JoVE Encyclopedia of Experiments
ביולוגיה
0 צפיות • 6:47 דק' • July 8th, 2025
כדי להתחיל, הכינו עכבר מורדם במצב שכיבה. בצע חתך אורכי בצווארו ועקר את בלוטות הרוק. לאחר מכן, הפרד את הפאשיה - שכבת רקמת חיבור המקיפה את שרירי הרצועה - כדי לחשוף את קנה הנשימה הבסיסי.
דרך הפה, הכנס צינורית אינטובציה ואשר החדרה מדויקת של קנה הנשימה דרך החתך. חבר את הצינורית למאוורר המוגדר לפרמטרים הרצויים, המספקים אוורור נאות לעכבר.
כעת, מקם את העכבר במצב דקוביטוס לרוחב ימני. חתכו את העור בין שרירי החזה השמאליים והפרידו את הפאשיה. החלף את מכונת ההנשמה ללחץ נשיפה חיובי או להגדרת PEEP.
בצע כריתת בית חזה בצד שמאל בחלל הבין-צלעי השלישי - חתך שנעשה בין הצלעות השלישית לרביעית. הלחץ החיובי בדרכי הנשימה במצב PEEP מונע קריסה של המכתשית במהלך כריתת בית החזה.
לאחר הגישה ללב, הסר את קרום הלב. זהה את העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי או LAD - כלי אדום בוהק המסתעף מהעורק הכלילי השמאלי. עורק LAD מספק דם לחלק העיקרי של החדר השמאלי.
לקשור בניתוח את עורק LAD הפרוקסימלי לפרוזדורים השמאליים. קשירה זו של עורק LAD גורמת לחיוורון של החדר. סגור את החתך. החזירו את החיה לכלוב שלה. קשירת העורקים הקבועה של LAD חוסמת את זרימת הדם ואספקת החמצן לשרירי הלב, וכתוצאה מכך נזק ומות.
השתמש בסכין גילוח חשמלי כדי לגלח במהירות עכבר C57BL/6 זכר מורדם במשקל 25 עד 30 גרם על הגרון ובצד שמאל של כלוב הצלעות. אשר חוסר תגובה לצביטה בבוהן. מרחו משחה על עיני החיה. הנח את העכבר במצב שכיבה על כרית חימום והנח דחיסת גזה קטנה מתחת לראש כדי למנוע התחממות יתר של העיניים.
אבטח את הגפיים בעזרת סרט דבק. העבירו לולאה של תפר משי 5-0 מתחת לחותכות העליונות ואבטחו את קצה הלולאה על כרית החימום כדי לשמור על הפה פתוח במהלך הקנולציה. מרחו קרם אפילציה על האזורים המגולחים מראש ועסו בעדינות עם צמר גפן למשך דקה.
הסר את עודפי הפרווה והשמנת בעזרת גזה ונקה את העור החשוף בטיפות של 0.9% תמיסת מלח וגזה. מרחו חתיכות גזה סטריליות על הגרון ובית החזה המגולחים והשרו את הגזה ביודופובידון. הגדר את מכונת ההנשמה בנפח גאות של 7 מיליליטר לק"ג וקצב אוורור של 140 פעימות לדקה.
הזיזו את העכבר מתחת לסטריאומיקרוסקופ מיקרו-כירורגי. החזיקו את העור במרכז הגרון, בצעו חתך של 0.5 סנטימטר לאורך קו הזנב/צפאלי והפרידו את האונות של בלוטת הרוק. השתמש במלקחיים מעוקלים כדי להפריד בעדינות את הפאשיה של שריר הסטרנוהיואיד עד שהגרון וקנה הנשימה נראים לעין. לאחר מכן, אבטח את שולי הפתח בעזרת מחזירים המחוברים לרצועות אלסטיות.
לאחר מכן, משוך בעדינות את הלשון הצידה והשתמש במלקחיים כדי להכניס את המחט הפנימית הקהה של צינורית בגודל 16 לקנה הנשימה. דמיינו החדרה נכונה לקנה הנשימה דרך חתך הגרון וחברו את הצינורית למכונת ההנשמה. יש להניח על החתך תמיסת מלח סטרילית של 0.9% בתוספת גזה ספוגה ביודופובידון כדי לשמור על הרקמות רטובות במהלך הניתוח.
