בידוד שחלות עכבר יילודים: הליך כירורגי לקצירת זוג שחלות ממודל עכבר יילודים

כדי לבודד שחלות עכברים יילודים, התחל עם גור עכבר יילוד שהומת בהמתת חסד במצב שכיבה על משטח כירורגי. בצע חתך כירורגי ארוך בעור ובדופן הגוף כדי לחשוף את חלל הבטן. לאחר מכן, עקרו בעדינות את המעיים כדי לחשוף את קרני הרחם הבסיסיות.

קרני הרחם הן שני מבנים צינוריים ארוכים המתכנסים בצוואר הרחם ונמשכים משלפוחית השתן לכיוון הכליות. זהה את השחלות - בלוטות קטנות בצורת אליפסה - הממוקמות ממש מתחת לכליות בקצה קרני הרחם, המחוברות דרך צינורות הביצית.

כעת, חתכו את אתר ההצמדה של השחלה מכל קרן רחם כדי לשחרר את השחלות. העבירו מיד את השחלות שנכרתו לכלי תרבית סטרילי המכיל מצע מתאים לחימום מראש כדי לשמור על כדאיות הביציות בתוך הרקמה. הניחו את צלחת התרבות על הבמה המחוממת של מיקרוסקופ מנתח.

בעזרת מחט, הסר בזהירות את בורסת השחלות, שק של רקמת חיבור המקיפה את השחלה וכל שאריות צינור הביצית. לבסוף, העבירו את השחלות לצלחת מרובת בארות המכילה מדיה. ניתן להשתמש בשחלות המבודדות לעיבוד במורד הזרם.

התחל בהעברת 1 מיליליטר של מדיום דיסקציה לכל צלחת עובר מזכוכית סטרילית. לאחר הוצאת הגורים בני 0 עד 5 ימים לאחר הלידה, אחזו בעור המכסה את דופן הבטן במלקחיים עדינים וחתכו את העור ואת דופן הגוף. פתח את החתך הגדול הזה וחשף את הבטן. שלפוחית השתן בדרך כלל גודשת בשלב זה וניתן לנקב אותה כדי להקל על הדיסקציה.

בעזרת מלקחיים של שען, הזיזו הצידה את המעיים. לאחר מכן, משני הצדדים, עקוב אחר קרני הרחם משלפוחית השתן עד הכליה. השחלה היא מבנה דמוי ענן הממוקם ממש מתחת לכליה בחלק העליון של הרחם. אחזו בשחלה בעדינות ובעזרת מספריים חתכו אותה מהרחם. לאחר ניתוח שתי השחלות, העבירו אותן לתבשילים מלאים במדיום דיסקציה חם.

השתמש במיקרוסקופ דיסקציה עם שלב מחומם ב-37 מעלות צלזיוס כדי לנתח את השחלות. בעזרת מחטי אינסולין, חתוך את שק הבורסה וכל חומר עודף כולל החצוצרה עד שנשארת רק השחלה. לאחר מכן, העבירו כל שחלה לבאר של צלחת מוכנה בעזרת פיפטה מעוקלת.