הכנת פיגום זרעי MSC: טכניקה להכנת פיגומים עם תאי גזע מזנכימליים להשתלה כירורגית במודל מורין

תאי סרטן מייצרים גורמי ביות כימוטקטיים כדי למשוך את תאי הגזע המזנכימליים או MSCs מכלי הדם לעבר מיקום הגידול.

כדי לחקור את ההשפעה של תאים אלה על צמיחת הגידול במבחנה, התחל בנטילת מצע פיגום מעוקר. העבירו אותו לצלחת באר המכילה את המדיה הרצויה כדי להרטיב מראש את הפיגום. הנח אותו על משטח יבש כדי להסיר עודפי מדיה שנדבקים לפיגום להדבקה טובה יותר של התאים. מעבירים את הפיגום המיובש חלקית לבאר טרייה. זרע טיפה של תרחיף MSC על הפיגום.

בנוסף, הוסף מדיה נוספת בפינות הבאר כדי ליצור תא הידרציה המונע אידוי מדיה מהטיפה במהלך הדגירה שלאחר מכן. דגירה כדי לאפשר ל-MSCs להיצמד למשטח הפיגום. הפוך את הפיגום כדי לחשוף את המשטח הלא זרוע. פיפטה טיפה טרייה של מתלי MSC בצד זה ותן ל-MSC להיצמד.

לאחר ש-MSCs נדבקו לשני צידי הפיגום, כסו אותו במדיה נוספת וודא שכל התאים נמצאים במגע עם המדיה. דגירה עד שה-MSCs גדלים ומסתננים לתוך המרווחים והנקבוביות של הפיגום. פיגום הזרעים של MSC מוכן להשתלה כירורגית.

הכן את הפיגומים 48 שעות לפני ההשתלה בעכברים על ידי חיתוך פיגומי PLA לחתיכות בגודל חלל כריתה של כ-2 על 2 מילימטרים. עקרו את הפיגומים על ידי טבילה באתנול 70% למשך 15 דקות. לאחר 15 דקות, טבלו את הפיגומים ב- PBS. לאחר מכן, הניחו את הפיגומים במדיום הנשר המותאם של Dulbecco המכיל 10% סרום בקר עוברי ו-1% פניצילין-סטרפטומיצין תוך ה