שליפת עוברי עכבר טרום לידתי: הליך לקצירת עוברים מעכבר בהריון

עוברי עכברים משמשים כמערכות מודל לחקר אמבריוגנזה מוקדמת של יונקים. כדי להחזיר עוברי עכברים סביב הלידה בשלב הרצוי של ההתפתחות העוברית, התחל עם עכבר בהריון שהומת בהמתת חסד במצב שכיבה.

לאחר מכן, עקר את אזור הבטן שלו ובצע חתך רוחבי בדופן הבטן כדי לחשוף את קרני הרחם הבסיסיות. קרני הרחם הן מבנים צינוריים ארוכים המכילים מחרוזת עוברים. כעת, הפרד בזהירות את קרני הרחם מהבטן על ידי כריתתן מהרקמה שמסביב.

העבירו את קרני הרחם שנקטפו לכלי המכיל חיץ. שטפו את קרני הרחם כדי להסיר שאריות רקמות ודם. יתר על כן, חתך בין אתרי ההשתלה לאורך קרני הרחם כדי להפריד כל עובר. כרתו את הדצידואה, שכבת השליה האימהית, יחד עם דיסק השליה שמקורו בעובר.

לאחר מכן, הסר את המבנה הקרומי החוץ-עוברי הקטן המקיף את העובר המספק לו תזונה - שק החלמון. לבסוף, הסר את קרום מי השפיר - הממברנה החוץ-עוברית הפנימית ביותר המורכבת משק מלא בנוזל המקיף ומגן על העובר - כדי לשחרר את עובר העכבר.

העוברים המשוחלמים סביב הלידה יכולים לשמש לחקר התפתחות יונקים מוקדמת.

נקה מספריים ומלקחיים עם 70% אתנול. כדי לאסוף עוברים סביב הלידה ב-E18.5 או E19.5, ראשית, המתת חסד של עכברים בהריון באמצעות שאיפת פחמן דו חמצני. לאחר מכן, בצע פריקת צוואר הרחם על פי הנחיות ה-NIH.

לאחר מכן, רססו 70% אתנול על פני הבטן הגחונית של החיה. לאחר מכן, בעזרת המספריים והמלקחיים הסטריליים, פתח את חלל הבטן בסופו של דבר. הרם את כל הרחם והפריד אותו מהגוף בקצות קרני הרחם. לאחר מכן, שטפו את כל הרחם עם 1x PBS בצלחת פטרי.

חותכים את הרחם באופן פלחי בעזרת מספריים מנתחים ומסירים את דצידואה השליה בעזרת מלקחיים מנתחים כדי לחשוף את העוברים בשקי חלמון. הסר תחילה את שק החלמון ולאחר מכן הסר את קרום מי השפיר בעזרת מלקחיים מנתחים כדי לשחרר את העוברים סביב הלידה.