אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:02 דק׳ • April 30th, 2023
נוירוספרות הן אגרגטים כדוריים שאינם דבקים של תאי מבשר עצביים או NPCs.
כאשר הם מצופים בתנאי תרבית דבקים ספציפיים, NPCs עשויים לנדוד באופן ספונטני החוצה מהנוירוספרה.
כדי להעריך את תגובת הנדידה של NPCs, ראשית, הכינו תרחיף NPC בצפיפות הרצויה במדיה מתאימה.
לאחר מכן, זרעו את תרחיף התא לתוך צלחת תרבית המכילה מדיה ודגרו.
גורמי הגדילה הספציפיים במדיה תומכים בהתפשטות התאים. בנוסף, היעדר מצע ציפוי שומר על התאים תלויים במדיה, מה שמקל עליהם ליצור אגרגטים תלת-ממדיים של תאים הנקראים נוירוספרות.
בהשגת הגודל הרצוי, אסוף את הנוירוספרות.
צנטריפוגה והשעיה מחדש של כדור הנוירוספירה במדיה המדוללת.
לאחר מכן, צלחו את מתלה הנוירוספירה לצלחת מצופה מטריצה חוץ-תאית המכילה מדיה מדוללת ודגירה.
במהלך התרבות, הנוירוספרות נצמדות למטריצה החוץ-תאית.
עם הזמן, בשל מרכיבי המטריצה החוץ-תאית, כמה NPCs מתחילים לנדוד הרחק מליבת הנוירוספרה.
כעת, הסר את המדיה ותקן את התאים.
צלם תמונות ניגודיות פאזה של הנוירוספרות המציגות נדידת תאים.
בעזרת תוכנה מתאימה, מדוד את שטח הנוירוספירה הכוללת ואת מסת התא הפנימית.
לבסוף, הפחיתו את שטח המסה הפנימי של התא מהשטח הכולל של הנוירוספירה כדי לחשב את נדידת ה-NPC הממוצעת מהנוירוספירה.
כדי ליצור את הנוירוספירה, פיפטה 1 מיליליטר של 100% מדיית התפשטות לתוך צלחת של 35 מילימטר ללא כל מצע ציפוי. לאחר מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים