.5 מ"ל של פתרון 0.2 M NH 4 OH שימש וידאו. אם ליגנד שלך מכיל חומצה רגיש קבוצות פונקציונליות, להתאים את רמת החומציות פעמים רבות במהלך שלב זה. זהירות - אם הפתרון הופך בסיסי מדי, בסיס באף אחת מהקבוצות רגיש פונקציונליים, כמו isothiocyanate, יהיה שניתנו שמיש עבור הצמידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג התגובה באמצעות מדידות pH. התגובה היא להשלים כאשר רמת החומציות נשארת קבועה. </li></ol> 2. העלאת ה-pH הבדיקות (לא כלול ב וידאו זה, אבל טוב ligands ללא בסיס רגיש קבוצות פונקציונליות) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף מרוכז NH 4 OH לתערובת התגובה כדי להתאים את pH עד ≥ 11. צעד זה יהיה לזרז כל מתכת uncomplexed כמו הידרוקסיד מסיסים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סינון supernatant דרך פילטר 0.2 מיקרומטר. אם התערובת התגובה קבקבים את המסנן, centrifuging ו decanting לפני סינון מומלץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם דיאליזה לא יבוצעו, להסיר את הממס בלחץ מופחת (אידוי סיבובית או ייבוש להקפיא מומלץ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צעדים 2.1-2.3 ניתן לחזור אם lanthanide חינם נשאר. </li></ol> 3. דיאליזה הבדיקות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את צינורות דיאליזה באורך המתאים (על פי ההנחיות של היצרן) להחזיק את נפח דגימה תוך השארת אורך נוסף (כ 10% מנפח לדוגמה). בסרטון הזה, 100-500 דלתון משקל מולקולרי חתוכים (MWCO) קרום היה בשימוש, אבל יותר צינורות MWCO יכול לשמש המתאים אם נטיה מבוצע לפני metalation. כמו כן, קלטות דיאליזה יכול לשמש כחלופה צינורות דיאליזה אם תרצה בכך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם נדרשים על פי ההנחיות של היצרן, להשרות את צינורות דיאליזה לקצץ במים למשך 15 דקות בטמפרטורת הסביבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלאו מאגר דיאליזה (א 1 כוס L שימש וידאו) עם מים (dialysate). נפח dialysate צריך להיות כ 100x כי המדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף מקפלים אחד צינורות פעמיים ולהבטיח את החלק המקופל של צינורות עם מהדק סגר דיאליזה. עטפו את קצה הסגר בגומייה כדי לוודא שהוא נשאר סגור במהלך דיאליזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן את תערובת התגובה דרך פילטר 0.2 מיקרומטר, ו לטעון את תסנין אל הקצה הפתוח של הצינור נזהרים שלא לקרוע את צינורות. הקפד להשאיר מרחב הראש מספיק כדי לסגור את הצינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקפלים את הקצה הפתוח הנותרים של צינורות כפולה, מאובטח עם סגר, ועוטפים את הסגר עם גומייה כמו בשלב 3.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף בקבוקון זכוכית המכיל אוויר כדי לצבוט על קצה אחד של הצינור דיאליזה באמצעות גומייה. צרף בקבוקון המכיל חול כדי לצבוט השני. צלוחיות אלה מבטיחים כי צינורות נשאר שקוע dialysate. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צינורות מלאים המאגר דיאליזה המכיל dialysate. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים את dialysate באמצעות צלחת ומערבבים מגנטיים במהירות איטית (לא vortexing) בטמפרטורת הסביבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שינוי dialysate 3x במהלך יום (ב וידאו זה, dialysate השתנה ב 2.5, 6.5, 11.5 ו - ח), ולאחר מכן לאפשר דיאליזה להמשיך הלילה (עבור סכום כולל של 20-28 שעות של טיפול דיאליזה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את צינורות דיאליזה מתוך dialysate בזהירות לפתוח אחד סגר להסיר את המדגם. שטפו את צינורות דיאליזה 3x עם מים לשלב בין כביסות עם המדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המים בלחץ מופחת. ייבוש להקפיא משמש הווידאו הזה. </li></ol> 4. הערכת נוכחות של מתכת חינם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים את מורכבות מתכת חוצץ אצטט (הכנת החיץ: ממיסים 1.4 מ"ל של חומצה אצטית במים 400 מ"ל, כדי להתאים את pH 5.8 עם 1 מ NH 4 OH, ולהוסיף מים כדי לייצר בנפח כולל של 500 מ"ל) ומוסיפים את xylenol תפוז אינדיקטור (16 מיקרומטר במאגר pH 5.8). בסרטון הזה, 0.3 מ"ג מורכב פורק ב 0.3 מ"ל של חיץ 3 מ"ל של תמיסת אינדיקטור נוסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">זיהוי נוכחות של מתכת בחינם דרך תצפית של שינוי הצבע של האינדיקטור מצהוב סגול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם תרצה, בסכום של מתכת חינם ניתן לכמת ידי יצירת עקומת כיול 1. לחלופין, arsenazo את הצבע השלישי ניתן להשתמש במקום xylenol כתום 2. אם המתכת נותר חופשי, המדגם צריך להיות מטוהרים נוסף באמצעות דיאליזה, טור desalting, או בעלי ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה נוזלית (HPLC) לפני אפיון. </li></ol> 5. קביעת מספר מים תיאום (q) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון של האיחוד האירופי השלישי המכילים מורכבות (~ 1 מ"מ) H 2 O ועוד פתרון של ריכוז זהה D 2 O. לפני ניתוח, הפתרון D 2 O יש התאדו ונמוגו D 2 O שלוש פעמים כדי להסיר שאריות H 2 O. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים את פתרון מים קובט נקי, והמקום קובט לתוך spectrofluorometer. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע סריקות עירור ופליטה כדי לקבוע את מקסימום לכל (~ 395 ~ 595 ננומטר ננומטר, בהתאמה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו ניסוי זרחני זמן דעיכה באמצעות הפרמטרים הבאים: עירור ואת אורכי גל הפליטה נקבע מתוך 5.3 צעד, עירור ושיסף את פליטת רוחבי (5 ננומטר), פלאש לספור (100), עיכוב ראשוני (0.01 ms), עיכוב המרבי (13 מילישניות) , ולעכב תוספת (0.1 ms). תנאים אלה מתאימים ביותר תסביכים, אבל העיכוב המקסימלי וערכים תוספת ניתן להגדיל או להקטין על פי מין עם דעיכה ארוכה מאוד או קצרה מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 5.4 עם פתרון 2 O D מוכן בשלב 5.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתוך הארה, ריקבון נתונים המתקבלים ב 5.4 ו 5.5, העלילה יומן הטבעי של עוצמת לעומת הזמן. השיפוע של קווים אלה הם שיעורי ריקבון (τ -1) (איור 2). בסרטון הזה, Microsoft Excel 2007 היה השתמשו כדי ליצור את יומן מגרשים טבעי מן הנתונים הגולמיים. השתמש שיעורי ריקבון במשוואה שפותחה על ידי הורוקס ועמיתים לעבודה (EQ 1) 3. אם ליגנד שלך מכיל OH או NH קבוצות מתואמת מתכת, אז המשוואה חייבת להיות שונה לפני השימוש 3. </li></ol> eq 1: <img src="/files/ftp_upload/2844/2844eq1.jpg" alt="משוואה 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="משוואה 1"> 6. Relaxivity מדידות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את המצב היישום הרצוי על הנתח הרפיה זמן: T 1 (זמן רגיעה האורך) או T 2 (זמן רגיעה רוחבי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכינו סדרה של דגימות המכילות ריכוזים שונים של אלוקים השלישי המכילים מורכבים ממס מימית. בסרטון הזה, מים שימש הממס ופתרונות של 10.0, 5.00, 2.50, 1.25, 0.625, ו - 0 mM היו מוכנים. ממיסים מימית או מאגרים אחרים יכול לשמש, אולם חשוב להשתמש ממס כמו ריק. היקף הסופי של המדגם היא ספציפית המכשיר אשר נמצא בשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום מדגם במכשיר ולתת לו לשבת במשך 5 דקות כדי לאזן את הטמפרטורה של המכשיר (37 מעלות צלזיוס בסרטון הזה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבע את זמן הרפיה (ביחידות של s) על ידי התאמת הפרמטרים של התוכנה כדי לקבל עקומה מעריכית חלקה עבור T 1 או T 2 (עקומות נציג עבור T 1 ו-T 2 מוצגים איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 6.3 ו - 6.4 עבור כל דגימות כולל ריק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשב את ההפוכה של T נמדד 1 או T 2 ערכים ביחידות של s -1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגרש 1 -1 T או T 2 -1 ערכים לעומת ריכוז ה III (ביחידות של mM). בגלל האופי hygroscopic ה-III המכילות קומפלקסים, לאשר את ריכוז ה III באמצעות לספקטרופוטומטריה קליטה אטומי או מצמידים אינדוקטיבי ספקטרומטריית פלזמה המונית. התאם את העלילה עם קו ישר. העלילה נציג מוצג באיור 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השיפוע של הקו הוא מצויד relaxivity (r 1 או r 2 עבור T 1 ו-T 2, בהתאמה) יש יחידות של mM -1 s -1. </li></ol> 7. נציג תוצאות נציג נתונים עבור השלבים פרוטוקול זה נכללו טבלאות סעיף דמויות. בנוסף למספר מים התיאום ואפיון relaxivity המתואר בפרוטוקול, חשוב לאפיין את המוצרים הסופיים תוך שימוש בטכניקות כימי סטנדרטי. זהותו של המתחם ניתן להשיג באמצעות ספקטרומטריית מסה, ואת ספקטרום המונית נציג מראה את דפוסי איזוטופ אבחון ה III - והאיחוד האירופי השלישי המכילים קומפלקסים מוצגים באיור 5. יתר על כן, עבור מי שאינם ה III <img src="/files/ftp_upload/2844/2844fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> איור 1 תוכנית כלליות metalation וטיהור:. Scheme המתאר את הליך כללית metalation ואת הסיבות לבחירת דרכי טיהור שונות. <img src="/files/ftp_upload/2844/2844fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2 הארה בעוצמה העלילה:. העלילה נציג יומן הטבעי של עוצמת לעומת זמן של סעיף 5. המדרונות של קווי שנוצר עקומות דומות שנרכשו עבור המים ו-D 2 O פתרונות משמשים עם eq 1 לאפיין את מספר מים התיאום של האיחוד האירופי השלישי המכילים קומפלקסים. <img src="/files/ftp_upload/2844/2844fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3 ריקבון הרפיה זמן עקומות:. נציג נתונים עבור (משמאל) ו - T 1 (מימין) T 2 הרכישה. סטיות אלה צורות עקומת תייצר נתונים לא אמינים. <img src="/files/ftp_upload/2844/2844fig4.jpg" alt="איור 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4 נחישות Relaxivity:. העלילה נציג של 1 / T 1 לעומת ריכוז ה-III. השיפוע של הקו הוא מצויד relaxivity ובעל יחידות של mM -1 s -1. <img src="/files/ftp_upload/2844/2844fig5.jpg" alt="איור 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 5"> איור 5 ספקטרה המוניים:. מסה נציג ספקטרום מראה את דפוסי איזוטופ אבחון (משמאל) ה-III המכיל תסביכים (מימין) האיחוד האירופי השלישי המכילים קומפלקסים. פסגות שחור גאוס לייצג את ההפצה איזוטופ תיאורטיים הקווים האדומים הם הנתונים בפועל.

<ol><li>Barge, A., Cravotto, G., Gianolio, E., Fedeli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+determine+free+Gd+and+free+ligand+in+solution+of+Gd+chelates.+A+technical+note%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Med.+Mol.+Imaging%22%5BJournal%5D)">How to determine free Gd and free ligand in solution of Gd chelates. A technical note.</a> Contrast Med. Mol. Imaging. 1, 184-188 (2006).</li>
<li>Nagaraja, T. N., Croxen, R. L., Panda, S., Knight, R. A., Keenan, K. A., Brown, S. L., Fenstermacher, J. D., Ewing, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+arsenazo+III+in+the+preparation+and+characterization+of+an+albumin-linked%2C+gadolinium-based+macromolecular+magnetic+resonance+contrast+agent%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Application of arsenazo III in the preparation and characterization of an albumin-linked, gadolinium-based macromolecular magnetic resonance contrast agent.</a> J. Neurosci. Methods. 157, 238-245 (2006).</li>
<li>Supkowski, R. M., Horrocks, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+determination+of+the+number+of+water+molecules%2C+q%2C+coordinated+to+europium%28III%29+ions+in+solution+from+luminescence+decay+lifetimes%5BTitle%5D)+AND+%22Inorg.+Chim.+Acta%22%5BJournal%5D)">On the determination of the number of water molecules, q, coordinated to europium(III) ions in solution from luminescence decay lifetimes.</a> Inorg. Chim. Acta. 340, 44-48 (2002).</li>
<li>Menjoge, A. R., Kannan, R. M., Tomalia, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendrimer-based+drug+and+imaging+conjugates%3A+design+considerations+for+nanomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discovery+Today%22%5BJournal%5D)">Dendrimer-based drug and imaging conjugates: design considerations for nanomedical applications.</a> Drug Discovery Today. 15, 171-185 (2010).</li>
<li>Que, E. L., Chang, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responsive+magnetic+resonance+imaging+contrast+agents+as+chemical+sensors+for+metals+in+biology+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Responsive magnetic resonance imaging contrast agents as chemical sensors for metals in biology and medicine.</a> Chem. Soc. Rev. 39, 51-60 (2010).</li>
<li>Uppal, R., Caravan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+probes+for+cardiovascular+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Targeted probes for cardiovascular MR imaging.</a> Future Med. Chem. 2, 451-470 (2010).</li>
<li>Major, J. L., Meade, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresponsive%2C+cell-penetrating%2C+and+multimeric+MR+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">Bioresponsive, cell-penetrating, and multimeric MR contrast agents.</a> Acc. Chem. Res. 42, 893-903 (2009).</li>
<li>Datta, A., Raymond, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gd-hydroxypyridinone+%28HOPO%29-based+high-relaxivity+magnetic+resonance+imaging+%28MRI%29+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">Gd-hydroxypyridinone (HOPO)-based high-relaxivity magnetic resonance imaging (MRI) contrast agents.</a> Acc. Chem. Res. 42, 938-947 (2009).</li>
<li>León-Rodríguez, L. M. D., Lubag, A. J. M., Malloy, C. R., Martinez, G. V., Gillies, R. J., Sherry, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responsive+MRI+agents+for+sensing+metabolism+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">Responsive MRI agents for sensing metabolism in vivo.</a> Acc. Chem. Res. 42, 948-957 (2009).</li>
<li>Castelli, D. D., Gianolio, E., Crich, S. G., Terreno, E., Aime, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metal+containing+nanosized+systems+for+MR-molecular+imaging+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Coord.+Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Metal containing nanosized systems for MR-molecular imaging applications.</a> Coord. Chem. Rev. 252, 2424-2443 (2008).</li>
<li>Caravan, P., Ellison, J. J., McMurry, T. J., Lauffer, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gadolinium%28III%29+chelates+as+MRI+contrast+agents%3A+structure%2C+dynamics%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Gadolinium(III) chelates as MRI contrast agents: structure, dynamics, and applications.</a> Chem. Rev. 99, 2293-2352 (1999).</li>
<li>Lauffer, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paramagnetic+metal+complexes+as+water+proton+relaxation+agents+for+NMR+imaging%3A+theory+and+design%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Paramagnetic metal complexes as water proton relaxation agents for NMR imaging: theory and design.</a> Chem. Rev. 87, 901-927 (1987).</li>
<li>Yoo, B., Pagel, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+responsive+MRI+contrast+agents+for+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Biosci%22%5BJournal%5D)">An overview of responsive MRI contrast agents for molecular imaging.</a> Front. Biosci. 13, 1733-1752 (2008).</li>
<li>Pandya, S., Yu, J., Parker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+emissive+europium+and+terbium+complexes+for+molecular+imaging+and+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Dalton+Trans%22%5BJournal%5D)">Engineering emissive europium and terbium complexes for molecular imaging and sensing.</a> Dalton Trans. 23, 2757-2766 (2006).</li>
<li>Nwe, K., Xu, H., Regino, C. A. S., Bernardo, M., Ileva, L., Riffle, L., Wong, K. J., Brechbiel, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+approach+in+the+preparation+of+dendrimer-based+bifunctional+diethylenetriaminepentaacetic+acid+MR+contrast+agent+derivatives%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chem%22%5BJournal%5D)">A new approach in the preparation of dendrimer-based bifunctional diethylenetriaminepentaacetic acid MR contrast agent derivatives.</a> Bioconjugate Chem. 20, 1412-1418 (2009).</li>
<li>Nwe, K., Bernardo, M., Regino, C. A. S., Williams, M., Brechbiel, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+MRI+properties+between+derivatized+DTPA+and+DOTA+gadolinium-dendrimer+conjugates%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Comparison of MRI properties between derivatized DTPA and DOTA gadolinium-dendrimer conjugates.</a> Bioorg. Med. Chem. 18, 5925-5931 (2010).</li>
<li>Caravan, P., Das, B., Deng, Q., Dumas, S., Jacques, V., Koerner, S. K., Kolodziej, A., Looby, R. J., Sun, W. -C., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+lysine+walk+to+high+relaxivity+collagen-targeted+MRI+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Commun%22%5BJournal%5D)">A lysine walk to high relaxivity collagen-targeted MRI contrast agents.</a> Chem. Commun. , 430-432 (2009).</li>
<li>León-Rodríguez, L. M. D., Kovacs, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+synthesis+and+chelation+chemistry+of+DOTA-peptide+conjugates%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chem%22%5BJournal%5D)">The synthesis and chelation chemistry of DOTA-peptide conjugates.</a> Bioconjugate Chem. 19, 391-402 (2008).</li>
<li>Boswell, C. A., Eck, P. K., Regino, C. A. S., Bernardo, M., Wong, K. J., Milenic, D. E., Choyke, P. L., Brechbiel, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis%2C+characterization%2C+and+biological+evaluation+of+integrin+%CE%B1V%CE%B23-targeted+PAMAM+dendrimers%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharm%22%5BJournal%5D)">Synthesis, characterization, and biological evaluation of integrin αVβ3-targeted PAMAM dendrimers.</a> Mol. Pharm. 5, 527-539 (2008).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

בהתחשב במספר הולך וגדל של פרסומים הכוללים lanthanide מבוססי סוכנים בניגוד 4-14, חשוב כי הטיפול נלקח בהכנת, טיהור, ואפיון מוצרים כדי להבטיח תוצאות לשעתקו דומה. קומפלקסים אלה נחשבים לעתים קרובות מאתגרת לטהר ולאפיין יחסית מולקולות אורגניות בשל אופי פאראמגנטיים שלהם את הרגישות של כל קבוצות פונקציונליות שניתן להשתמש בו עבור bioconjugation. תיארנו שיטות מקובלות לסינתזה, טיהור, ואפיון של מתחמי lanthanide. עם זאת, כאשר בוחרים באחת השיטות הבאות חשוב לבחון את מערכת ספציפית הנלמד....

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> ריאגנטים וציוד </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th></tr><tr><td> EuCl 3 • 6 שעות 2 O </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> 203254-5G </td></tr><tr><td> p-SCN-BN-DTPA </td><td> Macrocyclics </td><td> B-305 </td></tr><tr><td> אמוניום הידרוקסיד </td><td> EMD </td><td> AX1303-3 </td></tr><tr><td> ספקטרה / por ביוטק תאית אסתר (CE) ממברנה דיאליזה - 500 D MWCO </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 68-671-24 </td></tr><tr><td> Millipore Millex IC-LG סנן יחידות </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> SLLG C13 NL </td></tr><tr><td> xylenol כתום tetrasodium מלח </td><td> אלפא Aesar </td><td> 41379 </td></tr><tr><td> חומצה אצטית </td><td> Fluka </td><td> 49199 </td></tr><tr><td> D 2 O </td><td> קיימברידג&#39; איזוטופ Laboratories, Inc </td><td> DLM-4-25 </td></tr><tr><td> מטהר מים </td><td> ELGA </td><td> Purelab Ultra </td></tr><tr><td> ביצועים גבוהים נוזלי כרומטוגרפיה ו ספקטרומטריית מסה </td><td> Shimadzu </td><td> LCMS-2010EV </td></tr><tr><td> זמן רגיעה מנתח </td><td> Bruker </td><td> mq60 minispec </td></tr><tr><td> UV-VIS ספקטרופוטומטר </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 20-624-00092 </td></tr><tr><td> להקפיא מייבש </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 10-030-133 </td></tr><tr><td> ה-pH מטר </td><td> חנה מכשירים </td><td> HI 221 </td></tr><tr><td> spectrofluorometer </td><td> HORIBA Jobin Yvon </td><td> FluoroMax-4 </td></tr><tr><td> מולקולרית משקל מחשבון גרסה 6.46 על ידי מתיו מונרו, להוריד 17 אוקטובר 2009 </td><td> <a href="http://ncrr.pnl.gov/software/">http://ncrr.pnl.gov/software/</a> </td><td> מולקולרית משקל מחשבון </td></tr></tbody></table>

, טיהור הכנה, אפיון של מכלולים lanthanide לשימוש בתור סוכנים בניגוד עבור דימות תהודה מגנטית

Preparation, Purification, and Characterization of Lanthanide Complexes for Use as Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging

Polyaminopolycarboxylate מבוססי ligands משמשות Chelate יונים lanthanide, ואת התסביכים הנובעים שימושיים כמו סוכנים בניגוד עבור דימות תהודה מגנטית (MRI). Ligands זמינים מסחרית רבים שימושיים במיוחד משום שהם מכילים קבוצות פונקציונליות המאפשרים מהיר טוהר גבוהה, גבוהה מניב הצמידה אל מקרומולקולות ביומולקולות באמצעות אמין-reactive אסטרים מופעל וקבוצות isothiocyanate או תיאול-reactive maleimides. בעוד metalation של ligands אלה נחשב וידוע בתחום הכימיה bioconjugation, הבדלים דקים נהלים metalation חייב להילקח בחשבון בעת ​​בחירת חומרי מתכת ההתחלה. יתר על כן, מספר רב של אפשרויות עבור טיהור קיים אפיון, ואת הבחירה של ההליך היעיל ביותר חלקית תלוי בבחירה של חומרי המוצא. הבדלים אלה הם עדין מוזנח לעתים קרובות בפרוטוקולים שפורסמו. הנה, המטרה שלנו היא להוכיח השיטות הנפוצות עבור metalation, טיהור, ואפיון של מתחמי lanthanide שיכולים לשמש כסוכני בניגוד עבור MRI (איור 1). אנו צופים כי פרסום זה יאפשר למדענים ביו לשלב התגובות complexation lanthanide לתוך רפרטואר התגובות שלהם בשימוש נפוץ על ידי הקלת הבחירה של חומרי המוצא ושיטות טיהור.

אנו מדגימים את metalation, טיהור, ואפיון של מתחמי lanthanide. מתחמי המתואר כאן יכול להיות מצומדת כדי מקרומולקולות כדי לאפשר מעקב של המולקולות הללו באמצעות דימות בתהודה מגנטית.

, טיהור הכנה, אפיון של מכלולים Lanthanide לשימוש בתור סוכנים בניגוד עבור דימות תהודה מגנטית

ליגנדים המבוססים על פוליאמינופוליקרבוקסילאט משמשים בדרך כלל לקילציה של יוני לנתניד, והקומפלקסים שנוצרים מהם שימושיים כחומרי ניגוד עבור...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לסנתז, לטהר ולאפיין קומפלקסים המכילים לנתניד, אשר יכולים לשמש לסימון של מקרו-מולקולות ביולוגיות. דבר זה מושג תחילה על ידי ערבוב של חומר המוצא המתכתי והליגנד תוך בקרה על ה-pH של התמיסה. השלב השני של הפרוצדורה הוא טיהור הקומפלקס שהתקבל באמצעות דיאליזה.בשלב הבא, יש לוודא את היעדרם של מתכות חופשיות. השלב האחרון של הפרוצדורה הוא אפיון התכונות של הקומפלקס הרלוונטיות לדימות. בסופו של דבר, ניתן לקבל תוצאות המראות כי הקומפלקסים המסנתזים יתנהגו כחומרי ניגוד באמצעות מדידות פעילות רלקסציה.שיטה זו יכולה לסייע במענה על שאלות מרכזיות בתחום הדימות, כגון השאלה האם מספר הקואורדינציה של המים בחומר ניגוד משתנה בעת קישור לחלבון. באופן כללי, אנשים הזקוקים לשיטה זו יתקלו בקשיים, שכן שליטה מדויקת ב-pH תגרום להפיכת ה-LI לבלתי שמיש עבור חינוך ביולוגי. הדגמת הדיאליזה ומדידות הפעילות יבוצעו על ידי Buda ו-Sashi.סטודנטים לתארים מתקדמים מהמעבדה שלי. כדי להתחיל את התהליך באמצעות מלחים של לנתנידים, ראשית המיסו שווה ערך אחד של ליגנד במים כדי להכין תמיסה בריכוז של 30 עד 265 millimolar. הליגנד Paraiso Benzyl DTPA משמש כאן בריכוז של 73 Millimolar. לאחר מכן, כוונו את ה-pH של תמיסת הליגנד לערך שבין 5.5 ל-7 על ידי הוספת ammonium hydroxide בריכוז של 1 molar.בסרטון זה, נעשה שימוש ב-0.2 milliliters של תמיסת ammonium hydroxide בריכוז one molar כדי להמיס כעת מקבילים (equivalents) אחד עד שניים של lanthanide chloride במים, במטרה להפיק תמיסה בריכוז של 5 עד 1000 millimolar. ניתן להשתמש ב-euro bium chloride או ב-gadolinium chloride בריכוזים של 111 millimolar. לעיתים קרובות נעשה שימוש בעודף של מתכת כדי להביא את תהליך ה-ventilation לסיום, ובכך לפשט את תהליך הניקוי.בשלב הבא, הוסיפו כל תמיסה של מלחים של לנתניום לתמיסת הליגנד שהוכנה תוך כדי ערבוב. כעת, כווןו את ה-pH של תערובות התגובה שהתקבלו לערך שבין 5.5 לשבעה על ידי הוספת own-ammonium hydroxide בריכוז 0.2 molar. בשלב זה, נעשה שימוש בנפח כולל של 0.5 milliliters של תמיסת ammonium hydroxide בריכוז 0.2 molar כדי לכוון את התמיסה.אם הליגנד שבשימוש מכיל קבוצות פונקציונליות הרגישות לחומצה, יש להתאים את ה-pH מספר פעמים במהלך שלב זה. יש לנהוג בזהירות בעת התאמת ה-pH, כיוון שאם התמיסה תהפוך לבסיסית מדי, קבוצות פונקציונליות הרגישות לבסיס, כגון Isothiocyanate, יהפכו לבלתי שמישות. לצורך הצמדה (conjugation), יש לעקוב מקרוב אחר התגובה באמצעות מדידות pH.התגובה הושלמה כאשר ה-pH נשאר קבוע. עבור ליגנדים ללא קבוצות פונקציונליות הרגישות לבסיס, עיבוד הכולל העלאה של ה-pH עשוי להיות מועיל גם הוא. כדי להתחיל את עיבוד הדיאליזה, קבעו אורך מתאים של צינור דיאליזה שיכיל את נפח הדגימה בתוספת אורך נוסף להכלה של 10% נוספים מנפח הדגימה. לאחר מכן, פעלו לפי הנחיות היצרן כדי לחתוך את הצינור לאורך זה.בסרטון זה נעשה שימוש בממברנה עם סף חיתוך של משקל מולקולרי של 100 עד 500 Dalton, אך ניתן להשתמש בצינורות עם סף חיתוך של משקל מולקולרי גבוה יותר לפי הצורך. אם הצמדה (conjugation) מבוצעת לפני המתיזציה (methation), ואם הדבר מתאים בהתאם להנחיות היצרן, יש להשרות את צינור הדיאליזה החתוך במים למשך 15 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, מלאו מיכל דיאליזה במים, אשר ישמשו כתמיסת הדיאליזה. במקרה זה נעשה שימוש בכוס כימית בנפח של one liter.נפח התמיסה לדיאליזה צריך להיות גדול פי 100 בערך מנפח הדגימה. כעת קפלו את אחד מקצוות הפיתול פעמיים והדקו את החלק המקופל באמצעות תפס סגירה לדיאליזה. מלפו את קצה הסגירה בגומייה כדי להבטיח שהוא יישאר סגור במהלך הדיאליזה.סננו את תערובת התגובה שהוכנה קודם לכן דרך מסנן של 0.2 מיקרון. לאחר מכן, העבירו את התסנין אל הקצה הפתוח של הפרוכת, תוך הקפדה שלא לקרוע את הפרוכת.הקפידו להשאיר מספיק מרווח פתוח כדי לסגור את הפיתול. קפלו את הקצה הפתוח שנותר של הפיתול פעמיים, לאחר מכן אבטחו אותו באמצעות סגירה ועטפו את הסגירה בגומייה. לאחר מכן, הצמידו מבחנה מזכוכית המכילה אוויר לתפסנית בקצה אחד של פיתול הדיאליזה באמצעות גומייה נוספת.לאחר מכן, חברו מבחנה המכילה חול לתפסן השני. מבחנות אלו מבטיחות שהצינורית תישאר טבולה בתמיסת הדיאליזה. כעת, הניחו את הצינורית המלאה במיכל הדיאליזה המכיל את תמיסת הדיאליזה.ערבבו את תמיסת הדיאליזה באמצעות בוחש מגנטי במהירות נמוכה בטמפרטורת החדר. ודאו כי מהירות הערבוב נשארת נמוכה וכי התמינה אינה עוברת Vortex. החליפו את תמיסת הדיאליזה שלוש פעמים במהלך היממה.בסרטון זה, התמיסה הדיאליטית מוחלפת בשעות 2.5, 6.5 ו-11.5. יש לאפשר לדיאליזה להימשך במהלך הלילה למשך זמן כולל של 20 עד 28 שעות. עם השלמת הדיאליזה, הוציאו את הצינור מהתמיסה הדיאליטית ופתחו בזהירות את אחד הסגורים כדי להוציא את הדגימה.שטפו את צינור הדיאליזה שלוש פעמים במים ואחדו את מי השטיפה עם הדגימה. לבסוף, הסירו את המים מהדגימה תחת לחץ מופחת. פעולה זו תתבצע באמצעות ייבוש בהקפאה.את הדגימה מקפיאים ולאחר מכן מניחים אותה במכשיר לייבוש בהקפאה. כדי להעריך את נוכחותו של מתכת חופשית בדגימה, הכין תחילה בופר אצטט על ידי המסת 1.4 milliliters של חומצה אצטית ב-400 milliliters של מים, כוונן את ה-pH ל-5.8 באמצעות ammonium hydroxide בריכוז one molar, והוסף מים עד להגעה לנפח כולל של 500 milliliters. לאחר מכן, המס 0.3 milligrams של כל קומפלקס ב-0.3 milliliters של בופר.כעת הכינו אינדיקטור xol orange, שריכוזו צריך להיות 16 micromolar בבופר pH 5.8. הוסיפו שלושה מיליליטרים של תמיסת אינדיקטור זו לקומפלקסים המתכתיים שהומסו קודם לכן. גלו את נוכחותם של מתכות חופשיות על ידי צפייה בשינוי צבע של האינדיקטור מצהוב לסגול.במידת הצורך, ניתן לכמת את כמות המתכת החופשית על ידי יצירת עקומת כיול. אם נותרה מתכת חופשית, יש לטהר את הדגימה באופן נוסף באמצעות דיאליזה או כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים (HPLC) לפני האפיון. לאחר מכן, כדי לקבוע את מספר קואורדינציית המים עבור דגימת opium, הכין תמיסה של כ-1 millimolar של הקומפלקס המכיל opium במים, ולאחר מכן תמיסה נוספת באותו ריכוז ב-deuterium oxide.לפני הניתוח, יש לאדות את תמיסת הדאוטריום אוקסיד ולהמיס אותה שוב בדאוטריום אוקסיד שלוש פעמים כדי להסיר שאריות מים; הפעל את הספקטרו-פלואורימטר, הוסף את תמיסת המים לכובית נקייה והנח את הכובית בתוך הספקטרו-פלואורימטר. כעת בצע עירור ופליטה כדי לקבוע את המקסימום עבור כל אחד מהם, בערכים של כ-395 nanometers ו-595 nanometers בהתאמה. לאחר מכן, בצע ניסוי של דעיכת זמן פוספורסנציה באמצעות אורכי הגל של העירור והפליטה שנקבעו כעת והפרמטרים המוצגים כאן.חזרו על שלב זה עם תמיסת דאוטריום אוקסיד שהוכנה; מהנתוני דעיכת הפלורסצנציה שהתקבלו זה עתה, שרטטו את הלוגריתם הטבעי של העוצמה מול הזמן. השיפוע של קווים אלה מייצג את קצבי הדעיכה. בסרטון זה, נעשה שימוש ב-Microsoft Excel 2007 כדי להפיק את גרפי הלוגריתם הטבעי מהנתונים הגולמיים.השתמשו בקצבי הדעי במשוואה שפותחה על ידי hors ועמיתיו, המופיעה כאן. אם הליגנד שלכם מכיל קבוצות OH או NH המתואמות למתכת, יש לשנות את המשוואה לפני השימוש. כדי לקבוע את מדידות היחסיות של הדגימה, בחרו תחילה את מצב היישום הרצוי באנלייזר זמן הרפיה (relaxation time analyzer), T1 או T2.כאן, נבחרה הגדרת T one. לאחר מכן, הכין סדרה של דגימות המכילות ריכוזים שונים של הקומפלקס המכיל לנתניד בממס מימי. כאן, נעשה שימוש במים כממס ובתמיסות של 10, 5, 2, 0.5, 1.25, 0.625 ואפס.מכינים תמיסות בריכוז מילימולרי. ניתן להשתמש בממסים או בתחתימי pH (בופרים) מתאימים אחרים, אך חשוב להשתמש בממס כדגימת רקע (blank). הנפח הסופי של הדגימה תלוי במכשיר שבו נעשה שימוש.הניחו דגימה במכשיר והמתינו חמש דקות להגעה לשיווי משקל עם טמפרטורת המכשיר, שהיא 37 °C עבור היחידה המשמשת בסרטון זה. כעת קבעו את זמן הרלקסציה ביחידות של שניות על ידי התאמת פרמטרי התוכנה כדי לקבל עקומה מעריכית חלקה עבור T one או T two. חזרו על פעולה זו עבור כל הדגימות, כולל דגימת הביקורת (blank).כעת, חשבו את ההופכי של ערכי ההרפיה T one או T two שנמדדו ושרטטו אותם. שרטטו ערכים אלו אל מול ריכוז ה-Lathan ביחידות של millimolar והתאימו את הגרף לקו ישר. השיפוע של הקו המותאם הוא פעילות ההרפיה, R one או R two עבור T one ו-T two בהתאמה.כאן אנו רואים את התרשים הכללי למתילציה וטיהור. תרשים זה מתאר את הפרוצדורה הכללית למתילציה ואת הסיבות לבחירה במסלולי טיהור שונים. כאן אנו רואים גרף מייצג של דעיכת לומניסנציה, שבו הלוגריתם הטבעי של הדעיכה מופלט מול הזמן; שיפועי הקווים שנוצרו מעקומות דומות עבור תמיסות מים ודאוטריום אוקסיד משמשים יחד עם משוואה אחת כדי לקבוע את מספר הקואורדינציה של מים בקומפלקסים המכילים אופיום.ניתן לראות כאן דוגמה מייצגת של מדידות ליוויטי (livity), כאשר השיפוע של הקו המותאם מייצג את ה-T one livity של הדגימה. בנוסף למספר הקואורדינציה של המים ולאפיון הליוויטי המתוארים בפרוטוקול, חשוב לאפיין גם את המוצרים הסופיים באמצעות טכניקות כימיות סטנדרטיות. ניתן לקבוע את זהות התרכובת באמצעות ספקטרומטריית מסות; כאן מוצגים ספקטראלי מסות מייצגים המראים את דפוסי האיזוטופים האבחנתיים עבור קומפלקסים המכילים גדולניום ואופיום.בעקבות פרוצדורה זו, ניתן לבצע שיטות אחרות כגון ספקטרוסקופיית endr, HPLC ואנליזה אלמנטרית כדי לאפיין יותר את התסמיכים שהתקבלו. לאחר צפייה בסרטון זה, עליכם להחזיק בהבנה טובה של האופן שבו מסנתזים, מטהרים ומאפיינים תסמיכים המכילים לנתנידים, אשר ניתן להשתמש בהם לסימון של מקרו-מולקולות ביולוגיות.

preparation-purification-characterization-lanthanide-complexes-for

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

בסרטון הזה, אנו מראים כיצד תווית בתאי גזע עובריים אנושיים (hESC) מנגן עם כלוריד...

ב סימון במבחנה של בתאי גזע עובריים אנושיים עבור דימות תהודה מגנטית

כדי להדגים הדמיה מולקולרית סרטן MR עם פפטיד קטן ממוקד חומר ניגוד MRI ספציפי לחלבוני פלזמה קרוש בstroma גידול במודל עכבר של סרטן ערמונית.

MR הדמיה המולקולרית של סרטן הערמונית עם חומר ניגוד ממוקד המולקולרי קטן CLT1 פפטיד

פרוטוקול זה מתאר את הסינתזה של ננו-חלקיקים כחולים פרוסיים ביו-פונקציונליים ואת השימוש בהם כסוכני הדמיה מולקולרית רב-מודאליים. לננו-חלקיקים יש עיצוב מעטפת ליבה שבו יוני גדוליניום או מנגן בתוך ליבת הננו-חלקיקים יוצרים ניגודיות MRI. המעטפת הביו-פונקציונלית מכילה פלואורופורים להדמיה פלואורסצנטית וליגנדים ממוקדים למיקוד מולקולרי.

Biofunctionalized הכחול פרוסים חלקיקים ליישומי הדמיה מולקולריים Multimodal

פרוטוקול זה מתאר את ההכנה ואפיון של תהודה מגנטית dendrimeric חומר ניגוד (MRI) שנושא chelates macrocyclic המבוסס cyclen תיאום יוני גדוליניום פאראמגנטיים. בסדרת ניסויי MRI במבחנה, סוכן זה מיוצר אות MRI מוגברת בהשוואה האנלוגית monomeric הזמין המסחרי.

הכנה<em&gt; במבחנה</em&gt; אפיון חומרי ניגוד מבוססי dendrimer עבור דימות תהודה מגנטית

כאן, אנו מתארים פרוטוקול לתיוג רדיו ובדיקות in vivo של נגזרות כלאט-טטרזין תלת-שיניים 99mTc(I) לכימיה מוקדמת וביו-אורתוגונלית.

הכנה והערכה של<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc שכותרתו Tridentate chelates לחינוך קדם-מיקוד שימוש Bioorthogonal לכימיה

מתואר השימוש במולקולות פולידאוקסינוקלאוטיד (44-mer aptamer) לחישת יון גדוליניום (III) בתמיסה מימית. נוכחות היון מתגלה באמצעות עלייה בפליטת הקרינה של החיישן.

חיישן מבוסס-Aptamer עבור Unchelated גדוליניום (III)

פרוטוקול מוצג הסינתזה של ליבה-קליפה מסטול לנתניד upconversion nanocrystals (UCNs) והיישומים הסלולר שלהם עבור ערוץ חלבון רגולציה על תאורה אור אינפרא אדום (ניר).

סינתזה של ליבה-קליפה מסטול לנתניד Upconversion Nanocrystals עבור אפליקציות לסלולר

נהלי ייצור יון לנתניד קשוב מאוד דיסקות chelating הרכבות polymolecular מוצגים. התגובה מגנטי מוכתב על ידי גודל ההרכבה, אשר מותאם על ידי ההבלטה דרך ממברנות nanopore. של ההרכבות alignability מגנטיות, טמפרטורה-induced שינויים מבניים המפוקחים על-ידי שבירה כפולה מדידות, טכניקה ללא תשלום תהודה מגנטית גרעינית, פיזור ניוטרון זווית קטנה.

תהליכי ייצור ומדידות שבירה כפולה עבור תכנון יון לנתניד דיסקות מגיב Chelating פוספוליפיד להרכבות

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול כדי להשיג68Ga מסטול-הליבה תחמוצת ברזל חלקיקים באמצעות מונחי מיקרוגל מהר סינתזה. המתודולוגיה רינדור PET/חלקיקים MRI (T1) עם radiolabeling יעילות גבוהה יותר 90% וטוהר רדיוכימי 99% ב- 20-מין סינתזה.

סינתזה של 68המשחק מסטול-הליבה תחמוצת ברזל חלקיקים עבור כפול טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים/דימות תהודה מגנטית (T1)

להערכת טיפולים בתאי גזע חדש חשוב הלא פולשני המסלול התאים מוזרקים in vivo. סרט הווידאו הזה יראה לכם כיצד לתייג אדם בתאי גזע mesenchymal ו עובריים עם סוכני תחמוצת ברזל מבוסס בניגוד in vivo עבור הבאים MR הדמיה in vivo.

תיוג hESCs ו hMSCs עם ברזל אוקסיד חלקיקים עבור פולשני של מעקב vivo עם MR Imaging

למדו סינתזה, טיהור ואפיון של מכלולי לנתנידים לתיוג מולקולות ביולוגיות בדימות תהודה מגנטית. השיטה משלבת שליטה ב-pH, דיאליזה ומדידות פעילות הרפיה לאימות סוכני ניגוד.

, טיהור הכנה, אפיון של מכלולים Lanthanide לשימוש בתור סוכנים בניגוד עבור דימות תהודה מגנטית

גלה סרטונים נוספים