יצירת מיקרו-גידולים: טכניקת תרבית חוץ גופית לתרבית מיקרו-גידולים תלת-ממדיים לניתוח תגובה לטיפול תרופתי

מיקרו-גידולים - אגרגטים תלת מימדיים של תאי גידול במבחנה - מחקים מקרוב את המיקרו-סביבה של הגידול in vivo ומשמשים פלטפורמות מבטיחות להערכת יעילות התרופות. כדי ליצור מיקרו-גידולים, התחל בהשעיה אחידה של תאי גידול שמקורם בחולה.

לאחר מכן, יש לדלל את תרחיף התא בנפח הרצוי של מטריצה חוץ-תאית מקוררת שמקורה באדם או ECM. פיפטה כמויות קטנות של תערובת מטריצת תאים זו על לוח מתכת מותאם אישית המכיל סיכות עם ציפוי הידרופובי. הציפוי ההידרופובי על הסיכות מאפשר לטיפות לשמור על צורתן הכדורית.

דגירה כדי להקל על הג'לציה של ה- ECM, להטמיע את התאים בפנים. כעת, העבירו את חרוזי הג'ל המוטבעים בתא לצלחת תרבית בנפח גדול המכילה מדיה מתאימה. דגירה למשך הזמן הרצוי. בתרבית, התאים העטופים מתחילים להצטבר בתוך מטריצת ה-ECM, המספקת סביבה לצמיחת תאים ללא גירוי.

בנוסף, רכיבי המדיה מתפזרים דרך המטריצה ומקדמים את התפשטות התאים, מה שמקל עליהם ליצור מיקרו-גידולים תלת מימדיים בתוך החרוזים. לאחר מכן, העבירו את החרוזים המכילים מיקרו-גידול לצלחת מרובת בארות המכילה מדיה. טפל בקבוצה אחת של המיקרו-גידולים בתרופה המעניינת ודגירה.

השלם את המיקרו-גידולים עם מדיה ותמיסת תרופות דו-שבועיים. קבע את המורפולוגיה של התא במיקרו-גידולים באמצעות הדמיית תאים חיים. המיקרו-גידולים הלא מטופלים מציגים צמיחה מתמשכת, בעוד שהמיקרו-גידולים הרגישים לתרופו