JoVE Encyclopedia of Experiments
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:02 דק' • April 30th, 2023
חיסון אורתוטופי מקל על העברת תאים סרטניים לבעל חיים מקבל באיבר או באתר התואם את היסטוטיפ הרקמה. כדי להתחיל, הכינו עכבר עירום מורדם מדוכא חיסון במצב שכיבה.
לאחר מכן, בצע חתך כירורגי באזור הצוואר כדי לחשוף את בלוטות הרוק. עקור את בלוטות הרוק ונתח את שרירי הרצועה כדי לחשוף את קנה הנשימה ובלוטת התריס הבסיסיים.
בלוטת התריס, בלוטה אנדוקרינית, מורכבת משתי אונות השוכנות משני צידי קנה הנשימה ומקיפות את הסחוס הקריקואידי. שתי האונות הללו מחוברות על ידי רצועה דקה של רקמת בלוטת התריס הנקראת איסטמוס.
כעת, הכינו תרחיף של תאי סרטן בלוטת התריס עם חיץ מתאים במזרק. הזרקו בזהירות את תרחיף התאים לאונה של בלוטת התריס של העכבר.
לאחר מכן, מקם מחדש את בלוטות הרוק ותפור את החתך. אפשר לעכבר להתאושש. עקוב אחר העכבר מדי שבוע כדי לצפות בצמיחה של גידולים אורתוטופיים בתוך אונת בלוטת התריס.
לחיסון תאי גידול אורתוטופי של בלוטת התריס, השעו אליקוט של תאי Cal62 ב-5 מיקרוליטר של PBS, והזריקו תת עורית 100 מיקרוליטר של משכך כאבים ו-100 מיקרוליטר אנטיביוטיקה לעכבר עירום BALB/c בן 7 שבועות. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, הניחו את החיה תחת מיקרוסקופ מנתח וחטאו את צוואר החיה ביודופובידון.
לאחר מכן, בצע חתך של כ-2 סנטימטרים בעור ועקר את בלוטות הרוק כדי לחשוף את הצוואר. השתמש במלקחיים ו/או במספריים כדי לנתח את שרירי הרצועה כדי לחשוף את קנה הנשימה ובלוטת התריס, והשתמש במזרק של 10 מיקרוליטר כדי להזריק את נפח 5 המיקרוליטר של תאי הגידול לאונה הימנית של בלוטת התריס, הממוקמת בצד הסחוס הקריקואידי.
לאחר שכל התאים נמסרו, מקם מחדש את בלוטות הרוק והשתמש בתפרים קלועים במשי, מצופים ובלתי נספגים כדי לסגור את החתך. לאחר מכן, מרחו יודופובידון על אזור הפצע והניחו את העכבר על שמיכה תרמית עם ניטור עד להחלמה מלאה.