מיקרו-הזרקה תוך ורידית של נפרוטוקסינים לעובר דג זברה: טכניקה להעברת חומרים נפרוטוקסיים לזרם הדם של עובר דג זברה

מיקרו-הזרקה תוך ורידית מקלה על העברת מולקולות מעניינות לזרם הדם של בעל חיים מקבל. כדי להעביר נפרוטוקסינים לעובר דג זברה, ראשית, הכינו ריכוז מתאים של תמיסת נפרוטוקסין רצויה.

בעזרת קצה טעינת ג'ל עדין, טען את תמיסת הנפרוטוקסין הזו למחט מיקרו-הזרקה עם קצה זוויתי מחודד. השעו את המחט אנכית כדי לאפשר לתמיסת הנפרוטוקסין למלא את קצה המחט על ידי כוח הכבידה. כעת, אבטח את מחט המיקרו-הזרקה הטעונה למחזיק של מיקרומניפולטור.

לאחר מכן, העבירו עובר דג זברה מורדם לתבנית המיקרו-הזרקה טרומית. יישר את העובר בתבנית כשראשו מכוון בתוך הבאר והזנב החוצה מהבאר, ומשפר את הנגישות לזנב לצורך מיקרו-הזרקה. לאחר מכן, מקם במדויק את קצה המחט ליד העובר.

הזרקו את תמיסת הנפרוטוקסין לווריד הזנב של העובר. החומרים הנפרוטוקסיים המוזרקים מתפשטים במחזור הדם ומגיעים לאיברים מרוחקים כמו הכליה. משוך בעדינות את המחט. העבירו את העובר לכלי טרי המכיל מדיה עוברית ואפשרו לו להתאושש. דגירה על העובר למשך זמן מסוים.

תוך שעות מההזרקה, הנפרוטוקסינים מצטברים בכליה וגורמים לנזק, מה שמוביל לירידה בתפקוד הכליות.

ביום ההזרקה, הכינו את תמיסת הנפרוטוקסין הרצויה עם בקרת הרכב המתאימה. מערבולת או מערבבים אותו בעדינות. לאחר מכן, בדוק את דפנות הצינור ואת החלק העליון של עמוד המים כדי לוודא שהתרופות מומסות בתמיסה.

טען מחט מיקרו-הזרקה גזומה עם 2 עד 3 מיק