בדיקת השתלת כרית שומן בשחלות: טכניקת In Vivo להחדרת תאים לכרית שומן בשחלות במודלים עכבריים
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:53 דק׳ • April 30th, 2023
השתלה מאפשרת השתלה של תאים או שברי רקמות באתרי גוף ספציפיים בבעל חיים מקבל. זה עוזר לנו לחקור את תפקיד המיקרו-סביבה בגידול ובגרורות.
כדי להתחיל, הכינו עכברה מורדמת מדוכאת חיסון במצב שכיבה. בצע חתך כירורגי במצב הגבי כדי לחשוף את דרכי הרבייה שלו. אתר את רפידות השומן בשחלות הממוקמות קרוב לשחלה ולצינור הביצית. בעזרת מחט חדה, בצע חתך באמצע כרית השומן מבלי לפגוע בשחלה.
לאחר מכן, הזרקו תרחיף צונן של תאי ניסוי מעורבבים עם מטריצת קרום מרתף מתאימה לתוך חתך כרית השומן. אפשר למטריצה להתמצק ולאבטח את התאים שבתוכה. הנח את כרית השומן השחלתי בחזרה לתוך הצפק ותפור את החתך. אפשר לעכבר להתאושש.
בהשתלה מוצלחת, כרית השומן מספקת מיקרו-סביבה מתאימה, המאפשרת את הרחבת התאים המוזרקים. בדוק את העכבר מדי שבוע כדי לצפות בצמיחה של תאים מושתלים על כרית השומן השחלתי.
לאחר הרדמת עכבר סינגני על פי פרוטוקול הטקסט, השתמש בקוצץ מספר 40 כדי לגלח אזור כפול מגודל אזור הניתוח. השתמש בפובידון יוד ואחריו 70% אתנול לביצוע שלושה קרצוף כירורגי. לאחר מכן, הזיזו את החיה מתחת למיקרוסקופ מנתח.
לאחר מכן, בעזרת אזמל, בצע חתך במיקום הגבי ישירות מעל כרית השומן השחלתי וחשוף את מערכת הרבייה. לאחר מכן, מכסים את האזור בווילון סטרילי. לאחר מכן, בעזרת מלקחיים קהים ועדינים, משוך את כרית השומן השחלתי בזהירות דרך החתך לכיוון קו האמצע, תוך מזעו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים