הזרקת Cisterna Magna כירורגית: שיטה למתן תאי גידול ישירות למערכת העצבים המרכזית של מודל Murine
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:10 דק׳ • April 30th, 2023
מוח העכבר מרופד בשלוש שכבות קרום המוח - הממברנה הדוראלית החיצונית ביותר, הממברנה הארכנואידית האמצעית וקרום הפיה הפנימי ביותר.
באזור האחורי של המוח, קרום הארכנואיד וה-pia מתערבים על ידי חלל תת-עכבישי מוחי או מלא CSF, הנקרא cisterna magna.
כדי לבצע הזרקה תוך-ציסטרנית של תאי הגידול, התחל בלקיחת מודל עכבר מורדם. הכינו את העכבר על ידי הסרת השיער משטח הגחון של הראש.
כעת, הנח את העכבר במצב נוטה והצמד את ראשו למסגרת סטריאוטקסית. מקם את חרטום העכבר, כוון אותו מעט כלפי מטה כדי ליישר את עמוד השדרה עם בור המים.
בעזרת מספריים, בצע חתך קטן בקו האמצע בקצה האחורי של המוח, בגובה האוזניים.
משוך בזהירות את שכבת השרירים השטחית. ניתן לדמיין את בור המים כמשולש הפוך המכוסה בקרום דוראלי שקוף.
לאחר מכן, קח מזרק המכיל תרחיף תאי גידול במחזור.
תוך שמירה על השרירים שמסביב, הכנס את המזרק מתחת לקרום הדורה, חודר דרך הממברנה הארכנואידית. שלב זה מאפשר הזרקת תאי גידול ישירות לתוך ה-CSF הקיים בבור המים.
לבסוף, סגור את מקום החתך על ידי הנחת קליפס פצע, ואפשר לעכבר להתאושש.
התחל בהזרקה תת עורית לעכבר 1 מיליגרם לק"ג בופרנורפין בשחרור מושהה. לאחר הרדמת העכבר, הכינו אותו לניתוח. מהדקים את אתר הניתוח עם מספיק שטח גבול כדי למנוע מהפרווה לזהם את מקום החתך.
לגלח את הפרווה של כל שטח הראש ולהכין את העור בטכניקה סטרילית. לאחר מכן
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים