JoVE Encyclopedia of Experiments
מחקר סרטן
0 צפיות • 2:24 דק' • April 30th, 2023
הממברנה הכוריו-אלנטואית או CAM היא קרום חוץ-עוברי, הנצמד היטב לקרום הקליפה הפנימי של ביצית שלמה. CAM היא מערכת אידיאלית להשתלת גידולים ומידול מכיוון שהיא קרום חסר חיסון באופן טבעי וכלי דם גבוהים.
כדי לקצור CAM נושא גידול, ראשית, קח ביצת תרנגולת מופרית בת קיימא עם CAM מפותח לחלוטין שהושתל בעבר עם גידול. הוסף פרפורמלדהיד ל-CAM. פרפורמלדהיד מקשר את חלבוני הממברנה, מה שהופך את הממברנה לקשיחה יותר כדי להקל על קצירתו.
לאחר מכן, חותכים סביב הביצה כדי להפריד את החלק העליון של קליפת הביצה משאר הביצה, כאשר ה-CAM הנושא את הגידול עדיין מחובר לקליפה שהוסרה. החזק והרם את ה-CAM בקצה אחד כדי לנתק אותו בצורה חלקה מקליפת הביצה.
לאחר מכן, הנח את ה-CAM שנקטף בפרפורמלדהיד כששתל הגידול פונה כלפי מעלה. פרפורמלדהיד משמר את המורפולוגיה של ה-CAM ושתל הגידול, ובכך מכין את הממברנה שנקטפה לניתוחים שונים במורד הזרם.
בתום הדגירה, הניחו את הביצים על שולחן המעבדה. השתמש במזרק כדי לנקב את רוטב הסרט של כל ביצה ומרח כ -300 מיקרוליטר של 4% פרפורמלדהיד על כל קרום כוריואלנטואי כדי להקשיח מעט את הרקמה כדי להקל על תהליך הקציר.
בעזרת מספריים, הסר את החצי העליון של קליפת הביצה כשהממברנה הכוריו-אלנטואית מחוברת. צמצם את גודל הקליפה לקוטר של כ-3 סנטימטרים, תוך שמירה על החלק של הממברנה הכוריו-אלנטואית שבה הושתלו גנגליון שורש גבי ותאי גידול במרכז שבר הקליפה. לאחר מכן, אחוז בקרום הכוריו-אלנטואי בעזרת מלקחיים עדינים ונתק את הרקמה מקליפת הביצה להעברה לבאר אחת של צלחת בת 6 בארות המכילה 2 מיליליטר של 4% פרפורמלדהיד לבאר.