שאיפת נוזל מגלומרולי עכבר: שיטה לשאיפת נוזל גלומרולרי מעכבר באמצעות מיקרופונקטורה בתיווך שני פוטונים
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 6:43 דק׳ • April 30th, 2023
בכליה, הגלומרולוס - צרור של כלי דם קטנים הסגורים בקפסולה של באומן - יוזם סינון דם ומוציא את נוזל הפסולת לחלל של באומן שמסביב. חקירת תכולת הנוזל הגלומרולרי מסייעת בהבנת הפיזיולוגיה של הכליות.
כדי לשאוב את הנוזל הגלומרולרי, הכינו עכבר מורדם עם הכליה שלו בניתוח. כעת, הזריקו צבע פלואורסצנטי-דקסטרן לכלי הדם שמאחורי מסלול העין של העכבר. מולקולות פלואורסצנטיות-דקסטרניות נעות בזרם הדם ומגיעות לכליה.
בשל משקלו המולקולרי הגבוה של הדקסטרן, הצבע הפלואורסצנטי נשמר בתוך הגלומרולוס, ומעניק לו צבע ירוק. תחת מיקרוסקופ דו-פוטוני, המאפשר הדמיה של מבנים יושבים עמוק, אתר גלומרולוס מתאים כדי לקבל גישה נאותה לנוזל הגלומרולרי.
לאחר מכן, יישר קצה מיקרופיפטה מצופה ננו-חלקיקים פלואורסצנטי אדום עם הציר הצדדי של הכליה. בעזרת מיקרומניפולטור, קדם את קצה הפיפטה כדי לחדור לכליה. כאשר הקצה מגיע לגלומרולוס המטרה, הגדר את קצב השאיפה הרצוי כדי לשאוב את הנוזל הגלומרולרי מהחלל של באומן.
היעדר פלואורסצנטיות ירוקה בתוך קצה הפיפטה האדומה מעיד על חוסר דימום ומאשר שאיבת נוזל גלומרולרי מוצלחת. לאחר מכן, החזר את הפיפטה ואחסן את הנוזל במאגר מתאים להמשך ניתוח.
לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, מרחו משחה על העיניים והשתמשו בנייר דבק כדי לשתק את הגפיים של עכבר בוגר במשקל 20 עד 25 גרם. השתמש בקרם אפילציה כדי להסיר את כל השיער בצד
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים