Decellularization קומפלקס לב ריאה: טכניקה עבור decellularizing הלב והריאות מ מודל Murine
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 5:17 דק׳ • July 8th, 2025
דה-סלולריזציה מרוקנת איברים ממרכיביהם התאיים ומשאירה את מבנה ה-ECM שלם. זה עוזר בשימור הארכיטקטורה התלת מימדית של איברים. לצורך הליך הדה-סלולריזציה, הנח עכבר שעבר המתת חסד במצב שכיבה. נתח את העכבר וחשוף את קומפלקס הלב ריאה.
קשרו את כל כלי הדם העיקריים שמקורם בלב למעט אבי העורקים וכלי הדם העיקריים של מחזור הדם הריאתי. שלב זה מונע דליפת נוזלים במהלך הליך הזילוף שלאחר מכן. צור פתח בקנה הנשימה והכניס קטטר דרך פתח זה. צנתרו את אבי העורקים היורד מלמטה עד שהקטטר מגיע לקשת אבי העורקים.
תפרו את הצנתרים כדי לאבטח את מיקומם ולחבר אותם למשאבת הזילוף. התחל זלוף במים נטולי יונים. זלוף דרך אבי העורקים מאפשר הסרה יעילה של דם מכל כלי הדם הלבביים. בסופו של דבר, המים נכנסים לעורק הריאה המוביל לריאות.
לאחר הוצאת דם לחלוטין מכלי הדם של הריאות, הפסק את זלוף המים והחלף אותו בתמיסות ניקוי שונות הנעות בין עדין לחזק. הליך זה משחרר תאים ומשחרר את הרכיבים התוך-תאיים, מה שגורם ללב ולריאות להיראות שקופים.
החדרו שוב במים נטולי יונים כדי להסיר את כל מולקולות הניקוי שנותרו. אחסן קומפלקס לב ריאה נטול תאים בתמיסה המכילה אנטיביוטיקה, מה שמבטיח חיי מדף ארוכים.
התחל בגילוח בית החזה, הבטן והגב של העכבר המורדם עם קוצץ השיער. חיטוי האזור עם 70% אתנול. לאחר מכן, הצמד את העכבר למגש פוליסטירן, והאריך את גפיו הקדמיות והאחוריו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים