אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:32 דק׳ • April 30th, 2023
ניתוח שלם מאפשר הדמיה של חתכי רקמה רב-ממדיים תוך שמירה על האינטראקציות המבניות בין התאים למיקרו-סביבה שלהם.
להכנת תושבות שלמות של המעי, התחל עם מעי עכבר טרי שנקטף. הסר את המזנטריה - קפלי רקמת הצפק - מהמעי. שטפו את המעי עם חיץ צונן כדי להסיר כל חומר צואה.
לאחר מכן, כרתו את הצקום. נתחו את המעי למקטעים שווים. בצע חתכים קטנים בקטעי המעי כדי לנקז את הנוזל שבתוכם.
הכנס בעדינות מוט נירוסטה רטוב למקטעי המעי. כעת, מקם את המוטות הללו בחריצי אחיזה בבסיס מכשיר חיתוך המעיים המותאם אישית. התקן את מכסה המכשיר מעל בסיסו.
בעזרת מוטות זוויתיים על המכסה כמדריך, חותכים לאורך את מקטעי המעי. הסר את המכסה מהמכשיר. הרטיבו את הקטעים. גלגל בעדינות את המוט הצידה כדי לשחרר ולפזר את הקטעים שטוחים.
טבלו את הקטעים באמבטיה המכילה קיבוע מתאים ודגרו למשך הזמן הרצוי. הקיבוע משמר כימית את מבנה התא וארכיטקטורת הרקמה לדגימה שלאחר מכן.
לאחר הקיבוע, אחסן את הרקמה באתנול עד לניתוח נוסף במורד הזרם.
הליך זה משתמש במכשיר המורכב מהבסיס שיש לו רצועות מוגבהות גבוהות בכל קצה עם חריצים ללקיחת המוטות והמכסה. לאחר קצירת המעי הדק והמעי הגס מעכבר בוגר, החזיקו את המזנטריה בעזרת מלקחיים מעוקלים ומשכו בעדינות את הרקמה הרחק מהמעי כדי להסיר אותה. הניחו קצה פיפטה מסוג גילסון, חתוך בקצה הרחב יותר, על מזרק פלסטיק המתאים ל-10 או 20 מיליליטר,
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים