טיהור גרעינים מבוסס צנטריפוגה הדרגתית: טכניקה להשגת שבר אולטרה-טהור של גרעינים שלמים באמצעות צנטריפוגת שיפוע צפיפות

כדי לבודד ולטהר גרעינים שלמים, התחל בלקיחת חלק גרעינים גולמי בשפופרת. השבר מכיל גרעינים שלמים יחד עם שברי גרעינים שבורים ופסולת.

מערבבים שבר זה עם מדיום שיפוע צפיפות מתאים כך שהוא יוצר מתלה בריכוז הנמוך ביותר.

כעת, פתרונות שכבות של צפיפות הולכת וגדלה של אותו תווך שיפוע מתחת לשבר הגרעינים הגולמי שהוכן מראש כדי ליצור שיפוע צפיפות לא רציף רב-שלבי. שלב זה מאפשר לשבר הגרעינים הגולמי ליצור פס בחלק העליון של השיפוע.

לאחר מכן, צנטריפוגה את הצינור במהירות נמוכה.

בהתבסס על ההבדלים בצורה ובמסה, גרעינים שלמים נודדים באופן שונה בהשוואה לפסולת ושברים גרעיניים. התוצאה היא גרעינים שלמים היוצרים רצועה נפרדת.

לאחר הצנטריפוגה, אתר את הרצועה המובחנת המורכבת מגרעינים שלמים בממשק של פתרונות שיפוע צפיפות.

בעזרת פיפטה, שאפו את השכבות העליונות של השיפוע כדי להקל על הגישה לרצועת הגרעינים הטהורה. אסוף את הרצועה המכילה גרעינים לתוך צינור טרי.

דמיין את הגרעינים הללו תחת מיקרוסקופ אור. גרעינים שלמים נראים עגולים לחלוטין עם קרום גרעיני שלם סביבם.

לבסוף, אחסן את השבר הגרעיני הטהור לניתוח נוסף.

הוסף 200 מיקרוליטר של תמיסת יודיקסנול 50% לגרעינים לריכוז סופי של 25% יודיקסנול וערבב 10 פעמים כשהפיפטה מוגדרת ל -300 מיקרוליטר.

לאחר מכן, הוסיפו 300 מיקרוליטר של תמיסת יודיקסנול 29% מתחת לתערובת 25% בעזרת קצה דק P1000 כדי