דגימת תא בודד באמצעות מיקרודיסקציה לכידת לייזר: טכניקה לקצירת תאי מטרה מאוכלוסיית תאים הטרוגנית

0 צפיות2:30 דק' • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מיקרו-דיסקציה של לכידת לייזר עוזרת להשיג תא מטרה בודד מתערובת תאים שהוכנה על שקופית זכוכית. התחל בלקיחת מגלשת זכוכית מתאימה המצופה בקרום חדיר UV ואינרטי ביוכימי על פני השטח שלו. חשוף את השקופית לאור UV כדי להפוך אותה להידרופילית יותר להיצמדות טובה יותר של התאים.

הרכיבו את השקופית למנגנון ציטוצנטריפוגה. הוסף תרחיף תאים ליציאת המשפך של המכשיר. ציטוצנטריפוגה כדי לאפשר לכוח הצנטריפוגלי להתרכז ולהפקיד שכבה אחת של תאים על שטח קטן על מגלשת הזכוכית. הניחו למגלשה להתייבש באוויר.

הנח את השקופית, עם צד הדגימה כלפי מעלה, מתחת למיקרוסקופ מיקרודיסקציה בלייזר. הגדר את האזור המקיף את התא המעניין. כעת, מקדו את קרן הלייזר כדי לנתח את האזור המכיל את תא המטרה יחד עם ציפוי הממברנה. לאחר מכן, בטל את המיקוד של קרן הלייזר ופולס אותה כדי ליצור לחץ. אנרגיה זו מזניקה את האזור המנותח לתוך המכסה ההפוך של צינור איסוף שהורכב מראש המכיל חיץ הממוקם מעל השקופית.

אחזר את הצינור וסגור את המכסה. סובב את הצינור כדי להביא את המאגר המכיל את תא המטרה היחיד לתחתית הצינור. מקררים את הצינור עד לניתוח נוסף.

עבור מירקודיסקציה בלייזר, ציטוצנטריפוגה את כל 300 המיקרוליטרים של תרחיף התאים על שקופית מצופה ממברנה ב-300 x גרם למשך 5 דקות. לאחר מכן, הנח את השקופית המצופה ממברנה על מיקרוסקופ המסוגל לבצע דיסקציה בלייזר. לאחר מכן, פיפט 4.5 מיקרוליטר של מאסטר ליזיס תאים מערבב לתוך המכסה של צינור ה-PCR בנפח 0.2 מיליליטר.

הנח את המכסה מעל הדגימה וקצור תא בודד על ידי מיקרו-דיסקציה בלייזר. מיד לאחר מכן, בדוק אם יש תאים מבודדים במכסה ה-PCR. הסר את צינור ה-PCR ממיקרוסקופ הלייזר מירקודיסקציה וסגור את הצינור. אוספים את כל הנוזלים בתחתית הצינור בסיבוב קצר.

07:01

בידוד RNA מן אוכלוסיות תאים ספציפיות באמצעות Microdissection לייזר ללכוד בשילוב עם ראפיד immunolabeling

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:04

פרוטוקול אל חלד באיכות גבוהה בידוד RNA של לייזר לכידת תאי Microdissected Purkinje המוח האנושי פוסט-מורטם הקטן

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:11

לכידת לייזר פרוטוקול מיקרודיסקציה התשואות באיכות גבוהה RNA מ-העכבר קפואים טרי-קפוא

סרטונים קשורים

0 צפיות

16:34

לייזר Microdissection לכידה של רקמות היונקים

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:53

מיקרודיסקציה בלייזר: טכניקה לבידוד תאי סרטן מעי גס פולשים ממודל תרבית אורגנוטיפית תלת-ממדית

סרטונים קשורים

0 צפיות

02:10

דגימת תא בודד באמצעות מיקרומניפולציה: טכניקה לבידוד תאים בודדים מתרחיף תאים סרטניים

סרטונים קשורים

0 צפיות

13:32

Microdissection לכידת ליזר אוכלוסיות מועשרות של הנוירונים או נוירונים יחידים לניתוח ביטוי גנים לאחר פגיעה מוחית טראומטית

סרטונים קשורים

0 צפיות

12:38

Microdissection לכידת לייזר של נוירונים מהתאים מובחנים Neuroprogenitor אדם בתרבות

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:29

Microdissection לכידת לייזר - הפגנה של הבידוד של פרט דופמין נוירונים ופינת הגחון tegmental השלם

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:12

הגברה עושר מראש ולא כל הגנום תא היעד עבור אפיון במורד הזרם תא בודד

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026