אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 4:09 דק׳ • July 8th, 2025
מיקרוסקופיה מולטיפוטונית מאפשרת ללכוד תמונות תלת מימדיות ברזולוציה גבוהה של כלי הדם המסומנים בפלואורסצנט בתוך הרקמה החיה. התחל עם עכבר מורדם במצב שכיבה.
הזריק בזהירות תרחיף של פלואורופור מצומד-דקסטרן לווריד הזנב שלו. המולקולות המוזרקות זורמות במחזור הדם ומגיעות לאיברים כמו הכבד. הצבע הפלואורסצנטי מסמן את סרום כלי הדם, ומסייע להדמיה של כלי הדם, בעוד שהדקסטרן בעל המשקל המולקולרי הגבוה המחובר מונע את דליפתם מכלי הדם.
הכן את אזור הבטן של העכבר. העבר אותו לבסיס מסגרת הדמיית האיברים המצוידת בטבעת יניקה המכילה עדשת הדמיה המחוברת למשאבת ואקום. חתך לאורך גבול החזה התחתון שלו כדי לחשוף את הכבד.
הנחיית טבעת היניקה לכבד, הפעלת ואקום או לחץ שלילי המאפשר את ספיחת הכבד לעדשה בטבעת היניקה. שלב זה מפחית את חפצי התנועה במהלך ההדמיה. העבר את מסגרת ההדמיה המכילה עכבר לשלב מיקרוסקופ סריקת הלייזר הרב-פוטוני.
כסו את העדשה במי מלח המשמשים כמדיום טבילה להדמיה ברזולוציה גבוהה. במהלך ההדמיה, הפוטונים הממוקדים באורך גל ארוך בעלי אנרגיה נמוכה יותר מאפשרים חדירה עמוקה יותר לרקמות ומעוררים פלואורופורים בכלי הדם בנקודת המוקד, וגורמים לפליטה וזיהוי של אותות פלואורסצנטיים.
סדרה של סריקות מהחתכים האופטיים שנבחרו בעומקים שונים משחזרת תמונה תלת מימדית מלאה של כלי הדם בתוך הרקמה.
לאחר אישור היעדר רפלקס יישור בעכבר C57B
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים