אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 3:21 דק׳ • July 8th, 2025
כלי לימפה קיימים בדרמיס העור ותפקידם להסיר עודפי נוזל אינטרסטיציאלי מהרקמה. פגיעה בכלי הלימפה גורמת להצטברות נוזלים עודפת בחלל הבין-תאי ולעלייה בתצהיר תת עורי של רקמה סיבית ושומן. שינויים אלה גורמים לבצקת לימפה.
כדי ליצור לימפאדמה בזנב העכבר, קח עכבר מורדם והנח אותו במצב שכיבה. בצע כריתת עור היקפית בעובי מלא באתר מרוחק מתאים, דיסטלי לבסיס הזנב. לחתוך אתר נוסף בזנב נחות מהחתך הראשון.
בצע חתך עור אנכי המחבר בין שני החתכים שהוכנו מראש. בעזרת חתך זה, כרתו את כתם העור המכסה כדי לחשוף את הוורידים הצדדיים וכלי הלימפה.
קחו מזרק המכיל צבע מעקב צבעוני והזריקו אותו תת עורית בסמוך לקצה הזנב, מה שגורם לכלי הלימפה להיראות כחולים. לחצות את כלי הלימפה, לעטוף את מקום הפצע ולפקח על העכבר למשך הזמן הרצוי.
מיקרודיסקציה עוצרת את זרימת הלימפה בכלי הדם והנוזל נאסף בחלל הרקמות. כתוצאה מכך, בצקת לימפה מתמשכת נצפית כנפיחות של גב זנב העכבר לאתר הניתוח.
כדי להתחיל, מקם את העכבר הרדום בן ה-8 שבועות בירכתיים, והכן את הזנב עם 70% אלכוהול איזופרופיל. השתמש בקליפר כדי למדוד את קוטר הזנב במרווחים של 5 מילימטר החל מ-20 מילימטרים מבסיס הזנב. סמן חתך היקפי של 3 מילימטר על הזנב 20 מילימטרים מהבסיס.
בהגדלה מיקרוסקופית כירורגית, בצע כריתת עור קפדנית בעובי מלא של 3 מילימטרים, תוך השארת כל כלי הדם הבסיסיים שלמים. חותך סימן היקפי עליון, תחילה דרך הדרמיס, ואחריו חתך היקפי בעובי מלא 3 מילימטרים דיסטלי לחתך הראשון. בצע חתך אנכי בעובי מלא בניצב כדי לחבר את שני החתכים, ולאחר מכן השתמש בטנדר עדין עם שיניים כדי לתפוס קצה מוביל ולנתח עמוק בתוך מישור האווסקולרי לדרמיס ושטחי לאדוונטיציה של הווריד, בעזרת מספריים.
יש להזריק 0.1 מיליליטר של 1% איזוסולפן כחול תת עורי פרוקסימלי לקצה הזנב. זהה את שתי תעלות הלימפה המופיעות בכחול עקב ההזרקה, בסמוך לוורידי הזנב הצדדיים. לחצות את הלימפה בזהירות, לנתח מישור בין הווריד הצדדי ללימפה בעזרת מספריים מיקרוכירורגיות ישרות. העבירו את קצה להב המספריים בין כלי הלימפה לווריד הרוחבי, וסגרו את הלהבים כדי לחצות את כלי הלימפה. בסיום, חבשו את פצע הזנב עם חבישה שקופה דביקה סטרילית.