בדיקה מבוססת ביולומינסנציה תאית: שיטת תפוקה גבוהה לבדיקת תרופות קומבינטורית

ביולומינסנציה תאית היא גישה רגישה ומהירה ביותר להקרנה בקנה מידה גדול של תרופות אנטי סרטניות.

טכניקה זו משתמשת בתאי גידול המבטאים לוציפראז - אנזים המזרז תגובה כימית מייצרת אור, הגורמת לתאי המארח לזהור בחושך. עוצמת הזוהר הנפלט עומדת ביחס ישר לצפיפות התאים החיים.

כדי להתחיל, זרע תאים המבטאים לוציפראז בצלחת תרבית שקופה אופטית המצופה במטריצה חוץ-תאית או ECM ודגירה.

במהלך הדגירה, ה- ECM מקדם היטב את הצמדת התאים לתרבות.

לאחר מכן, קח מלאי מרוכז של שילוב התרופות והוסף כמויות שונות של אמצעי תרבית להכנת דילול סדרתי של תערובת התרופות.

כעת, הסר את מדיום התרבות מהתאים הדבוקים. הוסף דילולים שונים של שילוב התרופות ודגירה.

במהלך הדגירה, שילוב התרופות פועל באופן סינרגטי על מטרות תאיות.

כעת, הסר את המדיום המכיל תרופה והוסף מדיום טרי המכיל לוציפרין.

לוציפרין מתפזר על פני הממברנה ונכנס לתאים. הלוציפראזות המתבטאות על ידי התאים משתמשות ב-ATP תאי כדי לחמצן לוציפרין ולפלוט אותות אור.

כמת את הביו-לומינסנציה התאית תחת מערכת הדמיה.

ירידה בפליטת האור עם ריכוז מוגבר של תרופות מעידה על ירידה בכדאיות התאים. זה מתאם להשפעה האנטי-פרוליפרטיבית של התרופה על תאי המטרה.

מצפים צלחות תחתונות אופטיות של 96 בארות בתערובת מטריצה חוץ-תאית כגון מטריג'ל ודוגרים אותן למשך שעה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. מסירים את עודפי התערוב