אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:05 דק׳ • April 30th, 2023
בתגובה למושכים כימיים מסוימים המשתחררים על ידי גידולים מוצקים, תאים חיסוניים כגון מקרופאגים הקשורים לגידול או TAMs חודרים לגידולים המוצקים. לאחר מכן, TAMs אלה מקלים על התקדמות הגידול.
כדי לחקור את האינטראקציות בין TAMs לתאי גידול במבחנה, התחל בלקיחת צלחת מרובת בארות עם החדרה קרומית. סידור זה מפריד באופן זמני את הבאר לשני תאים.
לאחר מכן, הוסף מתלה של TAM לתא העליון של הטרנסוול.
השלם את התא התחתון של הטרנסוול עם מדיום מותנה המועשר במושכים כימיים המופרשים על ידי תאי גידול.
דגרו את הצלחת לזמן הרצוי.
במהלך הדגירה, מודולטורים כימיים מושכים TAMs. זה מוביל לתנועה של TAMs לתא התחתון דרך קרום ההכנסה הנקבובי באמצעות כימוטקסיס המושרה על ידי כימיקלים.
כעת, הסר את התוספת מהבאר. העבירו את המדיום המותנה המכיל את אוכלוסיית ה-TAM המהגרים לתוך צלחת מתאימה למדידה פלואורסצנטית.
טפל בתאים עם מאגר ליזה המכיל צבע פלואורסצנטי. מאגר זה מבצע ליזה של המקרופאגים. בסופו של דבר, מולקולות הצבע נקשרות לחומצות הגרעין, ומייצרות פלואורסצנטיות מוגברת.
לבסוף, סרוק את הצלחת באמצעות קורא לוחות פלואורסצנטי. פלואורסצנטיות גבוהה מצביעה על נדידה מוצלחת של מקרופאגים באמצעות כימוטקסיס המושרה על ידי כימיקלים.
ראשית, הביאו את החומרים הדרושים לטמפרטורת החדר. הוסף 250 מיקרוליטר מתאי MV-4-11 המוכנים לכל תוספת. לאחר מכן, הוסף 400 מי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים