הזרקה תוך ורידית של תאים סרטניים לתוך כלי הדם של קרום כוריואלנטואי עוף: הליך להקמת מודל סרטן קרום כוריואלנטואי לחקר פלישה לסרטן וגרורות

הממברנה הכוריואלנטואית של התרנגולת, או CAM, של ביצת תרנגולת מופרית היא הממברנה החוץ-עוברית הנתמכת על ידי רשת כלי דם עשירה. קרום כלי דם זה המצפה את קרום המעטפת הלא וסקולרי מקל על חילופי גזים וחומרים מזינים עם העובר המתפתח.

כדי ליצור מודל סרטן CAM במבחנה, התחל עם עובר עוף בר-קיימא, מופרה וללא קליפה הנושא CAM מפותח לחלוטין בצלחת.

לאחר מכן, הרכיבו את מנגנון ההזרקה המכיל צינור המחובר למזרק הנושא תרחיף חד-תאי של תאי סרטן מתמרים במאגר מקורר מתאים. חבר מחט זכוכית מותאמת אישית לצינור לאספקה ברמת דיוק גבוהה במהלך ההזרקה שלאחר מכן.

כעת, העבירו את העובר תחת מיקרוסקופ. זהה וריד מתאים קרוב לנקודת ההסתעפות על פני ה-CAM. הזרקו את תרחיף התאים הסרטניים לווריד שנבחר והבטיחו אספקה מלאה. משוך בעדינות את המחט. מכסים את העובר ודוגרים אותו בתנאים מתאימים.

כלי הדם הצפופים בתוך השכבה המזודרמלית מאכלסים את תאי הגידול המוזרקים, מה שמקל על היווצרות הגידול הראשוני. בסופו של דבר, חלק מהתאים הללו נודדים דרך כלי הדם ויוצאים, פולשים לסטרומה שמסביב, שם הם מתרבים ויוצרים מוקדים גרורתיים.

להזרקת IV, רכזו תאים ל-0.5 עד מיליון תאים למיליליטר באמצעות PBS 1x קר כקרח כדי לדלל או להשעות מחדש את התאים. צפו שיהיה צורך בכ-1 מיליליטר של תרחיף תאים לכל 10 עוברים. כדי להרכיב את מכשיר ההזרקה, הרכיב מחט על המזרק ולאחר מכן הארך את מ