מהו דגימת תא יחיד?

דגימת תא יחיד היא טכניקה המשמשת לבידוד תאים בודדים מאוכלוסייה גדולה יותר לצורך ניתוח מפורט.

מדוע חשוב לבודד תאים בודדים?

בידוד תאים בודדים מאפשר לחוקרים לחקור את ההטרוגניות והמאפיינים הספציפיים של תאים בודדים בתוך אוכלוסייה.

איזה ציוד נדרש לטכניקה זו?

מיקרוסקופ המצויד במיקרומניפולטור וקצה מיקרוקפילרי הם חיוניים לבידוד תאים בודדים.

כיצד מאוחסנים התאים המבודדים?

בדרך כלל, תאים מבודדים מאוחסנים על קרח במאגר איסוף עד לניתוח נוסף.

אילו סוגי ניתוחים ניתן לבצע על תאים מבודדים?

תאים מבודדים יכולים לשמש לניתוחים גנומיים, פרוטאומיים ומולקולריים אחרים כדי להבין את תכונותיהם והתנהגותם.

דגימת תא בודד באמצעות מיקרומניפולציה: טכניקה לבידוד תאים בודדים מתרחיף תאים סרטניים

JoVE Encyclopedia of Experiments

Cancer Research

0 views • 2:10 min • April 30th, 2023

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דגימה של תא בודד מאפשרת לבודד תא חי בודד מתרחיף של תאים סרטניים לצורך ניתוח במורד הזרם.

התחל את הבידוד עם תרחיף תאים סרטניים. העבירו את הנפח הרצוי של מתלה זה על שקופית זכוכית. השאירו את המגלשה ללא הפרעה לזמן מה כדי להפחית את תנועת החלקיקים ולאפשר לתאים להתייצב.

כעת, העבירו את השקופית מתחת למיקרוסקופ המצויד במיקרומניפולטור המחובר לקצה מיקרו-נימי. מכשיר דיוק גבוה זה מאפשר אינטראקציה פיזית עם תאים בדגימה ברמה מיקרוסקופית.

כוונו את הקצה המיקרו-נימי קרוב לתא מטרה יחיד. על ידי הפעלת יניקה, אסוף את תא המטרה לתוך המיקרו-נימי. כעת, העבירו את המיקרו-נימי ישירות לתוך צינור המכיל את מאגר האיסוף הרצוי.

הוצא את התוכן המיקרו-נימי כדי לשחרר את התא הבודד שנלכד לתוך המאגר. אחסן את התא הבודד החי המבודד על קרח עד לניתוח נוסף.

לצורך מיקרומניפולציה, העבירו את כל 100 המיקרוליטרים של מתלה התאים על שקופית זכוכית. לאחר מכן, הנח את שקופית הזכוכית על מיקרוסקופ המצויד במיקרומניפולטור ואפשר לתאים להתיישב למשך 5 דקות. לאחר מכן, בצינורות PCR של 0.2 מיליליטר, פיפט 2 מיקרוליטר של ליזיס תאים מערבבים ומעבירים על קרח. השתמש במיקרומניפולטור כדי לאסוף תא בודד במיקרוליטר אחד של מי מלח 1X חוצץ פוספט.

לאחר מכן, העבירו את התא ישירות ל-2 מיקרוליטר של תערובת מאסטר ליזה של תאים. השתמש במיקרופוגה שולחנית כדי לסובב במהירות את הדגימות ב-2000 x גרם למשך 3 שניות כדי לאסוף את הנוזל בתחתית הצינור.