אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:21 דק׳ • July 8th, 2025
במערכת העצבים המרכזית, פריציטים הם תאים רב תפקודיים העוטפים את תאי האנדותל, היוצרים את הציפוי התאי הפנימי של הנימים. פריציטים עוזרים לווסת את זרימת הדם ולשמור על הומאוסטזיס במוח.
כדי לבודד פריציטים, התחל בלקיחת נימי מוח בקר קפואים בבקבוקון. לאחר ההפשרה, העבירו את התכולה לצינור המכיל את המדיה הרצויה. צנטריפוגה לכדור הנימים. הסר את החומר המקפיא המכיל נוזל על. השעו מחדש את הגלולה הנימים במדיה וזרעו את התרחיף לבקבוק מצופה חלבון מטריצה חוץ-תאית.
דגירה כדי לאפשר לנימים להיצמד לציפוי בבקבוק. החלף את המדיה במדיה המכילה הפרין. בתרבית, ציפוי חלבון המטריצה החוץ-תאית מעודד פריציטים לנדוד הרחק משברי הנימים ולהתרבות, בעוד שהפרין ממריץ את נדידת תאי האנדותל.
החלף את המדיה המבוזבזת במדיה המכילה הפרין. עם הזמן, פריציטים מקרינים תהליכים מוארכים הנצמדים חזק לבקבוק. עם שטח מצע מוגבל, תאי אנדותל מתרבים ויוצרים שכבה חד-שכבתית מעוכבת מגע. לאחר השגת צפיפות פריציטים מתאימה, הסר את המדיה ושטוף את הבקבוק עם חיץ.
השתמש בטריפסין-EDTA כדי לנתק את תאי האנדותל הקשורים באופן רופף מהבקבוק. לאחר מכן, הוסף מדיה כדי לנטרל את פעילות טריפסין-EDTA. שטפו עם מדיה שוב ושוב כדי להסיר את תאי האנדותל המנותקים. הוסף מדיה וודא שהפריציטים יישארו מחוברים לבקבוק. דגרו על התרבות המועשרת בפריציטים כדי להתרבות.
התחל בהפשרת בקבוקון אחד
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים