הזרקה תוך-ערמונית של תאים סרטניים: טכניקה להעברת תאים סרטניים לביסוס מודל עכבר אורתוטופי לסרטן הערמונית

הזרקת גידול אורתוטופית תוך ערמונית מספקת תאי גידול התואמים את היסטוטיפ רקמת הערמונית ישירות לבלוטת הערמונית של בעל החיים המקבל.

כדי להתחיל, הכינו עכבר זכר מורדם במצב שכיבה. בצע חתך בקו האמצע בבטן ונתח את השרירים הפנימיים כדי לחשוף את חלל הבטן. אתר את אחת מאונות הערמונית הקדמיות. אונות הערמונית הללו מחוברות לעקמומיות הנמוכה יותר של שלפוחיות הזרע ושוכבות קרוב לשלפוחית השתן.

כעת, הזריק תרחיף צונן של תאי סרטן הערמונית מעורבב עם מטריצת קרום הבסיס הרצויה לציר הארוך של אונת הערמונית הקדמית. הקפידו על אספקה מלאה של מתלה התא ומשכו בעדינות את המחט. אפשר למטריצה להתמצק ולהטמיע את התאים בתוכה.

לאחר מכן, הנח את אונת הערמונית יחד עם שלפוחית הזרע בחזרה לחלל הבטן. לתפור את החתך הניתוחי. אפשר לעכבר להתאושש. בדוק את העכבר מדי שבוע כדי לצפות בצמיחה של גידולים אורתוטופיים בתוך אונת הערמונית הקדמית.

לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, מרחו משחה על עיני העכבר וגלחו את כל הפרווה מבטן החיה. עקרו את העור החשוף בשלושה סבבים של קרצוף כירורגי באמצעות רפידות סטריליות שאינן נדבקות ואחריהם מגבוני אלכוהול סטריליים. כאשר העור יבש, הניחו את העכבר במצב שכיבה על משטח נקי מעל כרית חימום ישירות מתחת למטרה של מיקרוסקופ כירורגי נקי, וכסו את החיה בווילון סטרילי עם חור קטן שנחתך מעל הבטן.

בצע חתך של 1 סנטימטר בעור החיצוני ובשרירי הבטן הפנימיים לאורך קו האמצע של הבטן מעל הפין והבלוטות הקדם-פוטיאליות. אתר את אחת משלפוחיות הזרע הדו-צדדיות ואונות הערמונית הקדמיות המחוברות שהן בדרך כלל אחוריות, רוחביות ומעט עליונות על שלפוחית השתן. בקש מהעוזר לערבב את תמיסת תאי הסרטן Myc-CaP עם פיפטינג עדין ולשאוב לאט 30 מיקרוליטר של תאים למחט בגודל 28 המחוברת למזרק של 50 מיקרוליטר.

לאחר מכן, בעזרת מלקחיים של רקמת Graefe, הרם בעדינות את קצה שלפוחית הזרע כדי ליצור מתח על הרקמה מבלי לנקב את השלפוחית, והכנס בזהירות את שיפוע המחט במקביל לציר הארוך של אונת הערמונית הקדמית. הזרקו לאט את כל נפח התאים לתוך האונה, ואחריו נסיגה איטית של המחט כדי למנוע דליפה.

הזרקה מוצלחת תהיה ניכרת על ידי גודש באונה הפנימית של הערמונית. בזהירות ובהתמדה, שמור על שלפוחית הזרע ואונה הערמונית המוזרקת מחוץ לעכבר למשך כ-30 שניות כדי לאפשר למטריג'ל להתמצק חלקית בתוך האונה. השתמש באפליקטור סטרילי עם קצה פוליאסטר כדי לאסוף כל דליפת תמיסת תאים לבטן כדי למנוע התפתחות גידול שאינו אורתוטופי.

הזרקה מדויקת תוך ערמונית היא קריטית להתפתחות גידול אורתוטופי. הקפדה יתרה על הימנעות מניקוב שלפוחית הזרע, הזרקה איטית של תרחיף התאים הסרטניים ואיסוף כל דליפת תאים תגביר את הצלחת הליך זה.

כעת, החזר בעדינות את שלפוחית הזרע והאונה המוזרקת לבטן מבלי להפעיל לחץ על האונה והחלף רקמות חיצוניות. באמצעות תפרי מחט חיתוך הפוך נספגים 5-0 ויקריל, סגור את שרירי הבטן הפנימיים בתפרים רציפים, ולאחר מכן סגירה של עור הבטן החיצוני עם תפרים קטועים באמצעות תפרי מחט חיתוך הפוך 4-0 מונופילמנט ניילון שאינם נספגים.

לאחר מכן, יש לתת משככי כאבים לאחר הניתוח ולהניח את העכבר בכלוב ללא מצעים באמצע הדרך על כרית חימום עם ניטור עד להחלמה מלאה.

• Prostate Cancer Model - A lab representation to study the progression & treatment of prostate cancer.
• Intraprostatic Injection - Technique of injecting medication or solution directly into the prostate.
• Matrigel - A gelatinous protein matrix used in tumor cell research.
• Orthotopic Tumor Model - Study model wherein tumor cells are implanted in their original organ.
• Seminal Vesicles - Male reproductive glands located near the prostate, integral to the injection procedure.

• Introduce Prostate Cancer Model – Biological method to examine prostate cancer (e.g., intraprostatic injection).
• Key Concepts – Involve steps like shaving, sterilizing, incising and suturing (e.g., prostate biopsy procedure video).
• Underlying Mechanisms – Seminal vesicles and anterior prostate lobes are involved (e.g., prostate cancer real images).
• Connect to Experiment – Demonstrate how injections ensure successful tumor implantation within prostate.

• What is intraprostatic injection used for in a prostate cancer model?
• How is the matrigel cancer cell solution involved in the procedure?
• Why is careful handling of seminal vesicles and prostate lobes crucial in this experiment?

• Practical Applications – Used in surgical training and cancer treatment research (e.g., prostate cancer injection).
• Industry Impact – Benefits medical industries, particularly oncology and urology (e.g., injection for prostate cancer).
• Societal Importance – Advancement in prostate cancer treatment techniques (e.g., injection prostate).
• Link to Scientific Advancements – Continuous improvement of prostate cancer models for research.