דיסקציה של המוח הקטן והכנת פרוסות: שיטה ליצירת פרוסות רקמה מהמוח הקטן של העכבר

0 צפיות5:02 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בעכברים, המוח הקטן ממוקם בבסיס המוח הקדמי ומורכב משתי המיספרות רוחביות המחוברות על ידי קו אמצע - ורמיס. המוח הקטן, המכיל את רוב תאי העצב במוח, חיוני למחקרים נוירולוגיים.

כדי ליצור פרוסות מוח קטן, התחל עם ראש עכבר ערוף ראש. הכנס מספריים לנקב מגנום - הפתח בבסיס הגולגולת. חותכים בעדינות את הגולגולת ומסירים אותה. לאחר מכן, הפוך את המוח החוצה וחתוך את העצבים האופטיים והטריגמינליים. שחרר את המוח למדיום דיסקציה צונן כשהצד הגבי שלו כלפי מעלה. הפרד את המוח האחורי משאר חלקי המוח.

לאחר מכן, חתכו את הרגליים הבסיסיות של המוח הקטן - החיבור בין המוח הקטן לגזע המוח - כדי לנתק את המוח הקטן. הסר את קרומי המוח מהמוח הקטן. הנח בזהירות את המוח הקטן על פלטפורמת קוצץ רקמות בניצב ללהב המסוק. כעת, נתחו את פרוסות הרקמה בעובי מתאים. מיד מרטיבים את הפרוסות ומעבירים אותן בחזרה לצלחת הפטרי המכילה את מדיום החיתוך.

מפרידים ומזהים את הפרוסות מהוורמיס. מעבירים את הפרוסות שנבחרו לבאר בצלחת תרבית המכילה מצע גידול מתאים. דגרו את התרבית כדי לשמור על השלמות המבנית והתפקודית של פרוסות המוח הקטן המנותחות לניסויים נוספים.

כדי להתחיל, הכניסו מספריים קטנים בעדינות לתוך הנקב מגנום וחתכו את הגולגולת על ידי ביצוע חתך רוחבי אחד לכיוון הצד ולאחר מכן חתכו את כל גולגולת הראש. כדי להחזיר את החלק הגבי של הגולגולת, השתמש במלקחיים ישרים עדינים כדי להרים בזהירות את החלק הגבי של הגולגולת.

לאחר מכן, הכניסו בזהירות את המלקחיים בין הגולגולת הגחונית למוח. הפוך בעדינות את המוח וחתוך את עצבי הראייה והטריגמינל במספריים קטנים. לאחר מכן, סובבו את הראש או את החלק הגבי של הגולגולת הפוך ממש מעל צלחת תרבית תאים בקוטר 60 מילימטר המכילה מדיום דיסקציה קר כקרח כדי לעזור למוח ליפול על ידי כוח הכבידה.

בעזרת מלקחיים עדינים, כוונו את המוח כשהצד הגבי פונה כלפי מעלה והצד הגחוני שוכב. תחת המיקרוסקופ המשקפת, השתמש במלקחיים הישרים העדינים כדי לשתק את המוח בצד המוח הקדמי. לאחר מכן, הפרד את המוח האחורי משאר המוח. חותכים את הרגליים של המוח הקטן מתחת למוח הקטן כדי להפריד את המוח הקטן משאר המוח האחורי.

לאחר בידוד המוח הקטן, השתמש במלקחיים ישרים עדינים כדי לקרוע בזהירות את קרומי המוח. החזק את המוח הקטן בעדינות עם המלקחיים המעוקלים העדינים והנח אותו עם הצד הגבי כלפי מעלה על משטח הפלסטיק בניצב לסכין הגילוח של המסוק. לאחר מכן, עם קצה פיפטה קצה דק סטרילי המחובר לפיפטה של 1 מיליליטר, שאפו כל עודף של מדיום דיסקציה סביב המוח הקטן. לאחר מכן, בעזרת קוצץ טישו חתך חלקים סגיטליים בעובי 300 מיקרומטר של המוח הקטן.

לאחר מכן, הוסף טיפה של מדיום חיתוך על המוח הקטן הפרוס בעדינות. לאחר מכן, עם קצה פיפטה רחב קדח המחובר לפיפטה של 1 מיליליטר, שאפו לאט את המוח הקטן הפרוס והעבירו אותו בחזרה לכלי תרבית התאים בגודל 60 מילימטר המכיל מדיום דיסקציה קר כקרח.

לאחר מכן, השתמש בשני מלקחיים ישרים עדינים כדי להפריד פרוסות בודדות. לאחר מכן, עם קצה פיפטה רחב קדח המחובר לפיפטה של 1 מיליליטר, העבירו עד ארבע פרוסות נבחרות מהוורמיס יחד עם מדיום חיתוך כלשהו לתוספת תרבית אחת של צלחת בת 6 בארות. הסר את כל עודפי מדיום החיתוך סביב הפרוסות בעזרת קצה פיפטה דק.

10:02

אקס תרבות Vivo של פרוסות המוח הקטן אפרוח וממוקד מרחבית Electroporation של מבשרי תא גרגיר

סרטונים קשורים

0 צפיות

13:33

זמן לשגות Confocal הדמיה של נוירונים נודדים תרבות פרוסה Organotypic של המוח עכבר עובריים באמצעות באוטרו Electroporation

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:31

הישרדות התאים purkinje בתרביות פרוסה בלבלר

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:41

Assay Slice Organotypic עבור זמן לשגות הדמיה ברזולוציה גבוהה נדידת הנוירונים במוח אחרי לידה

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:47

הכנת פרוסות קוליקולו-תלמוקורטיקליות ממוח גור עכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:34

השגת פרוסות המוח הקטן ממוח אפרוח עוברי

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:11

יצירת פרוסות קליפת החגורה התלמוס-קדמית האמצעית ממוחות עכברים

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:10

יצירת אירועי ictal ספונטניים ולפי דרישה בפרוסות קליפת המוח של עכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:45

תרבויות Organotypic Slice ללמוד oligodendrocyte Dynamics וmyelination

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:02

בידוד של אוכלוסיות תאים שונות מהמוח הקטן פיתוח על ידי Microdissection

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026