הזרקה תוך צפקית של תאים: שיטה להעברת תאים סרטניים לרקמת השומן הצפקית של מודל מורין

חלל הצפק הוא החלל שבין דופן הבטן לרירית האיברים הפנימיים. להזרקה תוך-צפקית, התחל בריסון עכבר חי באזור הצוואר שלו כך שראשו של העכבר נוטה כלפי מטה כשבטנו הגחונית חשופה.

ריסון העכבר מגביל את תנועתו ומעביר את איברי הבטן לכיוון הסרעפת, ומונע נזק מקרי לאיברים במהלך החדרת המחט.

בסמוך לקו האמצע על פני בטן העכבר, ברבע הימני התחתון, אתר נקודה להחדרת מחט. אתר זה מונע את הסיכון לנקב את הקקום.

לאחר מכן, קח מזרק המכיל תרחיף תא בודד של תאי סרטן השחלות. הכנס את המחט בנקודה שנבחרה לעומק של כחצי סנטימטר כדי לחדור רק לדופן הבטן החיצונית. לבסוף, הזריק את תרחיף התאים הסרטניים לאט. זה מבטיח פיזור יעיל של תאים בתוך חלל הצפק.

החזר את העכבר לכלוב שלו ועקוב אחר צמיחת הגידול. הרקמות בתוך חלל הצפק עשויות לשחרר מולקולות כימוטקטיות ספציפיות המושכות את התאים הסרטניים מה שמוביל לנדידתם ולקולוניזציה, ובסופו של דבר תורם להתפתחות הגידול.

טען 500 מיקרוליטר של מתלה התא היחיד המתויג פלואורסצנטי לתוך המזרק. לאחר מכן, הכניסו את המזרק למחט סטרילית עם מכסה 25 כדי להפחית את גזירת התאים לפני ההזרקה. ריסון העכבר ביד השנייה, הרם את העכבר בצוואר והחזק את הזנב באמצעות כף היד והאצבע. לאחר מכן, קבע את הרגל האחורית השמאלית בין הטבעת לאצבע הקטנה. כדי למנוע טראומה של איברי הבטן, רסנו היטב את העכבר כך שלא יוכל לזוז במהלך ההזרקה.

דמיינו קו לרוחב הבטן, ואתרו נקודה בצד ימין של החיה וקרוב לקו האמצע. נקודת הכניסה היא גולגולת ומעט מדיאלית של הפטמה האחרונה. התכוננו להחדיר את המחט בצד ימין של העכבר כדי להימנע מהצקום ולהפחית את הסיכון לניקוב המעיים. הכנס את המחט באזור הצדדי התחתון של בטן העכבר לעומק של כ-0.5 סנטימטרים. משוך לאחור את הבוכנה כדי לוודא שהמחט לא חדרה לכלי דם או לאיברי צפק.

אם לא נשאב נוזל, הזריק את הדגימה בלחץ יציב איטי. לאחר מכן, משוך את המחט והחזיר את העכבר לכלוב שלו. אין לכסות את המזרק לפני השלכתו למיכל החדים.