לאחר מכן, הנח את צינור הפליטה למים. נוכחותן של בועות מעידה על אינטובציה מוצלחת. לקשירת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי או LAD, העבר בזהירות את העכבר למצב דקוביטוס בצד ימין ואבטח מחדש את הגפה הקדמית השמאלית במצב החדש.
זהה את הקו בין שרירי החזה השמאלי הקטן והגדול ובצע חתך עור אלכסוני של 1 סנטימטר לאורך הקו. בעזרת מיקרו-מספריים מנתחים קהים, הפרד את הפאשיה של שרירי החזה מבלי לחתוך את הרקמות והשתמש במחזירים המחוברים לרצועות אלסטיות כדי לשמור על ההפרדה.
הגדר את המאוורר בלחץ נשיפה חיובי של 3 סנטימטרים של מים. השתמש במלקחיים קהים כדי לפתוח את חלל החזה בחלל הבין-צלעי השלישי בין הצלעות השלישית לרביעית. הכניסו שני מחזירים לכלוב הצלעות, אחד על כל צלע, והשתמשו במלקחיים עדינים מעוקלים כדי להסיר בזהירות את קרום הלב מבלי לפגוע בלב ובריאות.
אתר את ה-LAD כקו שטחי-אדום בוהק העובר מקצה האפרכסת השמאלית לכיוון הקודקוד. השתמש במחזיק מחט כדי להעביר תפר משי 7-0 מתחת ל-LAD, 2 עד 3 מילימטרים מתחת לפרוזדור השמאלי. משוך את המשי לאט כדי להימנע מקריעת רקמת הלב, קשר את הקשירה בשלושה קשרים. החלק השמאלי התחתון של החדר השמאלי יחוויר מיד עם הקשירה.
כעת, שחררו את מחזירי הצלעות, והחזיקו את הצלע השלישית בעזרת מלקחיים, בצעו שני מעברים עם תפר המשי 6-0 מתחת לצלעות השלישית והרביעית. הניחו שלוש טיפות של 37 מעלות צלזיוס, תמיסת מלח 0.9% על הפתח וסגרו את צינור הפליטה למשך 2 או 3 מחזורי נשימה כדי לנפח כראוי את הריאות.
הדק ואבטח את התפר בשתי זריקות, ושחרר את המחזירים המחזיקים את השרירים, ועוזר לשרירים לחזור למיקומם האנטומי הנכון. לאחר מכן, סגור את עור בית החזה עם שני תפרים ושתי זריקות של משי תפר 5-0. סגור את עור הגרון עם תפר אחד, תפר משי 5-0 ושתי זריקות.
מאמר זה מתאר הליך כירורגי לקשירה קבועה של העורק הכלילי השמאלי היורד (LAD) במודל של עכבר. שיטה זו נועדה להשראת איסכמיה של השריר הלבבי, כדי לאפשר את חקר תפקודי הלב ומנגנוני תיקונו.
ליגציה קבועה של העליל הכלילי הקדמי השמאלי (LAD) בעכברים מספקת מודל פרה-קליני חסון לחקר אוטם שריר הלב ומנגנוני פגיעה לבבית. מודל זה מאפשר לצוותי מו"פ בביו-פארמה לבחון היפותזות טיפוליות, לתקף מטרות לבביות ולהעריך את יעילות ההתערבות במערכת מבוקרת וניתנת לשחזור. ערכו האסטרטגי טמון בתמיכה בביטחון ניבוי וברציפות תרגומית משלב הגילוי המוקדם ועד לאישור פרה-קליני.
מודל זה של אוטם שריר הלב בעכברים ממוקם בממשק שבין השלב המוקדם של הגילוי, זיהוי תרכובות מובילות (lead identification) ותיקוף פרה-קליני לפיתוח תרופות למחלות לב וכלי דם.
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
סרטונים קשורים
0 צפיות
עודכן לאחרונה: 29 אוגוסט 2026