מודל יצירת דלקת בדרכי השתן: טכניקה למתן חיידקים אורופתוגניים בעכבר לפיתוח מודל דלקת בדרכי השתן

זיהום בדרכי השתן, או UTI, נגרם בעיקר על ידי קולוניזציה של חיידקי E. coli אורופתוגניים בכליות, בשופכנים, בשלפוחית השתן או בשופכה.

כדי ליצור מודל עכברי UTI, התחל בהנחת עכבר מורדם במצב שכיבה. בעזרת סטריאומיקרוסקופ, דמיין את אזור הבטן התחתונה של העכבר כדי לאתר את פתח השופכה הוורוד העמוק.

כעת, קח מזרק המכיל את תמיסת החיידקים האורופוגנית הרצויה עם קצה אנגיוקטטר מחובר אליו. הכנס את הקטטר בניצב לשופכה. הטה את המזרק כדי למקם אותו אופקית, ודחף אותו הלאה עד שהוא מגיע לשלפוחית השתן.

לאחר מכן, החדירו לאט את החיסון החיידקי לשלפוחית השתן. שמור על המזרק והצנתר במקומם למשך הזמן הרצוי כדי למנוע דליפה. החזר את הצנתר לאט מהשופכה ואפשר לחיידקים להתרבות.

ברגע שנכנסים פנימה, אוכלוסיית החיידקים פולשת לתאי האפיתל השטחיים של שלפוחית השתן, שם הם משתכפלים ליצירת קהילות חיידקים תוך-תאיות, או IBCs, בציטופלזמה של תאים אלה.

בסופו של דבר, החיידקים האלה משתחררים לתוך לומן שלפוחית השתן, שם הם מדביקים את התאים הסמוכים, וגורמים להתפשטות הזיהום.

מודל עכברי UTI מוכן כעת לניתוח נוסף במורד הזרם.

הרכיבו קצה אנגיוקטטר סטרילי בגודל 24 על מזרק של 100 מיקרוליטר. מלאו את המזרק בתמיסת החיידקים המוכנה. הנח בעל חיים אחד על משטח עבודה במצב שכיבה, ושמור על הרדמה איזופלורן יציבה, באמצעות חרוט אף במהלך ההחדרה. יש למרוח את משחת העיניים. הוצא את שאריות השתן על ידי הפעלת דחיסה עדינה, וביצוע תנועות מעגליות על האזור העל-ערווה. לאחר מכן, נקו את הבטן התחתונה עם 70% אתנול.

יש לשמן את קצה הצנתר במי מלח רגילים. הניחו את האצבע המורה של היד הלא דומיננטית על הבטן ודחפו אותה בעדינות כלפי מעלה. התחל את הצנתור של השופכה אנכית בזווית של 90 מעלות. לאחר שנתקלים בהתנגדות, הטה אותו אופקית לפני הכנסתו הלאה. בצע החדרה איטית של 50 מיקרוליטר של החיסון החיידקי. לאחר ההחדרה, שמור את המזרק והצנתר במקומם למשך מספר שניות נוספות, ולאחר מכן נסוג לאט כדי למנוע דליפה.