בידוד גלומרולי: טכניקה להשגת גלומרולי שלם מכליה מורין

בכליות של בעלי חוליות, הנפרונים מורכבים ממספר גלומרולי - רשת צפופה של כלי דם - הממלאים תפקיד עיקרי בסינון פסולת מהגוף.

כדי לבודד גלומרולי, התחל בלקיחת כליית עכבר שזה עתה נותחה. השתמש במלקחיים כדי לקלף את קפסולת הכליה מהכליה ולהניח את הכליה הנקייה בצלחת תרבית חדשה. כעת, הניחו את הצלחת על קרח כדי למנוע הידרדרות בכליות. טוחנים את הכליה לחתיכות קטנות.

לאחר מכן, השעו מחדש את חתיכות הכליה הטחונות בתמיסת חיץ מתאימה. מסננים את תרחיף הרקמות דרך מסנן רשת גדול ואוספים את הזרימה בצלחת טרייה. חזור על שלב זה עוד כמה פעמים תוך הקטנת גודל הרשת בהדרגה בכל פעם, עד שהגלומרולי מתנתקים משברי הכליות.

לבסוף, שטפו את המסנן עם אמצעי התרבות הרצוי כדי לאסוף את הגלומרולים הכלואים הקטנים יותר בזמן ששברי הכליות נשארים בסינון. העבירו את הגלומרולי לצלחת חיבור נמוכה במיוחד. דמיין את הצלחת באמצעות מיקרוסקופ אור הפוך.

בעזרת מיקרופיפטה, לכוד גלומרולוס בודד והעביר אותו לבאר טרייה. השלימו את הבאר עם אמצעי תרבית והשתמשו בגלומרולוס המבודד לניתוח נוסף.

לאחר שחרור הכליות כמתואר בכתב היד, החזק את הכליה עם מלקחיים כירורגיים והשתמש בזוג מלקחיים נוסף כדי לשלוף את קפסולות הכליה. לאחר מכן, הכניסו את הכליות לבארות של צלחת תרבית בת 6 בארות שכל אחת מהן מכילה 2 מיליליטר HBSS והניחו את צלחת התרבות על קרח.

לאחר מכן, העבירו את הכליות ל