גידול סליספרות מרקמת בלוטת הרוק: שיטה לפיתוח סליספרות מתאי אפיתל שמקורם בבלוטת הרוק האנושית

סליספרות הן במבחנה, תרביות צבירה עצמית של תאי אפיתל שמקורם בבלוטת הרוק. כדי לתרבית סליספרות, התחל בלקיחת רקמת בלוטת הרוק האנושית בצלחת תרבית.

בעזרת מספריים טוחנים את הרקמה לחתיכות עדינות. לאחר מכן, השלימו את החתיכות הללו בתמיסת דיסוציאציה המכילה קולגנאז ואנזימי דיספאז ודגרו. אנזימים אלה מעכלים את המטריצה החוץ-תאית הקיימת ברקמה.

יתר על כן, טריטוראט כדי להומוגניזציה של הרקמה. שלב זה משחרר את תאי האפיתל וה-RBCs לתמיסה. לאחר מכן, השתמש במסננת תאים וסנן את הרקמה ההומוגנית לצינור חרוטי טרי כדי להסיר חתיכות רקמה ופסולת לא מעוכלת. צנטריפוגה לכדור התאים.

לאחר צנטריפוגה, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את כדור התא במאגר הליזיס של RBC. מאגר זה קורע RBCs הקיימים בתרחיף התא.

עכשיו, צנטריפוגה לכדור תאי האפיתל. השעו מחדש את הגלולה למצע גידול תאי אפיתל מתאים. בנוסף, הכינו את צלחת תרבית הסליספרה על ידי ציפוי הבאר שלה במטריצת קרום מרתף נוזלית או BMM. דגירה כדי לאפשר למטריצה להתמצק.

לבסוף, הוסף את תרחיף תאי האפיתל לבארות המצופות BMM. בנוכחות מצע גידול, תאי אפיתל נצמדים לשכבת ה-BMM ומתרבים לסליספרות כדוריות.

תוך שעתיים עד ארבע שעות לאחר ההוצאה מהמטופל, על צלחת תרבית, השתמש במספריים מעוקרים ומלקחיים כירורגיים כדי לטחון את רקמת בלוטת הרוק לחתיכות עדינות בגודל של 1 עד 2 מילימטרים. הוסף 6 מיליליטר מתמיסת ה