Name: Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 1 s
Description: למד את מודל MCAO לחקר שבץ איסכמי בעכברים באמצעות חסימת עורק מוחי תיכון עם פלומטריית דופלר לייזר. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של זרימת הדם ויוצרת איסכמיה ניסויית בצורה נשלטת ושחזורית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

פרוטוקול זה אושר על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש הוועדה (IACUC) באוניברסיטת פלורידה עולה בקנה אחד עם "עיקרון של טיפול בבעלי חיים במעבדה" (NIH פרסום מס '86-23, מתוקנת 1985). 1. חומרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים: זכר C57BL / 6 עכברים (הרלן מעבדות, אינדיאנפוליס, אינדיאנה, ארה"ב) במשקל 20-26 גרם בזמן הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכונת הרדמה: הרדמה VetEquip משאיפת המערכת (VetEquip Inc, Pleasanton, קליפורניה, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שאיפת חומר הרדמה: Isoflurane (רוקחות בקסטר, Deerfield, IL). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלים כירורגיים: SuperCut מספריים איריס, ישר (מכשירים העולם Precision, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב); Vannas מיקרו מספריים, ישר (מכשירי דיוק העולם, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב); דומון מלקחיים (טיפ בסדר, 45 ° עצות כפופות, Precision אינסטרומנטס העולמית, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב); יחידת קרישה דו קוטבית (ייבוש תדירות גבוהה 900, מכשירים העולם Precision, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב); קליפ כלי מיקרו (Precision Instruments העולם, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כירורגי אספקה: כותנה טיפים סטרילי, מגבונים, ספוגים גזה, תפר (7-0 תפר משי, Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג'רזי, ארה"ב); דבק רקמות (Vetbond, חברת 3M, סנט פול, מינסוטה, ארה"ב); לשפשף כירורגי : Bethadine, אתנול 70%, ו -0.9% סטרילי מלוחים, עין משחה (משחה Puralube וטרינר, Pharmaderm, מלוויל, ניו יורק, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר ספיגה לקראת MCAO: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נימה של MCA חסימה: 7-0 ניילון כירורגית monofilament תפר (Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג'רזי, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחממים המקור הקהיה תפר קצה (יחידת מצרב תרמי, Precision העולם מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גומי סיליקון נוזלי (סיליקון RTV דבק, העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח / הביתור מיקרוסקופ (מיקרוסקופ הלייקה סטריאו MZ6). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המאייר סיב אופטי (המאייר סיבים אופטיים FO1-150, TechniQuip קורפ, ליברמור, קליפורניה, ארה"ב). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לייזר דופלר flowmetry (PeriFlux System 5000, Perimed, שטוקהולם, שוודיה). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גמיש microtip (Microtip MT B500-0 סטרייט, Perimed, שטוקהולם, שוודיה) </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טמפרטורה פרמטרים: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג הטמפרטורה רקטלי (BAT-12, מכשירים העולם Precision, Inc, סרסוטה, פלורידה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמיכה תרמית (T / משאבה, TP600, Gaymar, ניו יורק, ארה"ב). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכתים ומדידה כמותית של האוטם נפח: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium פתרון כלוריד (2% TTC, סיגמא אולדריץ ושות', סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים המוח מטריצה ​​מבצעה (Zivic-Lab מילר. בע"מ, אליסון פארק, פנסילבניה, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצלמה דיגיטלית (V1253, Kodak Co, רוצ'סטר, ניו יורק, ארה"ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמונה J תוכנה (ImageJ 1.42q תוכנה, ארה"ב National Institutes of Health, Bethesda, מסצ'וסטס, ארה"ב). </li></ol></li></ol> 2. טרום ניתוחית צעדים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הניתוח, העכברים הם שוכנו תחת מחזור אור / חושך 12:12 עם גישה חופשית למים מכרסם צ'או. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Sutures עבור MCAO מוכנים ידי הקהיה 1-2mm של קצה תפר עם ציפוי חום 3-4 מ"מ של הפיר תפר מקצה שלה עם גומי סיליקון נוזלי, המאפשר לו להתייבש (7-0; קוטר קצה, 0.20-0.25mm, ציפוי אורך, 3-4 מ"מ, אורך תפר 11-13mm). עקרות צריך להישמר כל הצעדים הנ"ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שקילת העכבר, הרדמה מושרה עם 4% isoflurane בתא אינדוקציה ומתוחזק במהלך ההליך עם 1.5-2% isoflurane ב 30% O 2 ו - 70% N 2 O תערובת הדלק באמצעות facemask. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכבר ממוקם אפרקדן על כרית גזה שוכב על משטח בקרת טמפרטורה הפעלה (שמיכה תרמית); את הפרווה ראש מגולח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עיניים משחה חומר סיכה מוחל על שתי העיניים, ואת העפעפיים סגורים כדי למנוע יובש בעיניים במהלך תהליך כירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך קו האמצע (1 ס"מ) מורכב על העור שמעל calvarium מקו עורפית מעולה nasion ואת העור נמשך רוחבית כדי להצמיד microtip גמישה (MT B500-0 Microtip סטרייט, קוטר 0.5mm). Microtip ממוקם בניצב לפני השטח של הגולגולת הקודקודית הימנית (1 מ"מ אחורי ו 5 מ"מ לרוחב על גבחת) כדי לפקח על זרימת הדם בשטח MCA ידי flowmetry דופלר לייזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא microtip גמישה מחובר הגולגולת היטב לפני החיה היא פנתה בתנוחה אופקית. הצוואר של החיה מושם על משטח רך והאף שלה מוחזק חרטומו של מנגנון ההרדמה. זה יגרום שיש מספיק מקום microtip גמישים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדיקה רקטלית טמפרטורה מוכנס לשמור על בעלי חיים קבוע הליבה טמפרטורה של 37 ± 0.5 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקדמיות והן hindpaws מוקלטות אל פני השטח את פלטפורמת ההפעלה, הזנב הוא מודבק צינור רקטלי. </li> &lt;/ Ol&gt; 3. MCA ניתוח חסימה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ ההפעלה, חתך בצוואר קו האמצע הוא עשה עם מספריים בין manubrium ואת הלסת בעדינות על ידי הסרת עור רפוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלוטות לזווג submandibular הבסיסית מחולקים בצורה בוטה, עם בלוטת שמאל שמאל באתרם. בלוטת submandibular הנכון הוא חזר בו cranially ומאובטחת יחד עם השריר sternocleidomastoid. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החטיבה חשוף של שריר omohyoid כיסוי הראש נדן מחולק בקפידה עם טנדרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורק התרדמה המשותף הזכות (CCA) מופרד בזהירות מבודד העצב התועה ואת הנדן (הממוקם לרוחב CCA). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכאן ואילך, את 2 שיטות כירורגיות אשר שימשו לעתים קרובות לבצע חסימה MCA לסטות: </li></ol> קואיזומי של 4 שיטה <ol class="lroman" type="i" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שלושה תפרים צווארון רופף (7-0 משי) ערוכים סביב המרכז לאמנות עכשווית הנכון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורק התרדמה החיצוני (ECA) מזוהה, מבודדים, צרוב (2-3mm דיסטלי אל הסתעפות). לאחר מכן הוא יכול להיות מחולק עם מיקרו מספריים. כדי למנוע נזקים היקפיים בשוגג באתר צריבה, הכוח צריך להיות מוגדר ב 1 באמצעות ידית כוח. זה עולה בקנה אחד עבור כל cauterizations. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתח מספיק מוחל על תפר הצווארון הפרוקסימלי ביותר על המרכז לאמנות עכשווית כדי לחסום את זרימת הדם (קשירת קבע). חסימת זרימת מאומת על ידי ~ ירידה של 50% ערכי בסיס קורטיקלי זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אז קליפ כלי ממוקמת ממש לפני הסתעפות המרכז לאמנות עכשווית, כדי למנוע זרימת מדרדר בזמן arteriotomy. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Arteriotomy מתבצע בין תפר ligated הפרוקסימלית ו את הקליפ כלי שיט על המרכז לאמנות עכשווית עם מיקרו מספריים (קרוב קשירת). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חום קהה סיליקון מצופה תפר 7-0 ניילון הוא הציג דרך arteriotomy והתקדם עד שהוא מגיע קליפ כלי. 2 התפרים שנותרו צווארון רופף הם להדק בעדינות בין arteriotomy ואת הקליפ כלי כדי למנוע דליפה חזרה לזרום דרך המרכז לאמנות עכשווית, בזהירות לא טראומה הקיר עורקים סביב המרכז לאמנות עכשווית, ולאחר מכן את הקליפ כלי יבוטל. </li></ol> Longa של 3 השיטה <ol class="lalpha" type="a" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ECA מזוהה, גזור ככל האפשר (ליד הסתעפות שלה לתוך העורקים לשונית לסתי), צרוב (עם כוח מוגדר 1), מחולק עם מיקרו מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני תפרים צווארון רופף (7-0 משי) ערוכים סביב ICA הפרוקסימלי מעל הסתעפות המרכז לאמנות עכשווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המרכז לאמנות עכשווית סגור זמנית עם קליפ ספינה. חסימת זרימת מאומת על ידי ~ ירידה של 50% ערכי בסיס קורטיקלי זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ואז ICA נסגר זמנית עם קליפ כלי מעל שני תפרים צווארון רופף, כדי למנוע זרימת מדרדר בזמן arteriotomy. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Arteriotomy מתבצע באמצעות מיקרו מספריים לסגור את ECA שיקף את הגדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חום קהה סיליקון מצופה תפר 7-0 ניילון הוא הציג דרך arteriotomy ב ECA ומתקדם עד שזה מגיע קליפ כלי מיושם ICA. 2 התפרים צווארון רופף ICA הפרוקסימלי יש להדק בעדינות סביב ICA הפרוקסימלי, כדי למנוע זרימת הדם ריפלוקס באמצעות הרשפ"ת, עם תשומת לב מספיק כדי לא טראומה בקיר העורק, ולאחר מכן את הקליפ כלי יבוטל. </li></ol> שאר ההליך הוא מתכנס במידה רבה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר occluding היא מתקדמת לאט דרך העורק הראשי פנימי (רשפ"ת) לעבר בסיס הגולגולת עד התנגדות קלה מורגשת. ירידה זמנית בשווי זרימת הדם במוח כאחוז (= 80%) ביחס הבסיסית היא מאושרת על ידי flowmetry דופלר לייזר. 2 התפרים לצווארון הם התהדקו סביב החוט מוכנס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור חולף ניסויים איסכמיה מוחית, תפר occluding יבוטל בעדינות לאחר 45 דקות. נקודה זו הפעם ניתן לשנות למטרות ניסויים שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הוצאת תפר נימה, האתר arteriotomy סגור כדי למנוע דימום לאחר ניתוח. בשיטה של ​​קואיזומי, זה כרוך היטב הידוק התפרים קולר סביב המרכז לאמנות עכשווית. בטכניקה של Longa, אתר arteriotomy בבסיס ECA הוא צרוב, אז התפרים הצווארון ב ICA הפרוקסימלי הם משוחררים הסיר כדי לשחזר את זרימת הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לסגור את החתך, בלוטת submandibular ו SCM מוטלות על שדה הניתוח. קצוות הפצע הם מקורב אז עם דבק רקמות צוואר הרחם באזורים הקרקפת. לחלופין, מצרך נספגים תפר או מתכת יכול לשמש כדי לסגור את הפצע במיוחד כאשר ההישרדות לטווח ארוך של החיה מיועד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר סגירת החתך, החיה מקבלת 1 גרם מלח חמים תת עורי כמו חידוש נפח. מינון של משככי כאבים מתאימים (כלומר עצירות ב 0.05-0.1 מ"ג / ק"ג) יש להשתמש כדי למזער את הכאב של החיה ואי נוחות במהלך תקופת ההחלמה. אנימהאני מוסרת את חבילת כירורגית להציב בכלוב התאוששות חם באזור / למנוע היפותרמיה, עם גישה חופשית וקלה מזון, מים רכים. </li></ol> 4. מנותחות הערכה נוירולוגית אחרי החיה חוזר להכרה מוחלטת, גירעונות נוירולוגיות ניתן להעריך על ידי בקנה מידה פשוטות (חמש נקודות בקנה מידה) כדלקמן 3: <ol start="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אין גירעונות הנצפה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כישלון להאריך בכפו הנגדי (נוירולוגית קלה הגירעון מוקד) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חג בכיוון הנגדי כדי האוטם (גירעון מתון מוקד נוירולוגית) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נפילה בכיוון הנגדי כדי האוטם (גירעון חמור מוקד נוירולוגית) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רמת מדוכא התודעה ללא תנועה ספונטנית </li></ol> 5. מכתים ומדידה כמותית של נפח האוטם במוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 24 שעות של reperfusion MCA, עכבר ששרד נשקל, בהרדמה עמוקה עם isoflorane 4%, והקריב על פי פרוטוקול שאושר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המוח הוא הסיר בזהירות להציב מבצעה במוח העכבר מטריקס, ואת המוח כולו מחולק coronally ב 2 מ"מ במרווחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קטעים שקועים 2% ב TTC שנאגרו מלוחים פוספט (PBS) בשעה 37 ° C במשך 20 דקות. לאחר מכתים TTC, אזור infracted מוצג רקמה לבן (בלא כתם) סמוך לבנה רקמה אדומה (בת קיימא) (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קטעים מצולמים סידורי באמצעות מצלמה דיגיטלית את אזור האוטם נמדדת עם התוכנית J התמונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האזור של האוטם (לבן, בלא כתם), שטח של חצי הכדור ipsilateral (לבן ואדום לבנה, מוכתמת), ואת השטח של האונה הנגדי (מוכתם אדום, לבנה) נמדדים עבור כל מקטע. נפח מחושב על ידי סיכום שטחי נציג בכל הסעיפים ומתרבים על ידי עובי הפרוסה. לאחר תיקון עבור בצקת, בנפח של אוטם מחושב כדלקמן 9: נפח האוטם מתוקן (CIV),% = [נפח האונה הנגדי - (נפח האונה ipsilateral - נפח האוטם)] נפח האונה / הנגדי x 100 </li></ol> 6. נציג תוצאות אחרי חסימה ו reperfusion של MCA השמאלי דרך המרכז לאמנות עכשווית להקים איסכמיה מוחית חולפת, בעלי חיים מוקרבים והמוח מחולק coronally שלהם הם מוכתמים TTC להעריך את עוצמת הקול של האוטם (איור 1). <img src="files/ftp_upload/2879/2879fig1.jpg" alt="איור 1"> באיור 1. TTC מוכתם סעיפים סדרתי המוח העטרה (2 מ"מ) מעכברים נתון MCA חסימה. </ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+on+stroke+prevention%2C+diagnosis%2C+and+therapy.+Report+of+the+WHO+Task+Force+on+Stroke+and+other+Cerebrovascular+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).</li>
<li>Lloyd-Jones, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2009+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2009 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 119, e21-e181 (2009).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I.+A+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurol Res. 19, 641-648 (1997).</li>
<li>Fujii, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-related+differences+in+susceptibility+to+transient+forebrain+ischemia+in+SV-129+and+C57black%2F6+mice.+%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Strain-related differences in susceptibility to transient forebrain ischemia in SV-129 and C57black/6 mice. </a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 28, 1805-1810 (1997).</li>
<li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+2%2C3%2C5-triphenyltetrazolium+chloride+as+a+stain+for+detection+and+quantification+of+experimental+cerebral+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 17, 1304-1308 (1986).</li>
<li>Qi, X., Hosoi, T., Okuma, Y., Kaneko, M., Nomura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+4-phenylbutyrate+protects+against+cerebral+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Sodium 4-phenylbutyrate protects against cerebral ischemic injury.</a> Mol Pharmacol. 66, 899-908 (2004).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).</li>
<li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ideal+suture+diameter+is+critical+for+consistent+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Ideal suture diameter is critical for consistent middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Neurosurgery. 56, 196-200 (2005).</li>
<li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+journal+of+cerebral+circulation%22%5BJournal%5D)">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 35, 1720-1725 (2004).</li>
<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism?</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי אין להם ניגוד אינטרסים.

המודל הוא מודל MCAO נקבע כי משכפל איסכמיה מוחית במינים Murine. מודל זה שימש לראשונה אצל חולדות ומותאמת לאחר מכן לעכברים. הימנעות craniectomy לחסל את השפעתה של מניפולציה כירורגית על חדירות מחסום דם מוח ו לחץ תוך גולגולתי יתרון של הטכניקה הזו. עם זאת, משתנים רבים, כגון זן הקשורות להבדלים 10, בגודל של תפר קצה 11, משך 6 חסימה, טמפרטורת הגוף 12, 13 הרדמה, וגורמים אחרים יכולים להוביל לחוסר התאמה בכמויות האוטם במודל זה. יש פרטים טכניים ס...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> סוג </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> הערות (אופציונלי) </th></tr><tr><td> זכר C57BL / 6 עכברים </td><td> בעל חיים </td><td> הרלן מעבדות, אינדיאנפוליס, אינדיאנה, ארה&quot;ב </td><td></td><td> 20-26 GRS </td></tr><tr><td> Dissection מיקרוסקופ </td><td> מיקרוסקופ </td><td> לייקה סטריאו מיקרוסקופ MZ6 </td><td></td><td> זום 6.3:1 </td></tr><tr><td> המאייר סיב אופטי </td><td> הפנס </td><td> TechniQuip קורפ, ליברמור, קליפורניה, ארה&quot;ב </td><td></td><td> FO1-150 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> הרדמה </td><td> בקסטר רוקחות, Deerfield, IL </td><td> 1001936060 </td><td></td></tr><tr><td> מספריים SuperCut איריס, ישר </td><td> כירורגי כלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 14218 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas מיקרו מספריים, ישר </td><td> כירורגי כלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 14003 </td><td></td></tr><tr><td> דומון מלקחיים קצה קנס </td><td> כירורגי כלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 503290 </td><td></td></tr><tr><td> כלי קליפ </td><td> כירורגי כלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 14120 </td><td></td></tr><tr><td> תדירות גבוהה ייבוש 900 </td><td> כירורגי כלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 500397 </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 ניילון כירורגית monofilament תפר </td><td> תפר </td><td> Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג&#39;רזי, ארה&quot;ב </td><td> 1647G </td><td> תפר עבור חסימה </td></tr><tr><td> 7-0 משי תפר כירורגי </td><td> תפר </td><td> Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג&#39;רזי, ארה&quot;ב </td><td> 7733G </td><td> תפר עבור קשירת </td></tr><tr><td> סיליקון RTV דבק </td><td> סיליקון גומי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 1571 </td><td></td></tr><tr><td> Vetbond </td><td> דבק רקמות </td><td> חברת 3M, סנט פול, מינסוטה, ארה&quot;ב </td><td> 70200746587 </td><td></td></tr><tr><td> Puralube משחה Vet </td><td> עין משחה </td><td> Pharmaderm, מלוויל, ניו יורק, ארה&quot;ב </td><td></td><td></td></tr><tr><td> עצירות hydrochlorode </td><td> משככי כאבים </td><td> Hospira Inc, בלייק פורסט, אילינוי, ארה&quot;ב </td><td> NDC 0409-2012-32 </td><td></td></tr><tr><td> מצרב Thermal Unit </td><td></td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> 501292 </td><td></td></tr><tr><td> PeriFlux System 5000 </td><td> TCD flowmetry </td><td> Perimed, שטוקהולם, Sweeden </td><td></td><td></td></tr><tr><td> BAT-12 </td><td> מדחום רקטלי </td><td> העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה&quot;ב </td><td> BAT-12R </td><td></td></tr><tr><td> T / משאבה, TP600 </td><td> שמיכה תרמית </td><td> Gaymar, ניו יורק, ארה&quot;ב </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד </td><td> מגיב </td><td> סיגמא אולדריץ ושות&#39;, בסנט לואיס, מיזורי, ארה&quot;ב </td><td> T8877 </td><td></td></tr><tr><td> עכברים המוח מטריצה ​​מבצעה </td><td> המוח מבצעה </td><td> מילר Zivic-Lab. בע&quot;מ, אליסון פארק, פנסילבניה, ארה&quot;ב </td><td> BSMAS001-1 </td><td></td></tr></tbody></table>

intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (mcao) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר flowmetry לייזר עכברים

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

שבץ הוא הגורם השלישי למוות ואת הסיבה המובילה למוגבלות בעולם, עם עלות משוערת של קרוב 70000000000 $ בארצות הברית בשנת 2009 1,2. עורק intraluminal באמצע מוחין חסימה (MCAO) מודל שפותח על ידי קואיזומי 4 בשנת 1986 כדי לדמות זו הפתולוגיה האנושית השפעה בחולדה. שינוי שיטת MCAO הוצג מאוחר יותר על ידי Longa 3. טכניקות שניהם היו בשימוש נרחב לזיהוי המנגנונים המולקולריים של פגיעה מוחית כתוצאה שבץ איסכמי ו שיטות טיפוליות פוטנציאליים 5. שיטה זו לא פולשנית יחסית בחולדות הוארך להשתמש בעכברים לנצל מהונדס ועל זני בנוקאאוט 6,7. כדי איסכמיה מודל מוקד מוחין, תפר intraluminal מתקדמת דרך עורק התרדמה הפנימי כדי לחסום את הבסיס של MCA. תפר קירוב לאחר תקופת זמן מוגדרת מחקה reperfusion ספונטני, אבל תפר ניתן גם לשמור לצמיתות. סרט הווידאו הזה יהיה הוכחת שתי הגישות העיקריות לביצוע הליך intraluminal MCAO בעכברים באופן הדרגתי, כמו גם לספק תובנות על החסרונות ואת החסרונות פוטנציאליים. רקמת מוח איסכמי יהיה בהמשך להיות מוכתם על ידי כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium (TTC) כדי להעריך את מידת אוטם מוחי 8.

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

שבץ מוחי הוא גורם המוות השלישי בשכיחותו וגורם הנכות המוביל בעולם, עם עלות מוערכת של קרוב ל-70 מיליארד דולר בארצות הברית...

