הדמיה תוך-חיונית מבוססת חלון גולגולת במודל עכבר: טכניקת הדמיה לחקר ההתנהגות של תאי סרטן שהוזרקו מראש במוח של מודל מורין

הדמיה תוך-חיונית דרך חלונות הדמיה אופטיים מאפשרת מעקב ברזולוציה גבוהה אחר תאים בודדים כדי לחקור את התנהגותם במיקרו-סביבה הטבעית בבעל חיים חי.

כדי להתחיל, קחו עכבר מורדם שמוחו מוזרק מראש לתאים סרטניים ויש לו חלון גולגולת מושתל בתוך טבעת מתכת. תאי הסרטן מבטאים חלבונים פלואורסצנטיים גרעיניים.

מקם את העכבר, עם הפנים כלפי מעלה, בקופסת הדמיה. המחזיק המגנטי בקופסת ההדמיה מסייע לאבטח את חלון הגולגולת המושתל.

כעת, העבירו את קופסת ההדמיה לתוך תא ההדמיה המבוקר סביבתית של מיקרוסקופ הפוך כדי לנתח את התנהגות התאים הסרטניים במוח.

במצב מולטיפוטון, הגדר את הלייזר לאורך גל מתאים. התמקדו באזור הגידול כדי לזהות את הקרינה מתאי סרטן.

הגדר מחסנית z עבור כל עמדה כדי לרכוש תמונות תוך-חיוניות מרובות של תאים סרטניים במישורים אופטיים שונים.

שלב זה מאפשר לכידה של חלק ניכר מתאי הסרטן במיקרו-סביבת הגידול מבלי להשפיע על רזולוציית התא.

לאחר מכן, רכוש תמונות ממיקומים שונים של הגידול למשך זמן ממושך.

מעקב אחר הנתיב של תאים סרטניים במישורים אופטיים שונים מסייע לקבוע נדידת תאי גידול בודדים באמצעות תוכנה מתאימה.

בנקודת הזמן הניסיוני המתאימה, הנח את העכבר עם הפנים כלפי מעלה בקופסת הדמיה והגדר את מטרת המים פי 25 למצב z הנמוך ביותר. הוסף טיפת מים גדולה למטרה והעביר את קופסת ההדמיה לתא האקלים הכהה של 37 מעלות צלזיוס של המיק