חומצה תקופתית Schiff או PAS צביעה: שיטה להעריך את העיוותים המבניים של glomerulus

הגלומרולוס היא רשת מורכבת של נימים בתוך הכליה המסננת פסולת ומסירה נוזלים מיותרים מהדם. קצב הסינון הכלייתי תלוי במבנה מיוחד זה, אותו ניתן לבחון באמצעות צבע חומצה תקופתית שיף או PAS.

כדי להתחיל, קח קטע קליפת כליה פרפינית על שקופית זכוכית. טפל בשקופית עם קסילן. מולקולות קסילן ממיסות את שעוות הפרפין מקטע הרקמה. לאחר מכן, חשוף את הדגימה לירידה בריכוזי האלכוהול. אלכוהול מסיר עקבות של קסילן תוך החזרת לחות לחלק הרקמה לקשירה לאחר מכן של הכתם.

כעת, הוסף חומצה תקופתית לדגימה. חומצה תקופתית ממירה את הדיולים הקיימים ברקמות הפוליסכרידים, כגון גליקוגן או מוצין, לאלדהידים. אלדהידים אלה מגיבים עם המגיב של שיף, שילוב של פוקסין-חומצה גופרתית, ויוצרים צבע בצבע מג'נטה שמכתים את קטע הרקמה. שטפו את השקופית כדי להסיר כתמים עודפים.

לאחר השטיפה, הוסיפו ברזל-המטוקסילין, כתם נגד גרעיני שנקשר ל-DNA וצובע אותו בסגול. שטפו כדי להסיר כתמים עודפים. לבסוף, יש לייבש את הדגימה בעוצמות הולכות וגדלות של אלכוהול ואחריו קסילן, המשמש כחומר ניקוי. שלב זה מסייע בשיפור הניגודיות של קטע הרקמה לבדיקה מיקרוסקופית.

ניתן לדמיין מחלה גלומרולרית כעיבוי של קרום הבסיס, נימים משתנים ותאים חריגים הקשורים לתפקוד כליות לקוי.

להדמיה מפורטת של התאים הגלומרולרים והמטריצה המזנגיאלית, יבש את דגימות קליפת הכליה הקבועות המשובצות בפרפין ב-37 מעלות צלזיוס למשך שעה, ולאחר מכן דה-פרפיניזציה עם טבילות קסילן ואתנול יורדות. הרטיבו את הדגימות במים מזוקקים למשך 5 דקות ודגרו את השקופיות בתמיסת חומצה תקופתית בארון אדים.

לאחר 5 דקות, שטפו את השקופיות בשלוש שטיפות של 5 דקות ב-100 מיליליטר מים מזוקקים, ולאחר מכן דגירה של 15 דקות במגיב של שיף. בתום הדגירה יש לשטוף את המגלשות במי ברז זורמים למשך 5 דקות ולצבוע עם המטוקסילין למשך 3 שניות לפני שטיפה יסודית במי ברז זורמים למשך 15 דקות נוספות.

לאחר מכן, ייבשו את המגלשות עם טבילות אתנול עולות ושתי טבילות קסילן רצופות של 3 דקות. לאחר ייבוש האוויר, ניתן להרכיב את השקופיות עם אמצעי הרכבה מבוסס קסילן להערכת המבנה הגלומרולרי שלהן במיקרוסקופ אור בהגדלה של פי 400.

• Periodic Acid Schiff Stain - Method used to visualize glomerular cells and the mesangial matrix.
• PAS Stain Glomerulus - Specific application of PAS stain in kidney cortex study.
• Acid Schiff Staining - Another name for the PAS staining process.
• Periodic Acid Structure - Part of PAS stain, involved in revealing cellular structure in staining.
• Glomerular Tuft - Structure in kidney cortex, analyzed using PAS stain.

• Periodic Acid Schiff Stain - Define and contextualize (e.g., periodic acid schiff stain).
• Key Concepts - Summarize principles (e.g., staining theory).
• Underlying Mechanisms - Short description of PAS staining process.
• Connect to Experiment - Brief rationale linking periodic acid and schiff reagent to kidney cortex sample study.

• What is the Periodic Acid Schiff Stain method and how it contributes to kidney cortex research?
• How does the PAS staining process work?
• What is the role of the Glomerular Tuft in PAS staining?

• Describe Practical Applications - PAS stain used for analyzing kidney structures (e.g., medical diagnosis).
• Industry Impact - Benefits healthcare, particularly nephrology.
• Societal Importance - Enables better understanding of kidney diseases (e.g., education).
• Link to Scientific Advancements - Short description of innovations in staining techniques.