חיסון תוך רירית של תאים סרטניים במודל מורין: הליך להקמת מודל אורתוטופי לסרטן הראש והצוואר

במהלך חיסון תוך רירי אורתוטופי, תאי גידול התואמים את היסטוטיפ הרקמה הרירית מועברים לרקמה הרירית של בעל חיים מקבל.

כדי להתחיל, רסנו עכבר מורדם בצווארו על משטח כירורגי לגישה קלה יותר לפיו.

הכן תרחיף של תאים סרטניים בעלי גרורות גבוהות במטריצת קרום מרתף מקורר במזרק. הטמפרטורה הנמוכה מונעת מהתרחיף להתמצק.

הזריק בזהירות את המתלה הזה ללחי הפנימית או לאזור הבוקאלי של העכבר. אזור הבוקאלי מרופד ברירית הבוקאלית, המוקפת ברשת של דם וכלי לימפה.

הקפידו על אספקה מלאה של תרחיף התאים הסרטניים ומשכו בעדינות את המחט. אפשר למטריצה להתמצק ולהטמיע את התאים בתוכה.

אפשר לעכבר להתאושש. תוך ימים מההזרקה מתפתח גידול ראשוני במקום ההזרקה. בסופו של דבר, התאים מגידול זה בעלי פוטנציאל גרורתי גבוה עשויים לעבור דרך מערכת הלימפה ולהתפשט לבלוטות הלימפה.

תאי סרטן אלה מסתגלים למיקרו-סביבה החדשה שלהם ומתרבים ומקימים מושבות גרורות בבלוטות הלימפה.

מיד לפני ההזרקה, ערבבו את התאים ביחס של 1 ל-1 בין תאי הגידול למטריצת קרום הבסיס על קרח. טען מזרק אחד של 0.5 מיליליטר המצויד במחט 23G עם 100 מיקרוליטר תאים לכל בעל חיים מקבל. הניחו את המזרקים על קרח, וודאו חוסר תגובה לצביטה בבוהן בעכבר מורדם.

לאחר מכן, הכנס את המחט לאזור הבוקאלי הימני או השמאלי דרך החלל הפתוח הפנוי משני צידי הפה, תוך שמירה על המזרק מקביל לאזור הבוקאלי בזמן שהוא נמצא בתוך חלל הפה, כדי להקל על הזרקת הנפח המלא של 100 מיקרוליטר של תרחיף מטריצת קרום מרתף התא לאורך תקופה של 5 שניות. שמור את המזרק במקומו למשך 5 שניות נוספות כדי לוודא שכל החומר הוזרק לפני הוצאת המזרק בעדינות. הגידולים יתגלו באופן גס בעוד כשבוע.