מידול טיפול תוך גידולי עם מעכבי miRNA: שיטה לניתוח ההשפעה של מעכבי miRNA על צמיחת הגידול במודל Murine
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:00 דק׳ • April 30th, 2023
מעכבי miRNA הם מולקולות RNA חד-גדיליות קטנות שעברו שינוי כימי הנקשרות ל-miRNA אנדוגני ומדכאות את פעילותו.
כדי למדל את ההשפעה של טיפול תוך-גידולי באמצעות מעכבי miRNA, התחל בנטילת תרחיף של תאים סרטניים המתויגים באנזים ביולוגי. הוסף מטריצת קרום בסיס נוזלית לתרחיף התאים הסרטניים.
טען את התערובת המתקבלת למזרק. הזריק אותו תת עורי לאגף השמאלי של עכבר עירום חסר חיסון. אפשר לתאי הסרטן לגדול וליצור גידול.
במקביל, הכינו תערובת טיפולית על ידי הוספת ננו-חלקיקי שומן - חומר אספקה in-vivo - לשפופרת המכילה תמיסת מעכב miRNA. דגירה של תערובת הטיפול כדי לאפשר אנקפסולציה של מעכבי miRNA לתוך ננו-חלקיקי השומנים.
להזריק את תערובת הטיפול ישירות לתוך הגידול. ננו-חלקיקי שומנים מספקים מעכבי miRNA בתוך תא הגידול. ברגע שנכנסים פנימה, מעכבי miRNA נקשרים ל-miRNA אונקוגניים ספציפיים, ומונעים מהם להכלאה ל-mRNA היעד שלהם. זה מוביל למוות של תאים סרטניים.
לבסוף, הזרקו תמיסת מצע ביולומינסנט תת עורית לעכבר. בנוכחות אנזימי ביולומינסנציה, המצע בתאי הסרטן מתחמצן עם פליטת האור שלאחר מכן.
דמיין את העכבר באמצעות תא הדמיה ביולומינסנציה. מעכבי miRNA המוזרקים תוך גידול מדכאים משמעותית את צמיחת הגידול בעכבר.
לאחר הקמת קו תאי סרטן בלוטת התריס האנושי Cal62 במדיום שלם, השעו 1 כפול 10 עד לתא השישי ב-50 מיקרוליטר PBS ב-4 מעלות צלזיוס
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים