אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 3:57 דק׳ • July 8th, 2025
לתרבות פלח העין הקדמי, התחל עם צלחת תרבית מתאימה. לצלחת התרבות יש במה מוגבהת במרכז, המחוברת לשתי יציאות נוזליות לזרימה ויציאה.
ראשית, הניחו קטע עין קדמי חזירי טרי המכיל קרנית מעל הבמה. לאחר מכן, הנח טבעת מהדק מעל קטע העין ואבטח אותה. לאחר מכן, הכינו מערך זלוף המורכב ממזרק מלא במדיום תרבית מתאים. חבר את המזרק לשסתום, מסנן וצינור עם רכזת מחט כפופה בקצה השני.
הכן מערך מאגר שהורכב באופן דומה באמצעות מזרק ריק. כעת, חבר את רכזות המחט של הזלוף ואת מערך המאגר ליציאות הזרימה והיציאה, בהתאמה. לחלחל בעדינות את המדיה ולאפשר לחלק הקדמי להתנפח.
המשיכו בזילוף ואפשרו לבועות ולמדיום העודף לזרום למאגר. לאחר מכן, דגרו את צלחת התרבות בגובה הרצוי ובתנאים הפיזיולוגיים הסטנדרטיים. התוצאה היא מודל תלת מימדי המדמה את הארכיטקטורה המורכבת של העין בתנאים פיזיולוגיים.
חבר מתמר לחץ לשסתום המאגר כדי לנטר כל הזמן את לחץ העין. מקטע העין הקדמי מוכן כעת לשימוש לניסויים נוספים.
לאחר הנחת החלק הקדמי בצלחת הפטרי, הרטיבו צמר גפן במדיה, וטפחו בעדינות במרכז הקרנית כדי להסיר פיגמנט כלשהו. החזיקו את העיניים עם מלקחיים, והסירו את הפיגמנט הנוסף סביב הסקלרה על ידי ניגוב. הניחו את החלק הקדמי ההפוך מעל האזור המוגבה של המנה התחתונה, וודאו שהקרנית תישאר במרכז האזור המוגבה.
מקם את clampטבעת על גבי הקטע הקדמי החדש שהוצב, והדק בעדינו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים