חתך ויברטומי של כליה מורין שלמה: טכניקה ליצירת חלקים דקים של כליה מורין

כדי להכין חלקים דקים של כליית עכבר, ראשית, השג כליית עכבר שזה עתה נקטפה. העבירו את הכליה על נייר סינון וייבשו אותה כדי להבטיח הידבקות אופטימלית למחזיק דגימת הוויברטום.

לאחר מכן, הרכיבו את הכליה, צד השופכן כלפי מטה, באמצעות שכבה דקה של דבק ציאנואקרילט המונח על בסיס מחזיק דגימת הוויברטום, ואבטח את הכליה במצב זקוף. העבר את מחזיק הדגימה למגש חיץ.

מלאו את המגש במאגר מתאים לטבילה מלאה של המשטח העליון של הכליה. אמבט קרח מקיף את המגש כדי למנוע נזק לרקמות מהצטברות חום במהלך החיתוך. הגדר את להב הרטט לזווית, מהירות ומשרעת מתאימים. התאם את פרמטר העובי כדי לקבל קטעי רקמה בעובי הרצוי.

במהלך הפעולה, הלהב רוטט לרוחב ומתקדם, חודר דרך דגימת הרקמה. הלהב הרוטט מאפשר חיתוך בפחות לחץ וממזער את עיוות הרקמה, ויוצר קטעי רקמת כליה אחידים מעניינים תוך שמירה על מורפולוגיה של הרקמה.

בינתיים, הרכיבו צלחת מרובת בארות המכילה תמיסת חיץ צוננת מתאימה כדי לחקות את התנאים הפיזיולוגיים של הרקמה. כעת, העבירו את חלקי הרקמה החתוכים לתוך המאגר. לבסוף, אחסן את חלקי הרקמה בטמפרטורה נמוכה עד לניתוח נוסף במורד הזרם.

השתמש במלקחיים קהים כדי לתפוס בעדינות ולהסיר את הכליה המוכנה מתמיסת KRB קרה כקרח. הניחו מיד את הכליה על נייר סופג למשך כ-2 עד 4 שניות כדי להסיר עודף לחות חיצונית. גלגלו בעדינות את הכליה על פני הנייר הסופג כדי לוודא שכל צידי הפרנכימה התייבשו כך שתהיה הידבקות אופטימלית של הכליה לשלב הוויברטום.

מרחו מיד שכבה דקה של דבק ציאנואקרילט על בסיס צלחת הדגימה של הוויברטום והשתמשו במלקחיים קהים כדי להניח את הכליה, צד השופכן כלפי מטה, על האזור המכוסה בדבק. הפעל בעדינות לחץ כלפי מטה על החלק העליון של הכליה עם הקצה השטוח של המלקחיים למשך כ-10 עד 20 שניות כדי לייבש את הדבק.

אבטח היטב את לוחית הדגימה לתחתית מגש החיץ והתאם את רמת תמיסת ה-KRB כך שהחלק העליון של הכליה יהיה שקוע במלואו. לחיתוך ויברטום אוטומטי, בחר את מיקומי ההתחלה והסיום של מחזור חיתוך להב הרטט, במרחק של 0.5 עד 1 סנטימטר מהכליה, כדי להבטיח שכל מישור הכליה נחתך.

התחל את תהליך החיתוך האוטומטי, וודא שהלהב יוצר מגע עם הכליה. בעזרת מלקחיים אוספים חלקים המשתחררים מהכליה ומעבירים אותם מיד לבארות בודדות.