אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 5:19 דק׳ • July 8th, 2025
התחל בלקיחת מודל עכבר נקבה מורדם בהריון המונח במצב שכיבה. הכינו את העכבר על ידי הסרת שיער מאזור הבטן. חתכו את העור ואת שכבות השרירים שמתחתיו כדי לחשוף את קרני הרחם - האתרים המארחים עוברים ברי קיימא.
כעת, משוך את קרני הרחם מחלל הבטן. קח נימי זכוכית חדים המכילה את תמיסת ה- DNA הרצויה של הפלסמיד. אתר את מוח העובר והזריק את תמיסת ה- DNA של הפלסמיד דרך דופן הרחם לחדר הרביעי. מיקום זה קדמי לפרימורדיום המוח הקטן - המיקום הרצוי להעברת DNA בסופו של דבר.
לאחר ההזרקה, משוך את הנימים הריקים. לאחר מכן, לצורך אלקטרופורציה של העובר המוזרק DNA, מקם את שתי האלקטרודות מעל דופן הרחם כך שהאלקטרודה החיובית תכסה את פרימורדיום המוח הקטן והאלקטרודה השלילית תכסה את האזור סביב האוזניים.
החל פולסים חשמליים למשך הזמן הרצוי. פולסים אלה הופכים את תאי העצב המוחיים לחדירים, ומאפשרים ל- DNA הפלסמיד להיכנס לתאים הממוקדים. לבסוף, הנח את קרני הרחם בחזרה בתוך חלל הבטן במיקומן הטבעי. תפרו את החתכים, העבירו את העכבר לכלוב שלו ואפשרו לו להתאושש.
התחל בהעמסת נימי זכוכית בורוסיליקט לתוך מושך מיקרופיפטה ומשיכה ליצירת קצה עדין. סמן את קצה הנימים בדיו שחור להדמיה טובה יותר במהלך ההזרקה וצייר קנה מידה על הזכוכית. בעבודה תחת סטריאומיקרוסקופ, השתמש בסרגל ובפינצטה מחט חדה כדי לקצץ את הקצה לאורך של כ -6 מילימטרים וליצור קצה משופע
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים