JoVE Encyclopedia of Experiments
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:09 דק' • July 8th, 2025
טומוגרפיה מולקולרית פלואורסצנטית או FMT היא טכניקת הדמיה המסייעת לקבוע את התפלגות החלבונים הפלואורסצנטיים הקיימים בגידולים. כדי לבצע FMT, התחל בלקיחת עכבר מורדם. מודל עכבר זה מתוכנן לבטא חלבונים פלואורסצנטיים קרובים לאינפרא אדום בתאי הגליובלסטומה - התאים הסרטניים של המוח.
כעת, הנח את העכבר במצב שכיבה במרכז קלטת הדמיה. הדק את מכסה הקסטה והכנס אותו לתחנת העגינה של מצלמת FMT. לאחר שנכנס פנימה, זהה אזור גידול מתאים המכיל תאי גליובלסטומה מסומנים. האור הקרוב לאינפרא אדום חודר עמוק דרך רקמת המוח ומגיע לתאי המטרה.
גלי אור אלה סורקים את כל אזור הגידול במספר נקודות. כתוצאה מכך, החלבונים הפלואורסצנטיים בתוך תאי הגליובלסטומה מייצרים אותות פליטה פלואורסצנטיים. אותות אלה מזוהים לאחר מכן על ידי מערכת ההארה מלמעלה, המייצרת תמונות דו-ממדיות באיכות גבוהה ממקומות שונים באזור הגידול שנבחר.
לבסוף, השתמש באלגוריתמי התוכנה כדי לשלב את התמונות הללו ולשחזר מודל תלת-ממדי טומוגרפי המצביע על מיקום הגידול במוח. לאחר הסריקה, הסר את העכבר מקלטת ההדמיה ואפשר לו להתאושש.
כדי לדמות את התאים המוזרקים, הנח את בעל החיים המקבל המורדם בקלטת ההדמיה של מצלמת טומוגרפיה מולקולרית פלואורסצנטית - מתאם ראש תחילה במצב שכיבה, כשהראש במרכז הקסטה. כשהקסטה סגורה, הדק את כפתורי הכוונון ל -17 מילימטרים.
כאשר החיה מאובטחת, הכנס את הקסטה לתחנת העגינה הפנימית ופתח את תוכנת ההדמיה והמנתח. בחלון "כרטיסייה ניסיונית", בחר את "מסד הנתונים" ו"קבוצת הלימוד" המתאימים ופתח את חלון "לשונית סריקה". לחץ על "בחר נושא" כדי לבחור את הנושא לתמונה ובחר את ערוץ הלייזר בחלונית "ערוץ לייזר".
לחץ על "לכידה" כדי לרכוש תמונה, ולחץ וגרור את שדה הסריקה בתמונה שצולמה כדי לזהות את מיקומי המקור. סמן את האפשרות "הוסף לתור השחזור" ולחץ על "סריקה" בחלון "לשונית סריקה". בסיום הסריקה, יש להוציא את קלטת ההדמיה מתחנת העגינה ולהחזיר את בעל החיים לכלוב שלו, תוך ניטור, עד להתאוששות מלאה.
כדי לנתח את התמונות בתוכנת ההדמיה והמנתח, פתח את חלון "כרטיסיית ניתוח" ולחץ על כפתור הסימן "+" בחלונית "בחירת מערך נתונים" כדי לטעון את מערך הנתונים והנושא לניתוח. לאחר מכן, השתמש בסמל האליפסואיד כדי לבחור את אזור העניין ולחץ באמצעות לחצן העכבר הימני על העמודה "סף" כדי להתאים את הסף ל-0 בחלונית "נתונים סטטיסטיים".