אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:48 דק׳ • July 8th, 2025
תא גוסס משחרר מקטעים של נטול תאים או cfDNA מחוץ לתא. כדי לנתח את התפלגות הגודל של שברי cfDNA, התחל עם שבב DNA מרובה בארות - מערכת אלקטרופורטית נימית מיניאטורית. כל באר בשבב מכילה תעלות הפרדה מיקרופלואידיות רבות בבסיסה.
טען את מטריצת הג'ל הפוליסכריד ותערובת צבע הקרינה בבאר המיועדת על השבב. מקם את השבב על מכלול ההתחלה המצויד במזרק ריק. סגור את מכלול ההתחלה ולחץ על הבוכנה כלפי מטה כדי ליצור לחץ כלפי מטה. זה מקל על כניסת הג'ל הצמיג מהבאר לתעלת ההפרדה המתאימה.
פתח את המכלול ומלא את הבארות הנותרות בתרחיף cfDNA וסולם DNA בטווח הגדלים הידוע. התקן את השבב על מנתח השברים. המתח החזק מניע את כניסת תרחיף cfDNA מבארות הדגימה לתעלת ההפרדה הטעונה מראש במטריצת ג'ל, שם ה-DNA מוכתם בצבע.
כאשר ה-DNA נע מהקתודה לכיוון האנודה, שברי DNA קטנים יותר נודדים מהר יותר דרך הג'ל בעוד שהשברים הגדולים יותר נעים לאט יותר. זה מוביל להפרדה מבוססת גודל של שברי DNA. הגלאי מזהה את הקרינה היחסית מהשברים, משווה אותה לסולם ה- DNA ומייצר אלקטרופרוגרמה - גרף המציין את התפלגות הגודל של cfDNA.
כדי לנתח את גודל שברי ה-DNA, ראשית, אבטח את לוחית הבסיס לתחנת השבב והתאם את הקליפ במיקום הנמוך ביותר. הנח שבב DNA חדש ברגישות גבוהה על תחנת ההתחלה של השבבים והוסף 9 מיקרוליטר של תערובת צבע ג'ל לתחתית באר השבב 'G'. מקם את הבוכנה ב-1 מילי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים