אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:03 דק׳ • April 30th, 2023
בסוגי סרטן מסוימים ששולחים גרורות, תאי הגידול מתרחקים ממקום המוצא וחודרים לרקמות העצב, תופעה הנקראת פלישה פרי-עצבית או PNI.
ניתן להדגים PNI בביצית על פני הממברנה הכוריואלנטואית או CAM, המחקה את קרום הבסיס של רקמת האפיתל האנושית.
כדי להתחיל, קח ביצת עוף מופרית בת קיימא עם קליפתה פתוחה חלקית, וחושף CAM מפותח לחלוטין.
לאחר מכן, בודדו את גרעיני השורש הגבי או DRG מחוט השדרה של העכבר. DRG הוא מקבץ של נוירונים חושיים שבאמצעותם תאי הסרטן פולשים למרחב הפרי-עצבי.
דגרו את ה-DRG במדיום מתאים עם צבע פלואורסצנטי כדי לתייג אותם להדמיה קלה. כעת, העבירו את ה-DRG על משטח ה-CAM מבלי לקרוע את הממברנה.
מכסים את הביצה בסרט שקוף למניעת זיהום מיקרוביאלי. לאחר מכן, דגרו את הביצה כדי להקל על שילוב DRG ב-CAM.
לאחר הדגירה, זרעו את התאים הסרטניים המסומנים פלואורסצנטית על משטח יבש של CAM, הרחק מה-DRG. המשטח היבש ממזער את התפשטות התאים הסרטניים ומאפשר היווצרות גידול קבוע.
אטמו את פתח קליפת הביצה ודגרו אותו כדי לאפשר אינטראקציה בין תאי DRG לסרטן. תחת המיקרוסקופ ניתן לראות את התאים הסרטניים גדלים לעבר ה-DRG המושתל, מה שמדגים PNI.
להשתלת גנגליון שורש גבי על הממברנה הכוריו-אלנטואית, השתמש במלקחיים עדינים וסטריליים כדי לתפוס בזהירות גנגליון אחד בכלי התרבית ולשטוף בעדינות את הרקמה במיכל HBSS טרי. הניחו את הגנגליון על
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים