JoVE Encyclopedia of Experiments
ביולוגיה
0 צפיות • 3:17 דק' • July 8th, 2025
החלק הקדמי של העין מכוסה בקרנית - שכבה שקופה המאפשרת העברת קרני אור. הקרנית משתרעת לתוך הסקלרה - רקמת הגנה לבנה סביב העין. החלק של העין המורכב מהקרנית המוקפת בטבעת דקה של הסקלרה הוא הכפתור הקורנאוסקלרי.
כדי לכרות את הכפתור הקורנסקלרי, הניחו עין חזירית שלמה על צלחת פטרי. הסר את הלחמית - כיסוי רירי סביב הסקלרה - יחד עם השרירים החוץ-עיניים שמסביב כדי לגשת לכיסוי הסקלרלי. טפל בעין בתמיסת חיטוי מתאימה כדי להסיר מיקרואורגניזמים מזהמים מפני השטח של העין.
שוטפים את חומר החיטוי בתמיסת חיץ. העבירו את העין המחוטאת לכלי תרבות טרי. בצע חתך בסקלרה בסמוך לגבול הקרנית. בעזרת פתח זה, בצע חתך היקפי שלם כדי לחלק את העין לשני שברים.
דמיין את הצד הפנימי של המקטע הקדמי כדי לאתר את שכבת הענבייה המחוברת לסקלרה. רקמה זו מורכבת מקשתית פיגמנטית, גוף ריסי בצורת טבעת וחלק משכבת הכורואיד של כלי הדם. נתק את הענביה כדי לדמיין את השכבה הקורנאוסקלרלית. אחסן את הכפתור בתמיסת חיץ סטרילית לבדיקות נוספות.
השתמש במלקחיים סטריליים כדי להעביר את גלגל העין לצלחת פטרי. הסר את הלחמית ורקמת השריר סביב גלגל העין באמצעות להב אזמל # 15 ומלקחיים. לאחר מכן, תוך כדי החזקת עצב הראייה עם המלקחיים, הרם בעדינות את גלגל העין, והעביר אותו לצנצנת של חצי ליטר מלאה ב-PBS סטרילי.
לאחר שכל גלגלי העיניים מנוקים מהרקמה שמסביב, השתמשו במלקחיים סטריליים כדי להעביר אותם לצנצנת נוספת של חצי ליטר מלאה ב-3% פובידון-יוד ב-PBS. לאחר שגלגלי העיניים היו בצנצנת במשך דקה, העבירו אותם לצנצנת שלישית המכילה PBS סטרילי.
הניחו גלגל עין על צלחת פטרי נקייה והשתמשו במלקחיים כדי להחזיק אותה יציבה. בעזרת להב אזמל # 10A, חתכו ליד הקרנית. השתמש במספריים כדי לכרות את הקרנית, והשאיר כ -3 מילימטרים של סקלרה סביבה. ודא שהקצה החד של המספריים נמצא בחלל העל-כורואידלי ואינו חודר את הקשתית.
החזק את הכפתור הקורנאוסקלרי עם מלקחיים, והשתמש בזוג נוסף של מלקחיים מחודדים כדי להפריד בעדינות את רקמת הענבה. לאחר מכן, הרם את הכפתור הקורנוסקלרי כדי להפריד אותו משאר גלגל העין. יש לשטוף בקצרה את הכפתור בתמיסה של 1.5% של פובידון-יוד ב- PBS. לאחר מכן, הנח את הכפתור ב- PBS סטרילי בצלחת של 12 בארות.