במאמר וידאו זה, אנו מציגים מודל של שבץ איסכמי המכונה חסימת העורק המוחי האמצעי או MCAO. בשיטה המקורית של חסימת ה-MCA באמצעות חוט תפירה, חוט תפירה קהה מועבר דרך העורק הקרוטיד המשותף כדי לחסום את העורק המוחי האמצעי. שיטה זו מובילה לחסימה קבועה של העורק הקרוטיד המשותף.שינוי מתודולוגי על ידי Longa מאפשר גישה לעורק המוח האמצעי דרך העורק הקרוטידי החיצוני. שיטה זו משמרת את התפקוד של העורק הקרוטידי המשותף ואת זרימת הדם הדיסטלית שלו במודלים ניסיוניים של שבץ איסכמי. מודל חסימת העורק המוח האמצעי באמצעות פילמנט תוך-לומנלי בחולדות ועכברים הוא אחד המודלים הנפוצים ביותר מאז תיאורו הראשון בחולדות; מאז פורסמו מספר שינויים למודל הראשוני, וכיום השינוי של Longa הוא הווריאציה הבולטת ביותר.מודל זה פחות פולשני ומאפשר ביצוע של איסכמיה קבועה או חולפת באופן מבוקר. מודל של חסימת העורק המוחי האמצעי באמצעות פילמנט תוך-לומנלי כולל השחלה של מונופילמנט לתוך העורק הקרוטידי הפנימי והעברתו עד לחסימת זרימת הדם לעורק המוחי האמצעי. מודל זה מספק אוטמים (infarctions) הניתנים לשחזור באזור העורק המוחי האמצעי, ומאפשר רפרפוזיה לאחר נסיגת התפר.נראה כי גודל האוטם (infarct) מושפע מגורמים ספציפיים רבים בטכניקה זו, כגון קוטר התפר, ציפוי התפר בסיליקון או ב-polyol lysine, או אורך ההחדרה של הפילמנט עצמו. בסרטון זה, נראה כיצד לבצע מודל זה באופן מדורג, וכן כיצד להימנע מרבות מהמלכודות והחסרונות הפוטנציאליים הקשורים בשימוש בשיטה זו. לתסמימה של ה-MCA ייעשה שימוש בתפר ניילון מונופילמנט במידה 7.0.יש להקהות את קצה תפר הניילון על ידי קרבה למקור חום. הקצה המוקהה צריך להיות ישר וחלק, ובאורך של כ-1 עד 2 מילימטרים. לאחר הקהיית הקצה, יש לחתוך את התפר לאורך כולל של כ-11 עד 13 מילימטרים.טבל את הקצה קהה של התפר בסיליקון עד ששלושה עד ארבעה מילימטרים של הקצה מצופים, והשאר אותו להתייבש. יש לבצע את כל שלבי הכנת התפר בתנאים סטריליים. לאחר שקילת העכבר, השראת ההרדמה תתבצע באמצעות 4% isof fluorine בתא השראה.העכבר מונח בתנוחה הפרונה (על הבטן) על רפידת גזה המונחת על שמיכה תרמית. כדי לשמור על טמפרטורת גוף ליבבית של 37 מעלות, ההרדמה נשמרת במהלך הפרוצדורה באמצעות מסכת אף.מתבצעת חתך של סנטימטר אחד בעור כדי לחשוף את כיפת הגולגולת (calvarium), מילימטר אחד אחורי וחמישה מילימטרים לטרלית ל-bgma. קצה מיקרו גמיש מוצמד בניצב לפני השטח של העצם הפריאטלית הימנית כדי לנטר את זרימת הדם בתחום ה-MCA באמצעות דימות זרימה בלייזר דופלר.לאחר החזרת בעל החיים למצב שכיבה על הגב (supine), מבוצעת חתך בקו האמצע של הצוואר באמצעות מספריים, בין העצם החזהית (manubrium) ללסת. בלוטות תת-הלסתה הזוגיות מופרדות באופן קהה כדי לחשוף את המבנים שמתחתיהן: השריר הדיגסטרי (digastric muscle), השריר הסטרנו-קליידו-מסטואידי (sterno-cleido-mastoid muscle) והטרכאה. הרחקה של מבנים אלו ודיסקציה נוספת חושפות את העורק התהומי המשותף (common carotid artery), את עצב הוגוס (vagus nerve) ואת הווריד הג'וגולרי הפנימי. במיקום קרנילי יותר, העורק התהומי המשותף מתפצל לעורק התהומי החיצוני ולעורק התהומי הפנימי.ניתן לצפות בעורק העורפי (occipital artery) גם כשהוא נובע מאזור ההסתעפות. בשיטה של COE, מפרידים ומבודדים בזהירות את העורק התרדימי המשותף (common carotid artery) הפרוקסימלי מהעצב התועה (vagus nerve). שלוש תפרים רפויות מסוג collar מוכנות מסביב לעורק התרדימי המשותף.יש להקדיש תשומת לב מיוחדת כדי שעצב הוואגוס לא יילכד בתוך תפר. יש לזהות ולבודד את העורק הקרוטיס חיצוני. לאחר מכן יש לצרוב אותו במרחק של שני עד שלושה מילימטרים דיסטלית למפגש (bifurcation).מהדקים את תפר הצווארון הפרוקסימלי ביותר בעורק התומי המשותף כדי לחסום את זרימת הדם באופן קבוע. חסמת הזרימה מאומתת על ידי ירידה של כ-50% מערכי הפרפוזיה הקורטיקלית הבסיסיים. קצוותיו החופשיים של התפר נגזרים. תפס כלי דם ממוקם רגע לפני ההסתעפות של העורק התומי המשותף כדי למנוע זרימת דם רטרוגרדית.בשלב הבא, מבצעים arterio בין תפס הכלי לבין הליגטורה באמצעות מספרי מיקרו. פעולה זו מאפשרת להחדיר את התפר בעל הקצה המעומלם (heat blunted) אל תוך העורק הקרוטיס המשותף (common carotid) ולהקימו עד להגעה לתפס הכלי. שני תפרי הצווארון המשוחררים שנותרו מהודקים בעדינות כדי למנוע דליפת זרימה חוזרת דרך העורק הקרוטיס המשותף.את תפס הכלי מושכים החוצה ואת התפר הקה מקדמים בעדינות אל תוך העורק הקרוטידי הפנימי. הפעולה נמשכת עד שמרגישים התנגדות קלה בקריאת הדופלר, המתבטאת בירידה של כ-80% מערך הבסיס. את שני תפרי הטבעת מהדקים היטב כדי למנוע דימום רטרוגרדי.כעת ניתן להשאיר את העכבר במצב של איסכמיה למשך פרק זמן מתאים. כדי לדמות רפרפוזיה, מושכים את תפרי החסימה לאחר מרווח זמן מתאים. קפיצה בקריאת הדופלר מעידה על כך שזרימת הדם הקולטרלית שוחזרה.התפר נסוג לחלוטין, ושני תפרי הצווארון מהודקים לחלוטין ונגזמים בשיטה הארוכה. ניתן להשתמש במסלול שונה כדי לחסום את העורק המוחי האמצעי. ראשית, יש לזהות, לבודד ולבצע כוויות לעורק הקרוטיס החיצוני רחוק ככל האפשר מהמרכז (distally), תוך השארת אורך מספיק להחדרת התפר.לאחר מכן מחלקים את העורק הקרוטיס חיצוני (external carotid artery), וענפיו נצרבים ונחתכים אף הם. קצה העורק הקרוטיס חיצוני נסוג. שתי תפרי צווארון (collar sutures) רפויות מוכנות סביב העורק הקרוטיס פנימי הפרוקסימלי, ממש מעל להסתעפות העורק הקרוטיס המשותף.העורק הקרוטיס המשותף (common carotid artery) נסגר זמנית באמצעות תלישת כלי דם (vessel clip). פעולה זו גורמת לירידה בערכי הפרפוזיה של כ-50% מיד לאחר ההסתעפות (bifurcation). העורק הקרוטיס הפנימי נסגר באופן דומה באמצעות תלישת כלי דם, ומבוצעת ארטרוטומיה (arterotomy) סמוך לקצה הגדם הרטרוקרטיס החיצוני שהוסט, באמצעות מספרי מיקרו.התפר בעל הקצה הקה (blunted), שעובד בחימום, מוחדר דרך העורק והעורק הקרוטי חיצוני ומקודם עד שהוא מגיע לתפסן כלי הדם שעל העורק הקרוטי הפנימי. שני תפרי הצווארון הרפויים סביב העורק הקרוטי הפנימי הפרוקסימלי מהודקים בעדינות כדי למנוע זרימת דם חוזרת (reflux), אך לא במידה שתגרום לטראומה לדופן העורק. לאחר מכן, תפסן כלי הדם מוסר מהעורק הקרוטי הפנימי, והעורק tri palatine מסתעף מהעורק הקרוטי הפנימי.בעוד התפר מקודם בעדינות, יש לנקוט משנה זהירות כדי למנוע דליפה לתוכו. ניתן להבחין בירידה שנייה במדד הדופלר. כאשר התפר קהה הקצה מגיע לעורק המוח האמצעי, יש להדק שוב את תפרי הצווארון כדי למנוע דימום רטרוגרדי.ניתן להשאיר כעת את העכבר במצב של איסכמיה למשך פרק הזמן המתאים. משיכת התפר התעומל מחזירה את זרימת הדם, כפי שעולה מהעלייה במונה הדופלר. לאחר הסרה מלאה של התפרים, יש לבצע קאוטריזציה לקצה של העורק הקרוטידי החיצוני.כדי למנוע דימום לאחר הניתוח, יש לנקוט באמצעים להבטחת הפתיחות של העורק הקרוטיס המשותף (common carotid artery). לאחר מכן, יש להרפות ולחתוך את תפרי הצווארון בעורק הקרוטיס הפנימי הפרוקסימלי, ולהסיר את התפסית מהעורק הקרוטיס המשותף כדי להחזיר את זרימת הדם. הדבר יבוא לידי ביטוי בקפיצה שנייה בקריאת הדופלר.לאחר שהעכבר חוזר להכרה, ניתן להעריך גרעונות נוירולוגיים בנקודות זמן שונות בהתאם לסולם של חמש נקודות. ציון של אפס מציין היעדר גרעון נוירולוגי נראה לעין; ציון של אחת, התואם לשבץ קל, בא לידי ביטוי באי-יכולת לפרוש את ה-four PA בצד הנגדי להמיספרה שבה התרחש השבץ. ציון של שתיים, התואם לשבץ בינוני, בא לידי ביטוי בתנועה סיבובית בכיוון ההפוך לזה של ההמיספרה שבה התרחש השבץ.ציון של שלוש, המתאים לשבץ חמור, בא לידי ביטוי בנפילה לכיוון ההפוך מהמ hemisphere של השבץ. עכבר עם ציון של ארבע לא יראה פעילות מוטורית ספונטנית. כדי לקבל מדידה של נפח השבץ, המוך מוצא מהגולגולת בנקודת זמן מתאימה.לאחר הרפרופוזיה, המוח מוצב במכשיר לחיתוך מטריציוני (matrix slicer) וכל המוח נחתך במישור קורונלי. במרווחים של 2 mm, המוצאים מהמוח הקטן (Cerebellum) ומהבצלים הריחיים נשמרים בנפרד או נזנקים. כל נתח של 2 mm מושרה בתמיסת TTC בריכוז 2% למשך 20 דקות בטמפרטורה של 37 °C בחשיכה.תמונות דיגיטליות של חתכי המוח מראות כי צביעת ה-TTC צבעה את הרקמה החיה באדום והשאירה את הרקמה שעברה אוטם (infarcted tissue) בצבע לבן חיוור בכל חתך. שטח האוטם המסומן כאן כ-1, השטח של כל ההמיספירה האיפסילטרלית המסומן כאן כ-2, והשטח של ההמיספירה הקונטרלטרלית המסומן כאן כ-3, נמדדו כולם באמצעות תוכנת Image J. לאחר מדידת השטחים של כל החתכים, ניתן לחשב את הנפחים באופן בלתי תלוי על ידי סכימת ערכי השטחים והכפלתם בעובי הפרוסה.כדי למצוא את נפח האינפארקט המתוקן לבצקת, נעשה שימוש בנוסחה הבאה. נפח זה מבוטא כאחוז מנפח ההמיספרה האיפסילטרלית. מודל ה-MCO מספק תוצאות הניתנות לשחזור.עם זאת, מספר גורמים פרוצדורליים עלולים להפריע לביצוע הטכניקה. ציפוי הסיליקון בקצה התפר הוא חשוב מכיוון שהוא מחליק את שטח הפנים של התפר ומפחית את הסיכון לשחיקה של האנדותל או לנקב בכלי הדם. כמו כן, ניתן לשנות את ציפוי התפר כדי לשקף מטרות ניסיוניות שונות.ציפוי מעבר לשלושה עד ארבעה מילימטרים מקצה הצינור יחסום את העורק הפרוקסימלי לעורק המוחה האמצעי (middle cerebral artery), ובכך יגדיל את נפח השבץ הכולל. יש להניח תפרי צבע בזהירות כדי לא להגביל את עצב הוואגוס (vagus nerve) ולקשור אותם בעדינות כדי לא לפגוע בדופן ה-AAL. טמפרטורת הגוף של העכבר עשויה להשפיע על היקף האוטם (infarction), ולכן יש לשמור עליה יציבה לאורך כל הפרוצדורה.אנו מקווים שצפייה בסרטון זה תסייע לכם בניווט בתהליך הכירורגי ותספק נקודת התחלה איתנה לניסויים שלכם. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים.

intraluminal-middle-cerebral-artery-occlusion-mcao-model-for-ischemic

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פילמנטיות חסימה של עורק המוח התיכון הוא מודל משותף לחקר שבץ איסכמי בעכברים.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

מודל intraluminal המוח האמצעי, החסימה בעכברים מוצג במסמך זה. ההיקף אוטם מוחית מחושב על ידי ציון נוירולוגים וכתמים סגולים cresyl, מכתים חלופה לTTC, להציע את היתרון הגדול לבדיקה בסמני ריבית רבים במקביל.

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

כמה מודלים של בעלי חיים של איסכמיה המוחית פותחו כדי לדמות את המצב האנושי של שבץ. פרוטוקול זה מתאר אנדותלין 1-(ET-1) עורק המוח האמצעי, המודל המושרה החסימה (MCAO) עבור שבץ איסכמי בחולדות. בנוסף, שיקולים חשובים, יתרונות וחסרונות של מודל זה הם דנו.

אנדותלין-1 דגם מושרה מזרח מוחות עורקים ספיגים לשבץ איסכמי עם הדרכת Flowmetry ליזר דופלר בעכברוש

מודלים עכבריים שונים של חסימת עורק המוח אמצעית (MCAO) נמצאים בשימוש נרחב בחקר המוח ניסיוני. הנה, אנחנו מדגימים את המודל של MCAO דיסטלי הקבוע transcranial אשר מייצר אוטם קליפת המוח עקבי של גודל המתאים לנזק שהוטל על ידי הרוב המכריע של מקרי שבץ איסכמי אנושיים.

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

על מנת להבין את פתופיזיולוגיה של שבץ, חשוב להשתמש במודלים אמינים. מאמר זה יתאר את אחד דגמי שבץ הנפוצים ביותר בשימוש בעכברים, כינה את חסימת עורק המוח האמצעי (MCAo) המודל (המכונה גם נימת intraluminal או מודל תפר) עם reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

כאן, אנו מתארים דגם עכבר של איסכמיה רשתית על ידי חסימת עורקים דו-צדדית נפוצה חולפת באמצעות תפרים פשוטים ומהדק. מודל זה יכול להיות שימושי להבנת המנגנונים הפתולוגיים של איסכמיה ברשתית הנגרמת על ידי מומים קרדיווסקולריים.

דגם מורין של פגיעה איסכמית ברשתית הנגרמת על ידי חסימת עורקים דו-צדדית משותפת חולפת

מודלים שונים של אומת עורק המוח האמצעי (MCAo) משמשים במחקר שבץ ניסיוני. כאן, מודל שבץ ניסיוני של MCAo חולף דרך העורק הראשי החיצוני (ECA) מתואר, שמטרתו לחקות שבץ אנושי, שבו פקקת המוח מוסרת עקב תמוגה קריש ספונטני או טיפול.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

פרוטוקול זה מדגים מודל שבץ עכבר ייחודי עם אוטם בגודל בינוני ושיעור הישרדות מצוין. מודל זה מאפשר לחוקרי שבץ פרה-קליניים להאריך את משך האיסכמיה, להשתמש בעכברים מזדקנים ולהעריך תוצאות תפקודיות ארוכות טווח.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל חסימת עורק מוחי אמצעי דיסטלי (dMCAO) באמצעות אלקטרוקואגולציה טרנס-גולגולתית בעכברי C57BL/6J ומעריכים את ההתנהגות הנוירולוגית והתכונות ההיסטופתולוגיות שלאחר מכן.

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

למד את מודל MCAO לחקר שבץ איסכמי בעכברים באמצעות חסימת עורק מוחי תיכון עם פלומטריית דופלר לייזר. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של זרימת הדם ויוצרת איסכמיה ניסויית בצורה נשלטת ושחזורית.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

גלה סרטונים נוספים