אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:51 דק׳ • April 30th, 2023
המטריצה החוץ-תאית או ECM - המרכיב הלא תאי של סביבת הרקמה - מורכבת מרשת מורכבת של חלבונים מבניים ורגולטוריים ופוליסכרידים המופרשים על ידי תאים. ה-ECM מספק תמיכה מבנית וביוכימית לתאים ומווסת את צמיחתם.
כדי להכין את המטריצה החוץ-תאית של הלשון, התחל בלקיחת לשון עכבר שזה עתה נקטפה. שטפו אותו באתנול כדי להסיר את שכבת השומנים שלו.
לאחר מכן, הכניסו אותו למחזורי הקפאה והפשרה לסירוגין. הקפאה מקדמת היווצרות גבישי קרח תוך תאיים, בעוד שהפשרה ממיסה את גבישי הקרח, וכתוצאה מכך משבשת את קרום התא.
כעת, השעו את הלשון בתמיסה אנטיביוטית כדי לעכב צמיחת חיידקים. לאחר מכן, טפל באיבר בתמיסת מלח היפרטונית. בנוכחות ריכוז מומס גבוה, מים זורמים החוצה מהתאים וגורמים להם להתכווץ. שלב זה מסייע במוות תאי ובניתוק מהמטריצה החוץ-תאית.
דגירה על הלשון בחומר פעילי שטח לא יוני. חומר פעילי השטח מסיס לחלוטין את הממברנות התאיות והגרעיניות, ומקל על שחרור תוכן תוך תאי לתמיסה.
לבסוף, השעו את הלשון בתמיסה המכילה יוני סידן ומגנזיום, ולאחר מכן טיפול בנוקלאזות. יוני הסידן והמגנזיום משפרים את פעילותם של נוקלאזות כדי לפרק כל חומצות גרעין חופשיות בתמיסה.
אחסן את רקמת הלשון נטולת התאים במאגר מתאים עד לעיבוד נוסף.
לאחר בידוד הלשונות מעכברים שהומתו על פי פרוטוקול הטקסט, טבלו את הרקמה באתנול 75% למשך 3 דקות. לאחר מכן, העבירו כל לשון לצינ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים