אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 5:10 דק׳ • July 8th, 2025
בשחלה של יונקים, ביציות בוגרות לחלוטין שמקורן בזקיקים האנטרליים זקוקות רק לתקופת התבגרות קצרה בתרבית, גורם מכריע לאמבריוגנזה במבחנה. ביציות אלו מוקפות באשכול של תאים סומטיים, אותם יש להסיר באמצעות דנודציה כדי להקל על הזרקת הזרע.
כדי לבודד ביציות אנטרליות של עכברים, התחל עם עכברה מורדמת שהוזרקה מראש עם הורמון גונדוטרופין בסרום סוסה בהריון כדי לעורר צמיחת זקיקים. הכינו את העכבר וחתכו את הבטן התחתונה.
הוצא את המעי כדי לחשוף שחלות בחלק העליון של צינורות הרחם בצורת V. לנתח שחלה. העבירו אותו למדיום תרבית מאוזן מראש כדי לשמור על כדאיות הביציות. תחת סטריאומיקרוסקופ, זהה את הזקיקים האנטרליים על ידי החלל הייחודי שלהם המלא בנוזל.
בעזרת מחט סטרילית, נקב את הזקיקים האנטרליים של השחלה כדי לשחרר ביציות. בעזרת פיפטה בקוטר אופטימלי, שאפו בזהירות את הביציות כדי להגן עליהן מפני נזק מכני. הימנע משאיבת תאים זקיקים ופסולת רקמות אחרת.
לאחר מכן, העבירו את הביציות לטיפות מדיה מרובות המכוסות בשמן מינרלי. שלב זה מסייע בהסרת התאים הסומטיים שמסביב ויצירת ביציות נטולות. לבסוף, העבירו את הביציות המופשטות לטיפות מדיה טריות עם שמן מינרלי ושמרו אותן לניסויים נוספים.
כדי לקצור את השחלות, התחל בהזרקת IP לעכברים נקבות בנות 3 עד 6 שבועות עם 2.5 יחידות בינלאומיות של גונדוטרופין בסרום סוסה בהריון. יומיים לאחר מכן, כשעה ל
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים