אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:49 דק׳ • April 30th, 2023
השתלת תאי קרצינומה של תאי כליה, או RCC, מעכבר תורם לכליה של עכבר מושתל מדוכא חיסון מובילה לפיתוח מודל RCC אורתוטופי.
כדי לפתח מודל RCC אורתוטופי, התחל בהנחת עכבר חסר חיסון מורדם במצב שכיבה על לוח דיסקציה. כעת, השתמש באזמל כדי לבצע חתך כירורגי בצד שמאל של העכבר, תוך שמירה על הצפק הבסיסי שלם.
מיששו את העכבר על ידי הפעלת לחץ עדין מלמטה. שלב זה עוזר לדמיין את הכליה דרך הצפק השקוף. לאחר מכן, קח מזרק המכיל תרחיף תאי RCC במדיום מתאים. בעזרת מחט הזריקו את תרחיף התאים לכליה מבלי לפגוע בצפק.
משוך את המחט ואטום את מקום החתך באמצעות דבק רקמות. אפשר לעכבר להתאושש ולעקוב אחר צמיחת הגידול במרווחי זמן רצויים. בתחילה, תאי סרטן הכליה המוזרקים מושתלים בכליה. תאים אלה מתרבים לאחר מכן ויוצרים גידולים.
לאחר מכן, כמה תאים עשויים להתנתק מהגידול הראשוני ולהתפשט בתוך חלל הצפק. תאי גידול נודדים אלה יכולים לפלוש לרקמת הריאה ולשלוח גרורות ליצירת גידולים משניים.
כדי להכין את תאי הגידול של Renca, ראשית, יש לחבר את תרבית התאים עם 0.25% טריפסין ב-HBSS לאחר שטיפה עם PBS. נטרל את התגובה לאחר 5 דקות עם מדיום RPMI מלא. העבירו את התאים לצינור חרוטי לצנטריפוגה והשעו מחדש את הגלולה ב-HBSS טרי.
לאחר הספירה, התאם את הנפח ל-2 כפול 10 עד שישי תאים לריכוז מיליליטר ב-HBSS, ושאב את התאים למזרק של 1 מיליליטר המצויד במחט בגודל 18
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים