דגימת מיקרו-מיצוי בשלב מוצק: טכניקה מבוססת בדיקה לחילוץ דגימות מרקמות השתל

אחסון לטווח ארוך של שתל איברים משפיע על הפרופיל המטבולי שלו, המהווה אינדיקטור לתפקוד האיברים ולדחיית איברים בשלב מוקדם.

כדי לבודד את המטבוליטים הללו, התחל בנטילת מיקרו-מיצוי דק בשלב מוצק או בדיקת SPME המצופה בחומר סופג תואם ביולוגית. טבלו את הגשושית בתמיסת ניקוי הידרו-אלכוהולית כדי להרטיב את הספיגה המצופה ולשחרר את כל הזיהומים הקשורים.

מערבב את הגשושית כדי להסיר את הזיהומים. לאחר מכן, הנח את הגשושית בתמיסת הפעלה וערבב שוב. כימיקלים בתמיסת ההפעלה משנים את פני הבדיקה, ומשפרים את פוטנציאל הספיחה שלו. שוטפים את הגשושית במים ומעקרים אותה כדי להסיר מזהמים מיקרוביאליים.

כעת, הכנס את הגשושית הסטרילית והמופעלת לשתל האיבר כך שמטריצת הרקמות תכסה את כל פני השטח הסופגים. החומר הסופג מושך מטבוליטים קוטביים ולא קוטביים חופשיים מהשתל, ומאפשר ספיחה על פני השטח שלו. משוך את הגשושית ושטוף אותה במים כדי להסיר כל רקמה שנותרה.

לאחר מכן, הנח את הגשושית בתמיסת ספיגה, המקיימת אינטראקציה עם המטבוליטים הנספגים. לערבב את הגשושית כדי להפריד ולהמיס את המטבוליטים שנלכדו לתמיסת הספיגה. לבסוף, הסר את הגשושית ועבד את תערובת המטבוליטים המתקבלת לניתוח שלאחר מכן.

התחל בהכנת תערובת מיזוג מוקדם המורכבת מ-1 עד 1 מתנול ומים. הכניסו 1 מיליליטר מהתמיסה לכל בקבוקון זכוכית של 2 מיליליטר והניחו בדיקה אחת בכל בקבוקון. ערבב את ה