Name: פרוטוקול אופטימליים לגידול Fopius arisanus, טפיל של פירות Tephritid זבובים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min
Description: למדו פרוטוקול מותאם לגידול Fopius arisanus, טפיל של זבובי פירות Tephritid, לשימוש בבקרה ביולוגית. השיטה מאפשרת גידול יעיל של המושבה לניהול מזיקים חקלאיים בקנה מידה קטן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

אנו מודים קית&#39; Shigeteni לסיוע insectary ונטשה Sostrom לעזרה עם גרפיקה ממוחשבת. עבודה זו מומנה על ידי USDA-ARS. דעות, ממצאים, מסקנות או המלצות ביטוי בפרסום זה הן של המחברים ואינן משקפות בהכרח את הדעות של ה-USDA. משרד החקלאות היא ספקית הזדמנות שווה המעסיק.

1. הכן פרי מארח ביצים לטוס parasitization <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת המצע של זבוב הפירות ביצים להיות parasitized ידי הכנת אגר (לחלופין, Gelcarin GP812, FMC biopolymer, יואינג NJ; אופציה חסכונית יותר) ומנות מלאות, 10 ס"מ אורך לכל צד ו 1.5 ס"מ עומק. הכן אגר בריכוז של 9 גרם לליטר מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלאו הכלים שולי עם אגר נוזלי (כ 70ml), ולאפשר להם קריר לחזק (לפחות 45 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר בלוקים אגר הם מוצק, למרוח שכבה אחת של נייר (א רובדי יחיד של רקמת אצווה "העדפות" ג'ורג'יה פסיפיק), מכסה את החלק העליון של כל בלוק. הרקמה צריכה מקל בקלות אגר בגלל לחות פני השטח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלת נפח 0.5 מ"ל פירות לטוס ביצים מושעה בתוך המים אל פני השטח מכוסה ברקמה מאבני אגר. ב insectary שלנו, זה שווה ערך ל כ 6000 ביצים של Bactrocera dorsalis (12,000 ביצים לכל מ"ל). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש נקי 2.5 ס"מ מכחול רחב טבולה במים כדי להפיץ את זבוב הפירות הביצים באופן שווה על פני הרקמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את זבוב הפירות ביצים תחת המסך התחתון של כלובי טפיל לאפשר ההטלה. לחץ על החלק התחתון של המסך התחתון כדי להסיר טפילים מתים העלולים לחסום את הביצים. זה הכי טוב אם המסך התחתון לא נוגע ביצים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר טפילים כדי oviposit לילה אל היום הבא, כ 21 שעות. זהו זמן מספיק עבור אחוז גבוה של הביצים להיות parasitized. ארוך יותר סיכונים superparasitization חשיפה. </li></ol> 2. הבקיעה התגלמות של פירות מארח parasitized זבובים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן גידול מכולה על ידי הנחת 3-3.5 בלוקים אגר מוכן ביצים parasitized לכל 1.25 ליטר של דיאטה פירות לטוס 19 עם ביצים פונה כלפי מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את מיכל דיאטה עם ביצים על riser מעל שכבה 1.5 ס"מ עמוקה של vermiculite כיתה קנס או חול שטף במיכל התגלמות יותר. מכסים את המיכל התגלמות עם מכסה קלטת את הקצוות של קלטת עם מיסוך. Vermiculite ניתן לעשות בה שימוש חוזר לאחר ניפוי (ראה להלן). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שיש די מקום בין החלק העליון של המיכל דיאטה את מכסה מיכל התגלמות עבור הזחלים פרי לעוף לזחול החוצה 'פופ' 20 לתוך vemiculite למטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת מכולות התגלמות לחדר ב 27 מעלות צלזיוס והלחות היחסית 80% (RH) למשך שבוע. מכולות מכסים במגבת כהה עבור ארבעת הימים הראשונים ולאחר מכן להסיר את הבד על פני הימים שנותרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר דיאטה הזחל לאחר שבוע, פעם הזחלים קפצו ונכנסו vermiculite עבור התגלמות. אם יש זחלים ב vermiculite, לאפשר להם pupate לילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המסננת של גלמים vermiculite. התחל עם מסננת גסה (כ 3 מ"מ) ולאחר מכן להשתמש מסננת יד כדי להסיר גושים שנותרו vermiculite. </li></ol> 3. מיון בחירה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פופה המכיל פ arisanus יכול להיות הפרדה חלקית על ידי גודל של זבובי פירות unparasitized. איסוף גולם בין 1.65 לבין 2.26 מ"מ בקוטר, כמו אלה יהיה מועשר לזבובים parasitized. Puparia 12 אשר הם קטנים מכילים בעיקר parasitoids גוץ, גולם גדול מכילים בעיקר זבובים. שימו לב עבור גלמים parasitized אחוז הנקבות בקורלציה חיובית עם גודל 12. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגוון שיטות יכולים להיות מועסקים כדי למיין לפי גודל גלמים. נתאר שיטה מכנית באמצעות גודל מותאם אישית סדרן 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום גלמים בתוך המשפך בחלקו העליון של מזין רטט אשר לאט הזנות סדרן גודל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאכיל את גלמים לתוך סדרן גודל, אשר מורכב של זוג ברים מתגלגל מסתעף מעט בזווית של ° 30. הירידה גלמים בנפרד לפי גודל לתוך מערך של משבצות ריקות כי לעשרה מיכלים נפרדים באמצעות משפך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף גלמים מן כוסות בטווח גודל של 1.65 עד 2.26 מ"מ ומניחים אותם בכלוב הופעתה למשך 7 ימים נוספים עד שרוב זבובים התפתחו מתוך גלמים unparasitized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב הבא, להשתמש אוהד להפריד puparia ריק מאלה חרקים המכיל עדיין. </li></ol> 4. פ arisanus הופעתה ותחזוקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לשמור על מושבה של פ arisanus להשתמש בכלוב מחזיק טפיל עם חזית זכוכית נשלף, כ 25 ס"מ אורך לכל צד. בכלוב יש 1mm 2 ההקרנה על גבי שני הצדדים. הגב הכלוב מכוסה בסדין גומי עם חור 9 ס"מ לצורך גישה. תחתית הכלוב יש לחתוך מכוסה עם מסך 2 1-2mm גדול מספיק כדי לאפשר השמה של שני רחובות עם אגר לטוס ביצים פירות ההטלה טפיל מבפנים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלובי מחזיק צריך גם חלק כהים לאורך הרבעון התחתון של חזית הזכוכית כדי למזער את האור אשר יכול ליצור צפיפות טפיל לאורך חזית של הכלוב, וכתוצאה מכך תמותה גבוה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים כ 11 גרם של אלה אין תמיכה בבחירהטד גלמים לתוך מיכלי פלסטיק של כ 9 ס"מ קוטר. זה אמור לייצר כ 600-700 טפילים לכל כלוב. בחירת גודל צריך להביא כ -60% נקבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מכסים הוקרן על המכולות. העפעפיים צריכים להיות מכוסים ההקרנה 2 מ"מ 2, אשר יאפשר למבוגרים פ arsianus לעזוב את המכולות על הופעתה, אך יכיל כל זבובי פירות הנותרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמירה על טפילים על 24 מעלות צלזיוס כ 45% לחות יחסית עם אוורור photoperiod וטוב 12:12. אם תמותה גבוה הוא ציין, העברת הכלובים בחוץ במשך כמה שעות ביום או אוורור הגדלת עשוי להפחית אותו. טפילים צריכים להיות מוכנים oviposit בשבוע אחד נוסף צריך להיות פרודוקטיבי למשך שבועיים נוספים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Streak חי דבש הסתובב לאורך החלק העליון של הכלובים לפחות שלוש פעמים בשבוע או בכל פעם הדבש זמין יבש. החל הדבש הסתובב פסים צרים בעזרת האצבע. שים לב שאם פסים הם כבדים מדי דבש יהיה לטפטף לתוך הכלוב, אם קל מדי הדבש יתייבש במהירות דורשים reapplication תכופים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אגר פלייס רחובות (10 ס"מ X 10 ס"מ X 4 ס"מ) על ראשי הכלובים לספק לחות הטפילים. אלה יש לשנות פעמיים בשבוע. </li></ol> 5. נציג תוצאות: אנו מדווחים כאן תוצאות הליכי בקרת איכות שנערכו על פ ה-USDA-ARS arisanus פעולה גידול של חילו, הוואי בין 5 ינואר ועד 22 ביוני 2010. גידול במיקום חילו בסולם המתואר במאמר זה וידאו פרוטוקול יזם בחודש אוגוסט 2009, ובעיות הראשונית והתאמות עם המיקום החדש היה לפתור בעיקר על ידי ינואר. לכן, נתונים אלה מייצגים את התוצאות חוקרים אחרים עשויים להשיג החל המושבה שלהם אם הם לעקוב אחר פרוטוקול כמתואר יש גידול חרקים ניסיון כלל. בתקופה זו היינו שמירה על מושבה קטנה של פ arisanus: 4 כלובים מחזיק טפיל מיוצר בשבוע, שווה ערך ל כ 3600 פ arisanus. לבדוק הראשונית של שיעורי מועשר parasitization נערך על ידי לקיחת דגימה 2 גרם של גלמים בטווח גודל של 1.65-2.26 מ"מ (מועשר) לפני שבוע נוסף של התפתחות בכלוב החזקה (כלומר מיד לאחר דיאטה הזחל הוסר גלמים מנופה וגודל מיון. אנחנו מתייחסים כמו אלה "גלמים מוקדם"). במהלך שלושת החודשים הראשונים של 2010 שיעור ממוצע טפילים במדגם מועשר היה 0.46 (SD = 0.18). במהלך הרבעון הבא מתכוון לזה היה 0.58 (SD = 0.08), המשקף ייצוב ההליכים המושבה וגידול במיקום החדש. שים לב גלמים מועשר אשר לא היו parasitized בהצלחה כוללים את אלה שלא לייצר emergents ואלה המיוצרים זבובים. אחרי שבוע נוסף של הסרת כלוב החזקת puparia ריק מדגם עוד שני גרם נלקח ("גלמים המנוח"). זבובי פירות מיוצג מתחת 1% של המדגם השני. אחוז נמוך של זבובי פירות נובע חלקית עד הופעתה הקודמת של זבובים לעומת טפילים, ולכן רוב זבובים נשאר במיכל מחזיק. לבסוף, איור 1 נותן את התשואה מסה גלמי ינואר עד יוני 2010. התשואות נמדדות על פי גלמים מועשר בטווח גודל של עניין, 1.65-2.26 מ"מ. מסה גדולה של "מוקדם גלמים" בתחילת השנה מצביע על שיעור גבוה של זבובי פירות וגלמים unemerged באותו זמן, תוך התאמות נעשו למתקן החדש. <img src="/files/ftp_upload/2901/2901fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="איור 1"> באיור 1. תשואה של מועשר (קוטר גלמי 1.65-2.26mm) מוקדם (מיד לאחר בחירת גודל) ו 'מאוחר' (לאחר מחזיק למשך שבוע והסרה תרמילי ריק) גלמים על המושבה ARS-USDA ariasnus פ ב חילו, הוואי בינואר - יוני 2010

<ol><li>Wang, X. G., Bokonon-Ganta, A. H., Ramadan, M. M., Messing, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Egg-larval+opiine+parasitoids+%28Hym.%2C+Braconidae%29+of+tephritid+fruit+fly+pests+do+not+attack+the+flowerhead-feeder+Trupanea+dubautiae+%28Dipt.%2C+Tephritidae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Egg-larval opiine parasitoids (Hym., Braconidae) of tephritid fruit fly pests do not attack the flowerhead-feeder Trupanea dubautiae (Dipt., Tephritidae.</a> Journal of Applied Entomology. 128, 716-722 (2004).</li>
<li>Vargas, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+for+areawide+integrated+management+of+Mediterranean+fruit+fly+%28Diptera+%3A+Tephritidae%29+with+a+braconid+parasitoid+and+a+novel+bait+spray%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Potential for areawide integrated management of Mediterranean fruit fly (Diptera : Tephritidae) with a braconid parasitoid and a novel bait spray.</a> Journal of Economic Entomology. 94, 817-825 (2001).</li>
<li>Vargas, R. I., Leblanc, L., Putoa, R., Eitam, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+introduction+of+Bactrocera+dorsalis+%28Diptera+%3A+Tephritidae%29+and+classical+biological+control+releases+of+Fopius+arisanus+%28Hymenoptera+%3A+Braconidae%29+on+economically+important+fruit+flies+in+French+Polynesia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Impact of introduction of Bactrocera dorsalis (Diptera : Tephritidae) and classical biological control releases of Fopius arisanus (Hymenoptera : Braconidae) on economically important fruit flies in French Polynesia.</a> Journal of Economic Entomology. 100, 670-679 (2007).</li>
<li>Harris, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+melon+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+populations+with+releases+of+Fopius+arisanus+and+Psyttalia+fletcheri+%28Hymenoptera+Braconidae%29+in+North+Shore+Oahu%2C+HI%2C+USA%5BTitle%5D)+AND+%22Biocontrol%22%5BJournal%5D)">Suppression of melon fly (Diptera: Tephritidae) populations with releases of Fopius arisanus and Psyttalia fletcheri (Hymenoptera Braconidae) in North Shore Oahu, HI, USA.</a> Biocontrol. 55, 593-599 (2010).</li>
<li>Haramoto, F. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22The+Biology+of+Opius+oophilus+Fullaway+%28Hymenoptera%3A+Braconidae%29+%5B%5D%22">The Biology of Opius oophilus Fullaway (Hymenoptera: Braconidae) [dissertation]</a>. , University of Hawaii. Honolulu, HI. (1988).</li>
<li>Chong, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+methods+for+fruit+fly+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Hawaiian+Entomological+Society%22%5BJournal%5D)">Production methods for fruit fly parasites.</a> Proceedings of the Hawaiian Entomological Society. 18, 61-63 (1962).</li>
<li>Snowball, G. J., Wilson, F., Lukins, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+and+consignment+techiques+used+for+parasites+introduced+against+Queensland+fruit+fly+%28Strumeta+tryoni+%28Frogg%29.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Australian+Journal+of+Agricultural+Research%22%5BJournal%5D)">Culture and consignment techiques used for parasites introduced against Queensland fruit fly (Strumeta tryoni (Frogg).).</a> Australian Journal of Agricultural Research. 13, 233-248 (1962).</li>
<li>Ramadan, M. M., Wong, T. T. Y., Beardsley, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+Behavior+of+Biosteres+arisanus+%28Sonan%29+%28Hymenoptera%3ABraconidae%29%2C+an+Egg-Larval+Parasitoid+of+the+Oriental+Fruit+Fly%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Reproductive Behavior of Biosteres arisanus (Sonan) (Hymenoptera:Braconidae), an Egg-Larval Parasitoid of the Oriental Fruit Fly.</a> Biological Control. 2, 28-34 (1992).</li>
<li>Ramadan, M. M., Wong, T. T. Y., McInnis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+biology+of+Biosteres+arisanus+%28Sonan%29%2C+an+egg-larval+parasitoid+of+the+oriental+fruit+fly%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Reproductive biology of Biosteres arisanus (Sonan), an egg-larval parasitoid of the oriental fruit fly.</a> Biological Control. 4, 93-100 (1994).</li>
<li>Harris, E. J., Okamoto, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+rearing+Biosteres+arisanus+%28Hymenoptera%2C+Braconidae%29+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">A Method for rearing Biosteres arisanus (Hymenoptera, Braconidae) in the laboratory.</a> Journal of Economic Entomology. 84, 417-422 (1991).</li>
<li>Bautista, R. C., Harris, E. J., Lawrence, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+rearing+of+the+fruit+fly+parasitoid+Biosteres+arisanus%3A+clues+to+insectary+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+Et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Biology and rearing of the fruit fly parasitoid Biosteres arisanus: clues to insectary propagation.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 89, 79-85 (1998).</li>
<li>Bautista, R. C., Mochizuki, N., Spencer, J. P., Harris, E. J., Ichimura, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass-rearing+of+the+tephritid+fruit+fly+parasitoid+Fopius+arisanus+%28Hymenoptera+%3A+Braconidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Mass-rearing of the tephritid fruit fly parasitoid Fopius arisanus (Hymenoptera : Braconidae).</a> Biological Control. 15, 137-144 (1999).</li>
<li>Bautista, R. C., Harris, E. J., Vargas, R. I., Jang, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parasitization+of+melon+fly+%28Diptera+%3A+Tephritidae%29+by+Fopius+arisanus+and+Psyttalia+fletcheri+%28Hymenoptera+%3A+Braconidae%29+and+the+effect+of+fruit+substrates+on+host+preference+by+parasitoids%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Parasitization of melon fly (Diptera : Tephritidae) by Fopius arisanus and Psyttalia fletcheri (Hymenoptera : Braconidae) and the effect of fruit substrates on host preference by parasitoids.</a> Biological Control. 30, 156-164 (2004).</li>
<li>Rousse, P., Gourdon, F., Quilici, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+specificity+of+the+egg+pupal+parasitoid+Fopius+arisanus+%28Hymenoptera+%3A+Braconidae%29+in+La+Reunion%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Host specificity of the egg pupal parasitoid Fopius arisanus (Hymenoptera : Braconidae) in La Reunion.</a> Biological Control. 37, 284-290 (2006).</li>
<li>Quimio, G. M., Walter, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+preference+and+host+suitability+in+an+egg-pupal+fruit+fly+parasitoid%2C+Fopius+arisanus+%28Sonan%29+%28Hym.%2C+Braconidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+fur+Angewandtes+Entomologie%22%5BJournal%5D)">Host preference and host suitability in an egg-pupal fruit fly parasitoid, Fopius arisanus (Sonan) (Hym., Braconidae).</a> Zeitschrift fur Angewandtes Entomologie. 125, 135-140 (2001).</li>
<li>Calvitti, M., Antonelli, M., Moretti, R., Bautista, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oviposition+response+and+development+of+the+egg-pupal+parasitoid+Fopius+arisanus+on+Bactrocera+oleae%2C+a+tephritid+fruit+fly+pest+of+olive+in+the+Mediterranean+basin%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+Et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Oviposition response and development of the egg-pupal parasitoid Fopius arisanus on Bactrocera oleae, a tephritid fruit fly pest of olive in the Mediterranean basin.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 102, 65-73 (2002).</li>
<li>Montoya, P., Suarez, A., Lopez, F., Cancino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fopius+arisanus+oviposition+in+four+Anastrepha+fruit+fly+species+of+economic+importance+in+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Biocontrol%22%5BJournal%5D)">Fopius arisanus oviposition in four Anastrepha fruit fly species of economic importance in Mexico.</a> Biocontrol. 54, 437-444 (2009).</li>
<li>Vargas, R. I., Shelly, T. E., Leblanc, L., Piñero, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+Advances+in+Methyl+Eugenol+and+Cue-Lure+Technologies+for+Fruit+Fly+Detection%2C+Monitoring%2C+and+Control+in+Hawaii%5BTitle%5D)+AND+%22Pheromones%22%5BJournal%5D)">Recent Advances in Methyl Eugenol and Cue-Lure Technologies for Fruit Fly Detection, Monitoring, and Control in Hawaii.</a> Pheromones. 83, 575-595 (2010).</li>
<li>Tanaka, N., Steiner, L. F., Ohinata, K., Okamoto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-cost+larval+rearing+medium+for+mass+production+of+oriental+and+Mediterranean+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Low-cost larval rearing medium for mass production of oriental and Mediterranean fruit flies.</a> Journal of Economic Entomology. 62, 967-968 (1969).</li>
<li>Vargas, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+production+of+tephritid+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22World+crop+pests.+Fruit+flies%3A+Their+biology%2C+natural+enemies+and+control%22%5BJournal%5D)">Mass production of tephritid fruit flies.</a> World crop pests. Fruit flies: Their biology, natural enemies and control. 3, 141-151 (1989).</li>
<li>Spencer, J. P., Mochizuki, N., McInnis, D. O., Liquido, N. J. Mechanical separation of parasitoid sexes based upon size of fruit fly host pupae. Abstracts of the 2nd meeting of the Working Group on Fruit Flies of the Western Hemisphere Vina Del Mar, Chile, , (1996).</li>
<li>Dukas, R., Duan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+fitness+consequences+of+associative+learning+in+a+parasitoid+wasp%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Ecology%22%5BJournal%5D)">Potential fitness consequences of associative learning in a parasitoid wasp.</a> Behavioral Ecology. 11, 536-543 (2000).</li>
<li>Drew, R., Tsuruta, K., White, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+species+of+pest+fruit+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%3A+Dacinae%29+from+Sri+Lanka+and+Africa%5BTitle%5D)+AND+%22African+Entomology%22%5BJournal%5D)">A new species of pest fruit fly (Diptera: Tephritidae: Dacinae) from Sri Lanka and Africa.</a> African Entomology. 13, 149-154 (2005).</li>
<li>Argov, Y., Gazit, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+of+the+Mediterranean+fruit+fly+in+Israel%3A+Introduction+and+establishment+of+natural+enemies%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Biological control of the Mediterranean fruit fly in Israel: Introduction and establishment of natural enemies.</a> Biological Control. 46, 502-507 (2008).</li>
<li>Bokonon-Ganta, A. H., Ramadan, M. M., Messing, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+biology+of+Fopius+ceratitivorus+%28Hymenoptera+%3A+Braconidae%29%2C+an+egg-larval+parasitold+of+the+Mediterranean+fruit+fly%2C+Ceratitis+capitata+%28Diptera+%3A+Tephritidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Reproductive biology of Fopius ceratitivorus (Hymenoptera : Braconidae), an egg-larval parasitold of the Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata (Diptera : Tephritidae).</a> Biological Control. 41, 361-367 (2007).</li>
</ol>

אין לנו שום ניגודי עניינים לדווח.

במאמר פרוטוקול וליווי וידאו זה שתיארנו והפגינו פרוטוקול מותאם לגידול פ ariasnus, טפיל של זבובי פירות Tephritid, במעבדה הגדרה. פרוטוקול זה שוכללה במרוצת השנים כדי לצמצם את כמות הציוד העבודה המקצועית הדרושים כדי לשמור על המושבה. נציין כי מבוססת היטב, המושבה פורה ויציב של זבובי פירות מארח נדרש כל ניסיון parasitoids גידול. ב insectary שלנו אנו משתמשים Bactrocera dorsalis כמו זבוב פירות לארח, אבל מינים אחרים הוכחו להיות המארחים המוסמכת וכן 14-17. היבטים אחדים של פ תחזוקה arisanus המושבה להישאר כדי להיחקר. אלה כוללים את קצב הסתגלות מעבדה זו 10 מינים, מנגנונים של למידה 22 לבין שינויים גנטיים שעלולים להתרחש עם הסתגלות המנגנונים אשר עשויים להיות מעורבים פלסטיות פרי מארח לעוף. במהלך עשר השנים האחרונות היו מספר דוגמאות של התפשטות של זבובים Dacine ברחבי העולם, במיוחד אלה של Bactrocera הסוג: ב dorsalis בצרפתית פולינזיה, B. carambolae בחלקים של דרום אמריקה, B. invadens באפריקה ב zonata באפריקה צפון הים התיכון. 3,23,18 בדיקת היעילות של סוכנים הדברה ביולוגית כגון פ arisanus נגד זנים אחרים Bactrocera צריך להיות בעדיפות גבוהה, והוא תקוותנו היא כי יישום של השיטות שתוארו בפרוטוקול זה במאמר הנלווה וידאו, יאיץ את המחקר על פ arisanus במגוון רחב יותר של מיקומים 24. לבסוף, מחקר נוסף בשיטה זו כנקודת מוצא עשויה גם לספק מידע חשוב קולוניזציה של parasitoids רומן ביצה 25,1

פרוטוקול אופטימליים לגידול fopius arisanus, טפיל של פירות tephritid זבובים

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

Fopius arisanus (Sonan) הוא טפיל חשוב של זבובי פירות Tephritid לפחות שתי סיבות. ראשית, הוא אחד משלושת parasitoids opiine ידוע להדביק את המארחת בשלב ביצה 1. שנית, יש מגוון רחב של המארחים לטוס פוטנציאל פירות. אולי בגלל ההיסטוריה החיים שלו, פ arisanus כבר השתמשו בהצלחה עבור הדברה ביולוגית של זבובי פירות באזורים טרופיים רבים 2-4. אחת מניעה להשתמש רחב של פ arisanus שליטה זבוב הפירות היא שזה קשה להקים מושבה מעבדה יציב 5-9. למרות הקושי הזה, ב 1990 USDA החוקרים פיתחו שיטה אמינה לשמור על אוכלוסיות מעבדה של פ arisanus 10-12. יש עניין משמעותי פ arisanus ביולוגיה 13,14, במיוחד לגבי יכולתה ליישב מגוון רחב של המארחים Tephritid 14-17; העניין הוא מונע בעיקר על ידי התפשטות מדאיגה של מזיקים Bactrocera פרי לטוס יבשות חדשות בעשור האחרון 18. מחקר נוסף על פ arisanus ופריסות נוסף של מין זה כסוכן הדברה ביולוגית יהנה אופטימיזציות ושיפורים של שיטות גידול. בפרוטוקול זה מאמר וידאו הקשורים אנו מתארים שיטה מותאם לגידול פ arisanus מבוסס על גישה שתואר קודם לכן 12. שיטת הפעולה המתואר כאן מאפשר גידול של פ arisanus בקנה מידה קטן ללא שימוש פירות, שימוש בחומרים זמינים באזורים טרופיים ברחבי העולם, עם דרישות העבודה נמוך יחסית ידנית.

Fopius arisanus הוא טפיל הביצה הזחל של זבובי פירות Tephritid המשמש בהצלחה הדברה ביולוגית של מזיקים אלה טרופיים חשוב. אנו מתארים כאן פרוטוקול מותאם לגידול פ arisanus בקנה מידה קטן תוך שימוש בחומרים זמינים.

פרוטוקול אופטימליים לגידול Fopius arisanus, טפיל של פירות Tephritid זבובים

.Fopius arisanus (Sonan) הוא טפילי חשוב של זבובי פרי ממשפחת ה-Tephritidae משתי סיבות לפחות. ראשית, הוא אחד משלושה בלבד מסוג ה-opiine...

FOIA Aus הוא סוכן בקרה ביולוגית חשוב בהוואי מכיוון שהוא תוקף זבובים פירותיים, המהווים מזיקים כלכליים חמורים ברחבי הטרופיים ובמיוחד כאן בהוואי. היתרון של FOIA Aus הוא שהוא תוקף את שלב הביצה של חרק המזיקים, ובכך שולט בחרק בשלב מוקדם. בסרטונים הבאים תוכלו לראות תקריבים של האופן שבו אנו מרבים את FOIA Aus בסביבת מעבדה.ובסיום תוכנית זו, תראו מספר דיונים על האופן שבו פרזיטואיד זה שימש בתוכנית שחרור מוצלחת בפולינזיה הצרפתית. נתחיל את הפרוטוקול שלנו עם טפילים בוגרים שמוכנים לטפיל (osis) בביצי זבוב פירות המהווה את המארח. השלב הראשון הוא להכין את ביצי זבוב הפירות להגשה לטפיל.בשלב הבא, מאפשרים לזחלי זבוב הפירות לבקוע, להתפתח ולהפוך לגולם. ברגע שזבוב הפירות מגיע לשלב הגולם, הם ממוינים לפי גודל כדי להעשיר את ריכוז הטפילים. לבסוף, הטפילים בוקעים ונשמרים עד להגעתם לבגרות.לאחר מכן הם נפגשים ומוכנים שוב להטיל ביצים במנת פירות חדשה. ביצי זבוב. בכך נסגר המעגל.הכינו מצע לביצי זבוב הפירות על ידי הכנת בלוקי אגר (agar) במידה של כ-10 סנטימטרים לכל צד. האגר מוכן בריכוז של תשעה גרם אבקת אגר לליטר מים.על גבי משטח ישר, מלאו את הצלחות עד לשפתן ב-liquid auger, והמתינו לפחות 45 דקות עד להתגבשותו. לאחר שבלוקי ה-auger התגבשו, הניחו שכבה אחת של נייר סופג המכסה את החלק העליון של כל בלוק. הנייר אמור להיצמד בקלות ל-auger בשל הלחות שעל פני השטח.גלגול פעם שנייה. יש להניח את ביצי זבוב הפירות על פני השטח המכוסים ברקמה של בלוקי המקדח. נפח של 0.5 milliliter של ביצי זבוב הפירות בתמיסה מספק כ-6,000 ביצים לבלוק.מכחול ברוחב 2.5 סנטימטר הטבול במים משמש לפיזור אחיד של ביצי זבוב הפירות על פני השטח של הרקמה. ביצי זבוב הפירות מונחות כעת תחת הרשת התחתונה של כלובי הטפילים כדי לאפשר להם להטיל ביצים עליהן; תיפוף על הצד התחתון של הרשת מסיר טפילים מתים שעלולים לחסום את הגישה לביצי הזבובים. ביצי זבוב הפירות מאפשרות לטפילים להטיל ביצים במהלך הלילה.זמן של כ-21 שעות מספיק כדי שאחוז גבוה של ביצי זבוב הפירות יפרוש. חשיפה ממושכת יותר כרוכה בסיכון לפראזיטיזם-יתר (Super parasitizing). המרכיבים העיקריים הדרושים לגידול הביצים לאחר החשיפה לטפילים הם תזונת לרומי זבוב הפירות, מכלים לתזונת לרומים ומכלים לגולם.הניחו שלושה עד שלושה וחצי בלוקי מקדח מוכנים של ביצים שעברו פראזיטיזציה על 1.25 ליטר של מזון לזחלי זבוב הפירות. הניחו את מיכל המזון עם הביצים על מעמד, ומעליו מיכל בובנציה על שכבה בעומק 1.5 ס"מ של ורמיקוליט דק או חול שוטף.הדביקו את קצוות מיכל הגלגול באמצעות סרט הדבקה (masking tape). ודאו שיש מספיק מרווח בין החלק העליון של מיכל התזונה לבין מכסה מיכל הגלגול, כך שהזחלים יוכלו לזחול החוצה ולהיפול אל הוורמיקוליט שמתחת. העבירו את מיכלי הגלגול לחדר בטמפרטורה של 27 °C ובלחות יחסית של 80% למשך שבוע אחד.כסו את המכלים בבד עבה לארבעת הימים הראשונים לאחר שבוע. פתחו את מכלי הגלגול והסירו את מזון הזחלים. אנו משתמשים ב-Bre Dorsals כזבוב הפרי המאכסן לגידול של foia Airis.מינים אחרים בסוגים Asfa ו-sitis מהווים גם הם מאוכלים פוטנציאליים. אם ישנם פגומים שלא עברו בובנציה בורמיקוליט, יש לאפשר להם לעבור בובנציה במהלך הלילה. כדי להוציא את הבובות מהורמיקוליט, התחילו בשימוש בנפה גסה ובמכל גדול.בשלב הבא, השתמשו בנפה ידנית כדי להסיר גושים שנותרו של ורמיקוליט המכיל פופות. ניתן להפריד חלקית את הפופות מזבובים פירות שלא עברו פרזיטציה. על בסיס מחקרים קודמים, אנו אוספים רק פופות שקוטרן נע בין 1.65 ל-2.26 מילימטרים, שכן אלו שקוטרן קטן יותר מכילות לרוב פרזיטואידים שאינם בגודל המתאים.ב-aria גדולים ישנם בעיקר זבובים. ניתן להשתמש במגוון שיטות למיון הגולם לפי גודל. אנו נתאר שיטה מכנית המשתמשת במיון גודל מותאם אישית עבור ה-aria הפרוסייטיים שנאספו.אחוז הנקבות עולה עם הגודל. יש להניח את ה-puy בתוך המשפך בחלקו העליון של המיון המכני לפי גודל. מזין רטט מעביר אותם לחלקו העליון של זוג מוטות גלילה המסתעפים מעט בזווית של 30 מעלות. ה-aria נופלים באופן אינדיבידואלי לתוך מערך של חריצים המתרוקנים דרך משפכים לתוך 10 מכלים נפרדים.הניחו בובות בטווח גדלים של 1.65 millimeters עד 2.26 millimeters בכלוב בקיעה למשך שבעה ימים נוספים, עד שרוב הזבובים יבקעו מהבובות שעברו פרזיטציה. לאחר מכן, השתמשו במאוורר כדי להפריד את קליפות הבובות הריקות מאלו שעדיין מכילות פרזיטואידים חיים. כדי לתחזק את מושבת ה-Opia Aus, השתמשו בכלוב החזקת פרזיטים עם חזית זכוכית נשלפת, באורך של כ-25 centimeters לכל צד.לכלוב יש רשת של מילימטר רבוע אחד בחלקו העליון ובשניים מצדדיו. גב הכלוב מכוסה בגיליון גומי עם חור בקוטר תשעה סנטימטרים לצורך גישה. בתחתית הכלוב ישנו פתח המכוסה מבפנים ברשת של מילימטר רבוע אחד עד שניים.גדול מספיק כדי לאפשר הצבה של שני בלוקי מצע עם פרי, וביצי זבובים עבור מיקום הטפילים. לכלובי ההחזקה צריכה להיות גם חלק מוצל לאורך הרבע התחתון של חזית הזכוכית כדי למזער את דחיסות הטפילים לאורך חזית הכלוב. העבירו כ-11 גרם מהמצע שנבחר למכלים מפלסטיק, שקוטרם כארבעה סנטימטרים.פעולה זו אמורה להניב כ-600 עד 700 טפילים לכל כלוב. ברירה לפי גודל אמורה להביא לכ-60% נקבות. חברו מכסי רשת למכלים. המכסים צריכים להיות מכוסים ברשת של שני מילימטרים רבועים, שתאפשר לזבובים לצאת מהמכלים עם בקיעתם, אך תכיל את זבוב הפרי שנותרו.יש להחזיק את הטפילים בטמפרטורה של 24 °C ובלחות יחסית של כ-45%, עם מחזור תאורה של 12:12 ואוורור טוב. יש למרוח דבש מסובב בפסים לאורך חלקם העליון של הכלובים לפחות שלוש פעמים בשבוע, או בכל פעם שהדבש הקיים מיבש, על ידי מריחת הדבש המסובב בפסים צרים באמצעות קצה האצבע. שימו לב שאם הפסים יהיו עבים מדי, הדבש יטפטף לתוך הכלוב; אם הפסים יהיו דקים מדי, הדבש יתייבש במהירות וידרוש מריחה תכופה. יש להניח על גבי הכלובים בלוקים של אגר (auger blocks), בריבוע של 10 cm ובעומק של 4 cm, כדי לספק לחות לטפילים.יש להחליף את הבלוקים הללו פעמיים בשבוע. בשנת 2001, קיבלנו מענק זרעים קטן כדי לבחון אם נוכל להחדיר אמצעי בקרה ביולוגיים לפולינזיה הצרפתית כדי לסייע בשיפור המצב, כיוון שזבוב הפרי המזרחי גרם באותה תקופה למגיפה בלתי נתפסת של כל הפירות הטרופיים. במעבדה כאן בהוואי, ביצענו 10 משלוחים.כך שכל אחת ממשלוחים אלו כללה בדרך כלל כמאה אלף פרטים של *Fopius arisanus*; למעשה היו הרבה יותר, אך היינו שולחים את הפאופות (pupae) של זבוב הפרי המזרחי כשהפרסיטואיד נמצא בתוכן, ולאחר מכן היינו גורמים להם לבקוע. הקמנו מעבדה קטנה בטהיטי שבה קיבלנו את המשלוחים הללו, ואז גרמנו ל-*Fopius arisanus* לבקוע. לאורך תקופה של כשנה, שחררנו קרוב למיליון פרטים של *Fopius arisanus*.באופן כללי, זהו המקרה המצליח ביותר מחוץ להוואי. כאשר FOIA Aus שוחרר לראשונה בהוואי, הוא היווה את הדוגמה הטובה ביותר לבקרת ביולוגית של זבובים פירותים ברחבי האוקיינוס השקט. במהלך 10 השנים האחרונות, חלה התפשטות עצומה של קומפלקס ה-Bactrocera Dorsalis ברחבי העולם.כך ש-Bactrocera Carbo התפשט לדרום אמריקה, לסורינאם, וכעת הוא נמצא בצפון ברזיל. בנוסף, קיים מין אחר בשם Bacter Inance, שהתפשט ברחבי אפריקה וגורם לנזקים כבדים. כמו כן, חלה התפשטות של bacter papaya.לפיכך, הצלחה זו פותחת כעת הזדמנויות לשחרור ה-FOIA Aus הללו בדרום אמריקה, באפריקה ובחלקים אחרים של אסיה.

an-optimized-protocol-for-rearing-fopius-arisanus-parasitoid

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שיטה לגידול תסיסנית בתנאי axenic ו gnotobiotic מוצגת. עוברי זבובים הם dechorionated ב חומצת נתרן, הועברו בסביבה נקיה מחיידקים לתזונה סטרילי, וגדלו במיכלים סגורים. ייחסתי דיאטה ועובר עם חיידקים מובילים עמותות gnotobiotic, ונוכחות חיידקים אושר על ידי ציפוי homogenates תסיסנית הגוף כולו.

גידול זבוב הפירות<em&gt; תסיסנית</em&gt; בתנאי Axenic ו Gnotobiotic

כאן אנו מציגים פרוטוקול המבוסס על מערכת פיתיון תולעי הארוחות (Tenebrio molitor) ששימשה לבידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) מדגימות קרקע. נוסחת מספר קונידיה יעילה (ECN) משמשת לבחירת EPF עמיד בפני מתח גבוה המבוסס על מאפיינים פיזיולוגיים לבקרת מזיקים מיקרוביאלית בתחום.

בידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות מדגימות קרקע והערכה של אלימות פטרייתית נגד מזיקי חרקים

Ganaspis brasiliensis - טפיל זחל של Drosophila suzukii (מזיק גידולי פירות פולש עולמי) - אושר או נחשב להכנסתו לאירופה ולארצות הברית להדברה ביולוגית של מזיק זה. מאמר זה מספק פרוטוקולים הן לגידול בקנה מידה קטן והן בקנה מידה גדול של טפיל זה.

שיטות לגידול ה-Ganaspis brasiliensis הטפילי, חומר הדברה ביולוגי מבטיח לסוזוקי דרוזופילה הפולשני

הגברת האיתור של זבובי פירות טפריטידים לא בוגרים בשטח יכולה לעורר מאמצים בזמן לחסל אוכלוסיות של מזיקים הרסניים אלה. איתור זחלי אינסטאר מאוחרים הוא מהיר ומדויק יותר כאשר מועכים פירות פונדקאי בשקית ומעבירים את הציפה דרך סדרה של מסננות מאשר חיתוך ידני ובדיקה חזותית.

ניפוי עיסת פירות לאיתור זבובי פירות טפריטידים לא בשלים בשדה

כאן אנו מציגים פרוטוקול לקבלת פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער ודרך חלופית להעריך את פעילותן האנטומופתוגנית באמצעות חרק מודל קולאופטרן. שיטה זו יעילה ונוחה לחקר משאבים פטרייתיים אנטומופתוגניים ממזיקים חרקים משעממי עץ ביערות טבעיים.

בידוד, זיהוי התנהגותי והערכת פתוגניות של פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער

מאמר זה מתאר את תחזוקת המעבדה (כולל הזדווגות והאכלה) של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila.

תחזוקת מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila: אורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן

מטרת הפרוטוקול היא להקל על ניתוח פונקציונלי של אינטראקציות בין פרזיטואידים למארח ב-Asobara japonica וב-Drosophila melanogaster. באמצעות שיטות גידול אופטימליות, בדיקת זיהום בביצת ביצים יחידה, והפלת גנים בתיווך RNAi.

פרוטוקולים לגידול יעיל וניתוח תפקודי של הצרעה האנדופרזיטואידית Asobara japonica והמארח שלה Drosophila melanogaster

לימוד תוקפנות תסיסנית (זבובי פירות)

וידאו זה מדגים את הטכניקות כללי המשמש האחורי אנופלס gambiae במעבדה. שיטות עבור הטיפול יתושים מעבדה הם הפגינו לאורך כל שלבי מחזור החיים של האורגניזם מ זחלים וגלמים אל על דם האכלה מבוגרים.

פרוטוקול לגידול יתושים (א gambiae)

השיטה המהירה לניתוח מתחם נדיפים בפרי מתואר. התרכובות נדיפים הנמצאים אמיץ של homogenate המדגם מופרדות במהירות זוהה עם כרומטוגרפיה אולטרה מהיר גז (GC) יחד עם גל משטח אקוסטי (SAW) חיישן. נוהל לטיפול נתונים וניתוח נדון גם.

פרי ניתוח נדיפים באמצעות האף האלקטרוני

למדו פרוטוקול מותאם לגידול Fopius arisanus, טפיל של זבובי פירות Tephritid, לשימוש בבקרה ביולוגית. השיטה מאפשרת גידול יעיל של המושבה לניהול מזיקים חקלאיים בקנה מידה קטן.

פרוטוקול אופטימליים לגידול Fopius arisanus, טפיל של פירות Tephritid זבובים

גלה סרטונים נוספים