אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:44 דק׳ • April 30th, 2023
קרום כוריואלנטואי עוף, או CAM, הוא שכבה בעלת כלי דם גבוהים וחסרי חיסון באופן טבעי הקיימת מתחת לקליפת הביצה. CAM משמש כמודל אידיאלי ל-xenografting - העברה הטרולוגית של רקמה מאורגניזם תורם לנמען של מין אחר.
כדי לבצע תרבית אורגנוטיפית כלייתית על CAM עוף, התחל בלקיחת מיני מאגר עם קרום חדיר הקיים בבסיס. הפוך את המאגר המיני ומקם אותו מעל טיפת מדיה הקיימת בצלחת פטרי. זה מבטיח שהממברנה נמצאת במגע ישיר עם המדיה. העבירו את כליות העכברים לקרום הרטוב מראש. שאפו את המדיה העודפת סביב הכליות.
דגירה כדי להקל על הצמדת הכליה לקרום. לאחר מכן, קחו תרבית אקס-אובו מתרנגולת עוברית המציגה CAM מפותח במלואו. אתר את כלי הדם הבולטים ההיקפיים לעובר. קח את המאגר עם צמחי כליה מחוברים והפוך אותו מעל ה-CAM כך שהממברנה לוחצת את הכליה על רקמת ה-CAM.
השלם את המאגר במדיה כדי לתמוך בצמיחה של צמחי כליה ולמנוע את התכווצותם. לטפח למשך זמן ממושך. כלי הדם CAM חודרים לכליה המושתלת וגורמים לכלי דם בתוך צמחי הכליה, וממריצים את סיכום הכליה התפקודית על רקמת ה-CAM.
בהתאם לניסוי שלך, קח תוספות תרבית תאים טרנסוול המיועדות לצלחות של 6 בארות או 12 בארות. חותכים את גודל התוספת באמצעות כלי דרמל ליצירת טבעת פלסטיק בגובה 2 מילימטר עם קרום חדיר מחובר אליה.
יש ללטש את שולי הטבעת מהסבך בעזרת אזמל או סכין חדה. עקר את המיני-מאגרים באתנול 70%
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים