קיבוע ומכתים של מקטע רקמות בהקפאה: הליך לעיבוד קטעי רקמת מוח קפואה למיקרודיסקציה בלייזר

0 views • 2:41 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי להבדיל בין אוכלוסיות תאים ספציפיות ברקמת גידול מוח הטרוגנית של עכבר לצורך בידודם לאחר מכן, התחל בלקיחת שקופית זכוכית הנושאת את החלק המעניין של רקמת גידול המוח השמורה בהקפאה.

דגירה ברצף של הרקמה בריכוזים הולכים ופוחתים של אתנול. אתנול ממיס את המדיום המוטמע שחדר לרקמה ומקבע את הרקמה תוך שמירה על שלמות חומצת הגרעין.

בנוסף, אתנול מחזיר לחות לרקמה, ומאפשר אפילו צביעה במהלך השלבים הבאים.

כעת, טפל ברקמה עם סגול קרסיל. סגול קרזיל - צבע בסיסי - מכתים רכיבים תאיים חומציים כמו חומצות גרעין.

לאחר מכן, יש לצבוע את הרקמה עם Eosin Y. Eosin Y - צבע חומצי - מכתים רכיבים תאיים בסיסיים כגון חלבונים ציטופלזמיים.

שלב צביעה דיפרנציאלי זה מסייע להבחין בין הציטופלזמה למבנים תאיים אחרים, ומאפשר זיהוי תאים מעניינים.

לאחר הצביעה, טבלו את הרקמה בריכוזים הולכים וגדלים של אתנול כדי לייבש את הרקמה ולמנוע עיוות מוגזם של הרקמות.

לאחר מכן, שטפו את הרקמה עם קסילן. קסילן עוקר ומסיר אתנול מקטע הרקמות.

לבסוף, הוסף פתרון הרכבה מתאים על קטע הרקמה כדי לשמר את מורפולוגיה של הרקמות.

קטע הרקמה המעובד מוכן לשימוש למיקרו-דיסקציה בלייזר - תהליך המאפשר בידוד מדויק של תאים ספציפיים מהרקמה.

טבלו את השקופיות בטבילות אתנול יורדות ברצף של 30 שניות, ולאחר מכן צביעת תמיסת קריסטל סגול למשך 20 שניות ו-5 שניות בתמיסת אאוזין Y של 0.5%.

בתום הדגירה של eosin Y, השתמש בנייר פילטר כדי לייבש את השקופיות ולייבש את השקופיות בטבילות אתנול עולות ברצף. לאחר טבילת אתנול של 60 שניות, שטפו את השקופיות במיכל קסילן למשך 3 דקות.

לאחר מכן, יבש את השקופיות על משטח נטול RNase בטמפרטורת החדר למשך 10 שניות לפני הרכבת הדגימות במדיום הרכבה שהוכן עם מים ללא RNase. לאחר 10 עד 20 שניות, העבירו את השקופיות לפלטפורמת המיקרוסקופ.

07:30

פריימר לאימונוהיסטוכימיה על רקמות Cryosectioned מוח חולדה: דוגמא להכתמת Microglia ונוירונים

Related Videos

0 Views

08:35

A Glioblastoma האדם דגם תרבות פרוסה Organotypic לחקר גידול תאים סרטניים ואפקטים ספציפיים לחולה של תרופות אנטי פולשניות

Related Videos

0 Views

07:58

חיסון חופשי של מוחות עכבר

Related Videos

0 Views

28:32

פלאש מקפיא Cryosectioning E12.5 מוח עכבר

Related Videos

0 Views

10:25

הכנת הדגימה, הדמיה, ניתוח הפרוטוקולים מיקרוסקופית סכין קצה סריקה

Related Videos

0 Views

02:37

חתך רקמת מוח של עכבר קפוא: הליך להשגת קטעי רקמה קפואה דקה מרקמת מוח מורין קפואה

Related Videos

0 Views

04:44

עיבוד מוח של עכבר לניתוח במורד הזרם

Related Videos

0 Views

13:32

Microdissection לכידת ליזר אוכלוסיות מועשרות של הנוירונים או נוירונים יחידים לניתוח ביטוי גנים לאחר פגיעה מוחית טראומטית

Related Videos

0 Views

05:51

הזרקת intracerebroventricular ו intravascular של חלקיקים נגיפיים ו פלורסנט microbeads לתוך המוח בילוד

Related Videos

0 Views

09:29

לייזר מונחה אטלס סטיאוטטי ללכוד את Microdissection של אזורים במוח מושפע פציעה טראומטית

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026